先天性动脉导管未闭致病基因SOX18新突变的识别与功能研究

目的:探索先天性动脉导管未闭致病基因SOX18新突变。方法:入选134例散发性先天性动脉导管未闭(PDA)患儿和202名性别匹配的同种族健康者,对其SOX18基因进行Sanger测序分析以寻找致病新突变。克隆SOX18基因,构建野生型SOX18真核表达质粒,通过定点诱变制备突变型SOX18真核表达质粒,脂质体转染HeLa细胞后,双报告基因定量分析突变的功能效应。结果:在1例散发性先天性PDA患儿中发现了SOX18基因新突变,即NM_018419.3:c.313C>T;p.(Gln105^(*))突变。该突变不存在于其他PDA患儿和对照者。双报告基因分析显示突变型SOX18对靶基因NR2F2的转录激活作用丧失。结论:SOX18基因功能缺失性新突变可导致散发性先天性PDA,这对先天性PDA的精准医学防治有潜在的临床意义。

先天性室间隔缺损致病基因SOX18新突变的发现及功能研究

目的:探讨先天性室间隔缺损致病基因SOX18的新突变。方法:收集156例先天性心脏病患儿和216名无先天性心脏病对照者的临床数据和血液样本,提取基因组DNA,测序分析SOX18基因以识别新的致病突变。克隆SOX18基因,构建野生型SOX18表达载体,通过定点诱变产生突变型SOX18表达载体,转染HeLa细胞,应用双报告基因定量分析突变体的功能。结果:在1例散发性先天性室间隔缺损患儿中发现SOX18基因新突变,即NM_018419.3:c.430C>T;p.(Gln144*)突变。该突变不存在于其他先天性心脏病和对照者患儿。双报告基因定量分析表明突变型SOX18对靶基因NR2F2的转录激活作用丧失。结论:SOX18基因功能缺失性突变可能是部分先天性室间隔缺损的分子病因,这对先天性室间隔缺损的的精准防治具有潜在的临床意义。

胃癌中SOX18、VEGF-C和VEGFR-3的表达及意义

目的探讨SOX18、血管内皮生长因子C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)和血管内皮生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)在胃癌中的作用。方法利用免疫组化SP法检测60例胃癌及15例对应远端正常胃黏膜组织中SOX18、VEGF-C和VEGFR-3的表达。结果胃癌中SOX18、VEGF-C和VEGFR-3的阳性率显著高于正常黏膜组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌中SOX18、VEGF-C蛋白表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),VEGFR-3蛋白表达与肿瘤淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。胃癌组织中SOX18与VEGF-C(r=0.372,P=0.002)、VEGFR-3(r=0.308,P=0.011),VEGF-C与VEGFR-3(r=0.333,P=0.005)阳性表达均存在显著正相关。结论 SOX18、VEGF-C和VEGFR-3可能在胃癌的发生、发展和淋巴结转移中发挥重要作用。SOX18可能通过调控VEGF-C表达介导淋巴管生成,从而促进胃癌的淋巴结转移。

SOX18在胃腺癌中的表达及临床意义

目的探讨SOX18在胃腺癌中的表达与临床病理特征的关系,分析其在胃腺癌中的作用。方法利用免疫组织化学SP法检测60例胃腺癌及其相应(15例)远端正常胃黏膜组织中SOX18的表达。结果胃腺癌中SOX18的阳性表达率为76.7%(46/60),显著高于正常粘膜组织中的30.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。胃腺癌中SOX18蛋白的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别、Lauren组织学分型及肿瘤分化程度均无关(P>0.05)。结论 SOX18在胃腺癌中的高表达可能与胃癌的发生、发展和淋巴结转移密切相关。

转录因子SOX18研究进展

性别决定区Y框18[SRY(sex determining region Y)-box 18,SOX18]是一种转录因子,属于SRY相关基因,常表达于生长中的脉管系统,参与血管、淋巴管发育过程,其基因突变或异常表达与许多体内肿瘤发生发展有关。

眼睑基底细胞癌患者术后组织SOX18、整合素αvβ3表达与血管生成的关系

目的分析眼睑基底细胞癌患者术后组织SOX18、整合素αvβ3和CD34的表达及对血管生成的作用。方法 105例眼睑基底细胞癌术后组织为研究组,55例基底细胞乳头状瘤术后组织为对照组。应用免疫组化SABC法检测两组SOX18、整合素αvβ3和CD34表达。结果研究组SOX18、整合素αvβ3蛋白表达阳性率和CD34标记的微血管密度(MVD)均明显高于对照组(P<0.000 1),研究组SOX18、整合素αvβ3和MVD表达均与肿瘤最大径、脉管累犯、TNM分期和增殖细胞核抗原(PCNA)指数密切相关。SOX18和整合素αvβ3均与MVD具有正相关性。结论眼睑基底细胞癌患者术后肿瘤组织SOX18和整合素αvβ3高表达,间质中MVD增高,三者具有一定的协同作用,对促进肿瘤的发生和进展有重要作用。

含人SOX18基因真核表达载体的构建及其重组蛋白诱导血管内皮细胞增殖的研究

目的:构建含人SOX(SRY related high mobility group box)18的重组表达质粒,并研究其对血管内皮细胞增殖能力的影响。方法:通过RT-PCR技术从血管内皮细胞中扩增SOX18编码基因序列,将其插入真核表达载体pSec Tag-2B构建重组表达质粒pST-SOX18,分别转染人胚肾上皮细胞HEK293T和血管内皮细胞,通过免疫印迹技术检测SOX18的蛋白表达情况;进一步通过CCK-8实验检测SOX18对血管内皮细胞增殖能力的影响。结果:成功构建重组质粒p ST-SOX18,重组蛋白能够在HEK293T和血管内皮细胞中表达;SOX18的过表达促使血管内皮细胞合成血管内皮生长因子(VEGF),促进血管内皮细胞增殖。结论:SOX18重组蛋白能够促进血管内皮细胞增殖。

SOX18通过上调KLF4促进血管瘤内皮细胞增殖并抑制其凋亡的实验研究

目的:构建表达SOX18的真核表达载体,并合成靶向于SOX18的siRNA,探索SOX18调控血管瘤内皮细胞(hemangioma-derived endothelial cell,HemECs)增殖的机制。方法:检测SOX18及相关基因在临床样本中的表达。构建SOX18的真核表达载体,通过转染该真核表达载体以及靶向于SOX18的siRNA,实现过表达和敲减SOX18。以细胞计数的方法检测SOX18对血管内皮细胞增殖的影响;流式细胞术检测超表达和敲减SOX18后对细胞凋亡的影响;qRT-PCR检测过表达和敲减SOX18后对相关基因的调控作用。结果:SOX18在血管瘤组织总的表达显著高于正常组织。成功构建了过表达SOX18的真核表达载体pCMV-HA-SOX18,并验证其能够在HemECs细胞内过表达。此外,结合siRNA敲减实验,证实SOX18能够促进HemECs增殖并抑制其凋亡。qRT-PCR检测和Western Blot检测证明SOX18能够上调KLF4和VEGF-C的表达。结论:SOX18能够通过促进KLF4和VEGF-C的表达促进HemECs增殖。

基于转录组测序分析SOX18在湖羊毛囊毛乳头细胞中的功能

旨在初步探究SOX18基因在湖羊毛囊毛乳头细胞中的功能。本研究首先采用免疫荧光染色试验对从湖羊毛囊中分离的细胞进行鉴定,然后构建SOX18基因过表达载体并通过qRT-PCR和Western blot检测其过表达效率。将经过鉴定且生长状态良好的毛乳头细胞分为两组,分别转染SOX18过表达载体和空载质粒,每组3个重复。采用Trizol法提取6个样本的总RNA并构建cDNA文库,利用Illumina Novaseq6000平台进行测序,然后对样本相关性和差异表达基因进行分析,并对差异表达基因进行GO功能分类和KEGG通路注释,寻找SOX18基因调控的相关候选基因和通路。为确认转录组数据的准确性,随机选取9个差异表达基因进行qRT-PCR验证。免疫荧光结果显示,毛乳头相关基因在所分离的细胞中高表达,表明所分离的毛乳头细胞纯度高。qRT-PCR和Western blot检测发现,SOX18基因过表达能够增加毛乳头细胞中SOX18的mRNA和蛋白水平,表明构建的SOX18基因过表达载体可用于后续试验。转录组分析结果表明样本间相关性好,SOX18过表达组和对照组相比共发现157个基因差异表达,其中103个基因在SOX18过表达后上调,54个基因下调,qRT-PCR分析表明转录组数据准确性高。GO功能分析显示,一些差异基因富集于细胞进展和毛囊发育过程。KEGG富集分析表明,一些差异表达基因富集于细胞增殖和毛囊发育相关信号通路。GO功能分析和KEGG富集分析表明SOX18在毛乳头细胞的增殖和毛囊发育过程中起作用。本研究通过转录组测序分析发现SOX18可能通过影响细胞增殖和毛囊发育相关的基因和信号通路来影响毛乳头细胞增殖和毛囊生长发育,研究结果为解析SOX18基因在湖羊毛乳头细胞和毛囊中的分子调控机制提供了理论基础。

胃腺癌中SOX-18、MMP-2和MMP-14的表达及相关性

目的检测胃腺癌中SOX18蛋白(SOX18)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶14(MMP-14)的表达特点,关注三者的协同作用及在不同临床特征中的表达差异,以期为临床工作提供理论支持。方法本实验以95例胃腺癌作为观察组,以70例正常胃黏膜组织作为对照组,采用免疫组织化学方法检测两组中SOX18、MMP-2和MMP-14的表达,探讨三者在不同临床病理特征中表达的差异及相关性。结果观察组中SOX18、MMP-2和MMP-14表达的阳性率明显高于对照组,观察组中SOX18、MMP-2和MMP-14表达的阳性率均与肿瘤最大径线、分化程度、淋巴结转移、脉管浸润和Ki67的表达密切相关。相关性分析显示观察组中SOX18和MMP-2、SOX18和MMP-14的表达均呈正相关。生存分析显示SOX18、MMP-2和MMP-14的表达均与预后相关。结论胃腺癌组织中SOX18、MMP-2和MMP-14高表达,三者对肿瘤的进展有促进作用,术后联合检测SOX18、MMP-2和MMP-14的表达对判断胃腺癌的预后有一定价值。

淋巴管生成与疾病

淋巴管生成参与机体许多病理过程,如组织炎症、组织水肿、肿瘤转移等。最近淋巴管生成分子机制研究的巨大进展将提高人们对这些疾病的认识和治疗。