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过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长 被引量:3
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作者 龚玉静 吴洁 +1 位作者 王瑞娜 程燕 《西部医学》 2019年第12期1845-1850,共6页
目的探讨过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长机制。方法体外培养视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞,并分为空白对照组(control组)、转染对照组(Vector组)及过表达组(MT1JP组);采用RT-PCR... 目的探讨过表达长链非编码RNA MT1JP抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭和体内移植瘤的生长机制。方法体外培养视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞,并分为空白对照组(control组)、转染对照组(Vector组)及过表达组(MT1JP组);采用RT-PCR检测各组MT1JP的表达;克隆形成检测各组SO-RB50细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Transwell检测细胞侵袭情况;Western blot检测Ki67、VEGF蛋白表达情况。小鼠皮下注射SO-RB50细胞,建立移植瘤模型;RT-PCR检测长链的表达;统计裸鼠生存时间,绘制生存曲线;检测小鼠肿瘤重量;免疫组化检测小鼠肿瘤组织中Ki67和VEGF的表达情况。结果与空白对照组比较,转染对照组的MT1JP表达、单位面积细胞侵袭数目、Ki67、VEGF蛋白表达均无显著变化(P>0.05);与转染对照组比较,过表达组MT1JP的表达、细胞凋亡率显著升高(P>0.05),克隆实验细胞形成率、Ki67、VEGF蛋白表达、单位面积细胞侵袭数目显著降低(P<0.05);小鼠体内实验显示:与空白对照组比较,转染对照组小鼠肿瘤质量、生存期、Ki67、VEGF蛋白表达均无显著差异(P>0.05);相比转染对照组,过表达组小鼠MT1JP表达、小鼠生存率显著提高(P<0.05);肿瘤质量、Ki67、VEGF蛋白表达显著降低(均P<0.05)。结论过表达长链非编码RNA MT1JP可以抑制视网膜母细胞瘤SO-RB50细胞的增殖、侵袭,促进SO-RB50细胞的凋亡并抑制体内移植瘤的生长。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 so-rb50细胞 长链非编码RNA MT1JP 细胞侵袭
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DOT-BLOTTING在离子交换层析纯化SO-Rb50瘤细胞抗原中的应用
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作者 应方微 李永平 夏朝霞 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第1期82-82,共1页
关键词 DOT-BLOTTING 离子交换层析 纯化 so-rb50 瘤细胞 抗原 蛋白质 制备 抗RB单克隆抗体
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FG020318对视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50多药耐药的逆转作用 被引量:3
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作者 杨华胜 刘国颖 +2 位作者 徐涓涓 张平 黄丹平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期2026-2030,共5页
目的:研究2-[4-(2-嘧啶-2-乙烯基)-苯基]-4,5-双丙稀酰胺-(4,N,N-二乙胺苯基)-1(H)-咪唑(FG020318)对视网膜母细胞瘤耐药细胞株SO-Rb50/VCR的逆转作用。方法:通过体外浓度递增法诱导建立耐长春新碱细胞株SO-Rb50/VCR,采用MTT药敏试验及... 目的:研究2-[4-(2-嘧啶-2-乙烯基)-苯基]-4,5-双丙稀酰胺-(4,N,N-二乙胺苯基)-1(H)-咪唑(FG020318)对视网膜母细胞瘤耐药细胞株SO-Rb50/VCR的逆转作用。方法:通过体外浓度递增法诱导建立耐长春新碱细胞株SO-Rb50/VCR,采用MTT药敏试验及流式细胞术测定细胞内罗丹明123浓度的方法研究FG020318和环孢霉素A对耐药株多药耐药的逆转作用。结果:FG020318(2.5μmol/L)即可明显降低SO-Rb50/VCR的半数致死有效浓度(IC50)值和增加多药耐药(MDR)细胞内罗丹明123的浓度,且上述作用随浓度的增加而增强。在相同浓度时,FG020318对SO-Rb50/VCR的逆转倍数要高于环孢霉素。结论:一种新的肿瘤耐药逆转剂FG020318可部分逆转耐药细胞株SO-Rb50/VCR的耐药性,可能是一种很有希望的逆转MDR的新药。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 抗药性 多药 FG020318 SO—Rb50细胞
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川芎嗪抑制人视网膜母细胞瘤SO-RB50生长机制的研究 被引量:6
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作者 陈朝 潘雪珂 +2 位作者 余克明 Joseph M.Kaminski 庄菁 《新医学》 2012年第6期376-379,共4页
目的:研究川芎嗪对人视网膜母细胞瘤(RB)SO-RB50细胞增殖的影响,并探讨其作用与趋化因子CXCR4表达水平之间的关系。方法:体外培养人SO-RB50细胞,经川芎嗪处理不同时间后,应用MTT法检测SO-RB50细胞的增殖抑制;采用荧光定量逆转录PCR和蛋... 目的:研究川芎嗪对人视网膜母细胞瘤(RB)SO-RB50细胞增殖的影响,并探讨其作用与趋化因子CXCR4表达水平之间的关系。方法:体外培养人SO-RB50细胞,经川芎嗪处理不同时间后,应用MTT法检测SO-RB50细胞的增殖抑制;采用荧光定量逆转录PCR和蛋白免疫印迹法分别从基因和蛋白质水平检测川芎嗪对SO-RB50细胞趋化因子受体CXCR4表达的影响,进而应用流式细胞仪检测SO-RB50细胞的细胞周期分布。结果:MTT结果显示川芎嗪对人SO-RB50细胞增殖有明显的抑制作用,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01);细胞周期结果显示川芎嗪处理后的SO-RB50细胞G0/G1期增多,S期细胞减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);通过荧光定量逆转录PCR及蛋白免疫印迹实验证明,川芎嗪能下调人SO-RB50细胞CXCR4的表达水平。结论:川芎嗪对人SO-RB50细胞的增殖有明显抑制作用,且能下调SO-RB50细胞中与肿瘤发生及生长密切相关的CXCR4表达水平。 展开更多
关键词 川芎嗪 人视网膜母细胞瘤 细胞周期 CXCR4
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CircAKT3对视网膜母细胞瘤细胞SO-Rb50增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 周鹏翔 信波 +1 位作者 宋晓鹏 孙启会 《陕西医学杂志》 CAS 2020年第8期932-935,共4页
目的:探讨CircAKT3对视网膜母细胞瘤细胞SO-Rb50增殖和凋亡的作用及生物学行为的影响。方法:采用qRT-PCR检测视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50和视网膜上皮细胞细胞系ARPE-19中CircAKT3的表达水平。后续将SO-Rb50细胞分为两组,实验组细胞转... 目的:探讨CircAKT3对视网膜母细胞瘤细胞SO-Rb50增殖和凋亡的作用及生物学行为的影响。方法:采用qRT-PCR检测视网膜母细胞瘤细胞系SO-Rb50和视网膜上皮细胞细胞系ARPE-19中CircAKT3的表达水平。后续将SO-Rb50细胞分为两组,实验组细胞转染CircAKT3 SiRNA,而对照组转染SiRNA对照序列。采用qRT-PCR检测细胞的转染效率,采用CCK-8实验检测两组细胞的增殖能力,采用流式细胞仪检测两组细胞的凋亡率。结果:相较于ARPE-19细胞,SO-Rb50细胞内CircAKT3的表达水平明显增高(P<0.01)。实验组在转染CircAKT3 SiRNA 24 h后,细胞内CircAKT3的表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。CCK-8实验结果显示,实验组在24、48 h的OD值和对照组无统计学差异,而在72、96 h的OD值明显低于对照组(P<0.05)。流式细胞仪结果显示,实验组和对照组的凋亡率分别为(7.71±0.396)%和(3.51±0.478)%,实验组凋亡率明显高于对照组(P<0.001)。结论:CircAKT3可促进SO-Rb50细胞的增殖和抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA CircAKT3 视网膜母细胞瘤细胞 细胞增殖 细胞凋亡 so-rb50
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视网膜母细胞瘤SO-RB_(50)瘤细胞NOD-SCID鼠皮下异位移植全身转移瘤模型的建立 被引量:3
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作者 张波 钟秀风 +3 位作者 李永平 黄文革 聂莉 张文忻 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第4期638-642,共5页
目的:建立人视网膜母细胞瘤(RB)的严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficent)小鼠(NOD-SCID鼠)皮下移植模型,并探讨RB转移的发生、分布规律.方法:NOD-SCID小鼠皮下接种人视网膜母细胞SO-RB50细胞,定期观察小鼠的行为及肿瘤的形... 目的:建立人视网膜母细胞瘤(RB)的严重联合免疫缺陷(severe combined immunodeficent)小鼠(NOD-SCID鼠)皮下移植模型,并探讨RB转移的发生、分布规律.方法:NOD-SCID小鼠皮下接种人视网膜母细胞SO-RB50细胞,定期观察小鼠的行为及肿瘤的形成、生长、转移.采用HE,免疫组织化学染色方法,对皮下肿瘤原发灶及远处转移灶行病理组织学研究.结果:皮下接种小鼠肿瘤生长的潜伏期为12~19d,成瘤为100%,5只鼠有远处转移灶,发生转移的时间在32d后,时间分布不一,肿瘤转移灶主要分布在腹腔和肾旁,小鼠的异种移植瘤和转移灶组织形态上与人类的RB一致,光镜下细胞胞质少、核深染、可见病理性核分裂,为未分化型.结论:NOD-SCID小鼠的荷瘤人视网膜母细胞瘤模型,成瘤率高,成瘤潜伏期短,较高转移率的特点. 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 so-rb50瘤细胞 NOD-SCID鼠 皮下异位移植 全身转移瘤 动物模型 肿瘤转移
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视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb50及SO-Rb70对六种抗癌药物敏感性测定 被引量:2
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作者 张平 冯官光 +3 位作者 易玉珍 吴中耀 李永平 郑健梁 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期109-112,共4页
目的利用体外培养的视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)细胞株筛选对Rb敏感的化疗药物。方法采用噻唑蓝(3,-4,5Dimethyliazol-2,5diphenyltetrazoliumbromide... 目的利用体外培养的视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,Rb)细胞株筛选对Rb敏感的化疗药物。方法采用噻唑蓝(3,-4,5Dimethyliazol-2,5diphenyltetrazoliumbromide,MTT)法对SO-Rb50和SO-Rb70瘤细胞株进行更生霉素、长春新碱、鬼臼噻吩甙、柔红霉素、顺氯氨铂、平阳霉素6种药物体外敏感实验。结果6种药物作用于SO-Rb5048小时50%抑制浓度(50%inhibitoryconcentration,IC50)值(μg/ml)分别为0.0004、0.0016、0.0389、0.047、0.29、0.44,72小时分别为0.00025、0.00081、0.0151、0.0192、0.097、0.11,作用于SO-Rb7048小时IC50值分别为0.00065、0.00149、0.0282、0.043、0.37、0.215,72小时分别为0.00042、0.00082、0.0146、0.0176、0.035、0.084。结论SO-Rb50和SO-Rb70瘤细胞对于上述6种化疗药物均敏感,根据其IC50值,药物敏感性顺序依次为更生霉素、长春新碱、鬼臼噻吩? 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 细胞株 so-rb50 so-rb70 抗癌药物 敏感性 RB 肿瘤
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Detection of Tumor Suppressor Gene and Oncogene in SO-Rb_(50) Human Retinoblastoma Cell Line
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作者 Xinjuan Wang Feifei Zeng +5 位作者 Zhongwei Xu Yurong Zheng Lixin Wang Yuzhen Yi Guanguang Feng Jianliang Zheng 《眼科学报》 1993年第1期34-37,共4页
Retinoblastoma (Rb) is the most common malignant'cancer of eye.So-Rb_(50) is the first Rb cell line established in China in 1988.It has passed to the 387th passage now.We collected cells of the 327th passage of SO... Retinoblastoma (Rb) is the most common malignant'cancer of eye.So-Rb_(50) is the first Rb cell line established in China in 1988.It has passed to the 387th passage now.We collected cells of the 327th passage of SO-Rb_(50),purified its genomic DNA and detected it with Rb and c-myc cDNA probes respectively(normal human white blood cells DNA was the control).We found the Rb gene was deleted while c-myc gene was amplified three times.This provides a basis for further study of the regulation of tumor development and tumor reversal with this cell line in vitro.Eye Science 1993;9:34-37. 展开更多
关键词 so-rb50 Rb gene c-myc gene SOUTHERN BLOT
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视网膜母细胞瘤抗原致敏的树突状细胞疫苗抗SO-RB_(50)细胞系的实验研究 被引量:7
9
作者 唐松 李永平 +3 位作者 应方微 李永强 冯官光 易玉珍 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期229-233,共5页
目的 研究视网膜母细胞瘤 (RB)抗原致敏的树突状细胞 (DC)疫苗体外特异性对RB细胞系SO RB50 杀伤作用 ,为进一步研究RB的治疗提供新的思路。方法 以RB细胞的蛋白抗原体外冲击致敏健康人 (正常对照组 )及RB患者 (患者组 )来源的成熟DC ... 目的 研究视网膜母细胞瘤 (RB)抗原致敏的树突状细胞 (DC)疫苗体外特异性对RB细胞系SO RB50 杀伤作用 ,为进一步研究RB的治疗提供新的思路。方法 以RB细胞的蛋白抗原体外冲击致敏健康人 (正常对照组 )及RB患者 (患者组 )来源的成熟DC ,并将其与自体T细胞混合培养 ,诱导出抗SO RB50 的特异性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL) ,以Burkitt淋巴瘤Raji细胞作为对照靶细胞 ,采用噻唑蓝 (MTT)分别比较CTL对SO RB50 和Raji细胞的杀伤率及正常对照组与RB患者组来源特异性杀伤率的组间差异性。结果 对SO RB50 与Raji 2种靶细胞 ,正常对照组和RB患者组的CTL细胞毒作用均随着效靶比的增加而增加 ,对SO RB50 细胞的杀伤作用各效靶比均强于相应效靶比的Raji细胞(P <0 .0 1) ;各效靶比正常对照组CTL对SO RB50 细胞的特异性杀伤作用均显著强于RB患者组CTL(P <0 .0 1) ;而各效靶比正常对照组与RB患者组CTL对Raji细胞的非特异性杀伤作用则相近 ,两者比较 ,差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。结论 应用RB抗原负载DC可诱导出针对SO RB50 细胞抗原特异性的CTL ,这种方法对RB的治疗可能具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 抗原 树突状细胞 疫苗 so-rb50细胞系 实验 T淋巴细胞 细胞毒性
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抗视网膜母细胞瘤细胞株SO-Rb_(50)单克隆抗体相应抗原的提取 被引量:5
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作者 应方微 李永平 +5 位作者 唐松 钟秀风 林健贤 郑健樑 潘苏华 易玉珍 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 2003年第3期152-155,共4页
目的 从 SO- Rb50 细胞中提取出抗视网膜母细胞瘤单克隆抗体相应的抗原。 方法 用离子交换层析法从 SO- Rb50 细胞中初步分离抗原 ,并利用抗视网膜母细胞瘤单克隆抗体以 dot blotting鉴定抗原 ,然后以十二烷基硫酸钠 -聚丙烯酰胺凝... 目的 从 SO- Rb50 细胞中提取出抗视网膜母细胞瘤单克隆抗体相应的抗原。 方法 用离子交换层析法从 SO- Rb50 细胞中初步分离抗原 ,并利用抗视网膜母细胞瘤单克隆抗体以 dot blotting鉴定抗原 ,然后以十二烷基硫酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化出抗原目的蛋白条带 ,用 Westein blotting检测其相对分子质量。 结果 从 SO- Rb50 细胞裂解液的总蛋白中分离出一条抗原目的蛋白条带 ,其相对分子质量约为 83× 10 3。 结论 从 SO- Rb50 细胞裂解液中能够提取出抗视网膜母细胞瘤单克隆抗体对应的抗原。 展开更多
关键词 抗视网膜母细胞瘤细胞株 so-rb50 单克隆抗体 抗原 提取 分离 纯化
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piggyBac转座子调节pPiggyBac-Rb质粒的构建 被引量:1
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作者 潘雪珂 陈朝 +3 位作者 田思佳 Joseph M.Kaminski 余克明 庄菁 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第20期3755-3758,共4页
背景:外源性Rb基因的导入是抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖的有效途径,piggyBac转座子介导的外源基因表达载体高效安全,在基因治疗方面具有广阔的应用前景。目的:探讨piggyBac转座子介导的外源性Rb基因的转染效率及其对视网膜母细胞瘤细胞... 背景:外源性Rb基因的导入是抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖的有效途径,piggyBac转座子介导的外源基因表达载体高效安全,在基因治疗方面具有广阔的应用前景。目的:探讨piggyBac转座子介导的外源性Rb基因的转染效率及其对视网膜母细胞瘤细胞的抑制作用。方法:采用RT-PCR技术扩增Rb基因编码区Rb cDNA,定向插入到载体pPiggyBac,获得PiggyBac调节的Rb表达质粒pPiggyBac-Rb;通过单独转染或合并pPiggyBac-helper转染人视网膜母细胞瘤细胞SO-RB50。结果与结论:考马斯亮蓝染色证明piggyBac转座子系统的转染效率最高,荧光定量PCR以及免疫荧光实验证明其介导的目的基因Rb与宿主SO-RB50细胞基因组整合效率最高且可在细胞中长期稳定表达,MTT实验证明经其所介导的外源性Rb基因表达对细胞活性影响最为显著。结果提示piggyBac转座子有可能成为视网膜母细胞瘤基因治疗的安全有效载体。 展开更多
关键词 PIGGYBAC转座子 so-rb50细胞 转染 RB基因 基因治疗
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视网膜母细胞瘤SO-RB_(50)瘤细胞体外粘附晶体实验的初步报告 被引量:1
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作者 李永平 易玉珍 +1 位作者 冯官光 郑健梁 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 1996年第3期163-165,共3页
视网膜母细胞瘤SO-RB50瘤细胞体外粘附晶体实验的初步报告李永平易玉珍冯官光郑健梁肿瘤细胞侵袭邻近的正常组织及转移是恶性肿瘤最基本的生物学特性之一,对肿瘤侵袭、转移的研究,多限于肺癌、肝癌、黑色素瘤、横纹肌肉瘤等[... 视网膜母细胞瘤SO-RB50瘤细胞体外粘附晶体实验的初步报告李永平易玉珍冯官光郑健梁肿瘤细胞侵袭邻近的正常组织及转移是恶性肿瘤最基本的生物学特性之一,对肿瘤侵袭、转移的研究,多限于肺癌、肝癌、黑色素瘤、横纹肌肉瘤等[1~5],有关视网膜母细胞瘤(re... 展开更多
关键词 视网膜母细胞瘤 so-rb50瘤细胞 体外粘附
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