SOX12基因在Vero细胞感染猪流行性腹泻病毒过程中的功能研究

[目的]探究SOX12基因对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)复制的影响,以期为抗PEDV育种提供有效分子标记。[方法]本研究合成3条SOX12基因干扰序列(siRNA1、siRNA2、siRNA3)及其阴性对照(siNC)并转染至非洲绿猴肾细胞(Vero细胞),转染48 h后收集细胞,利用实时荧光定量PCR检测干扰效率。将有效的干扰片段和siNC分别转染至Vero细胞24 h后,用感染复数为0.05的PEDV感染细胞,分为4组:感染PEDV 12 h试验组(12 hpi-siRNA)、感染PEDV 12 h对照组(12 hpi-siNC)、感染PEDV 24 h试验组(24 hpi-siRNA)及感染PEDV 24 h对照组(24 hpi-siNC),利用实时荧光定量PCR检测PEDV N及SOX12基因的表达水平,通过Western blotting检测各组细胞PEDV N蛋白表达水平,利用组织半数感染量(50%tissue culture infective dose, TCID_(50))检测PEDV的病毒滴度,并利用间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay, IFA)法检测各组细胞中PEDV复制情况。通过GeneMANIA网站预测SOX12基因的互作基因,利用实时荧光定量PCR检测抑制SOX12基因表达后其互作基因的表达变化。[结果]SOX12基因3条干扰片段的干扰效率为30%~60%,其中siRNA3干扰效率最高,可达60%。与12 hpi-siNC和24 hpi-siNC组相比,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组PEDV N基因的转录和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。病毒滴度表型测定结果表明,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组的PEDV病毒滴度显著低于各自对照组(P<0.05);IFA结果也表明,12 hpi-siRNA和24 hpi-siRNA组的PEDV复制明显少于对照组。基因互作预测及实时荧光定量PCR检测结果显示,与siNC组相比,干扰SOX12基因的表达后,其互作基因SOX17、DDX51、ZMIZ2、SSRP1、TAF6和ABCB8的表达水平均显著降低(P<0.05)。[结论]本研究揭示了SOX12基因在PEDV感染Vero细胞过程中的调控作用,发现SOX12基因的下调表达能显著抑制PEDV复制和其互作基因SOX17、DDX51、ZMIZ2、SSRP1、TAF6和ABCB8的表达。

鸡Sox10基因克隆、生物信息学及组织表达分析

为了探究Sox10(SRY-related HMG-box 10)氨基酸序列特征以及Sox10在淅川乌骨鸡不同组织的表达量变化,试验对淅川乌骨鸡Sox10基因CDS区进行PCR克隆并使用在线软件分析氨基酸序列,同时,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测Sox10在心、肝、胸肌、腿肌和背肤的表达水平。结果表明:Sox10基因CDS区测序长度为1386bp,编码了461个氨基酸。同源性比对和系统进化树显示,淅川乌骨鸡与原鸡的亲缘关系最近,与鱼类最远。Sox10蛋白分子质量为49.86 ku,等电点为6.20,具有不稳定性、酸性和亲水性,且不存在跨膜区和信号肽,存在HMG结构域及55个磷酸化位点,5'端2000 bp不含甲基化位点。Sox10主要包括无规则卷曲,大部分位于细胞核,与DCT、EDNRB、Pax3、Pax7等蛋白存在互作关系,参与细胞发育过程中的DNA、蛋白质结合以及转录调节功能。qRT-PCR结果表明,Sox10在背肤的表达量显著高于心、肝、胸肌和腿肌,在肝脏和胸肌的表达量显著低于心、腿肌和背肤。以上结果为进一步探究Sox10基因对黑色素沉积的调控机制提供了理论依据。

SOX2、EGFR在胃癌组织中的表达及与其临床病理特征的关系研究

目的探究SOX2、EGFR在胃癌(GC)组织中的表达及与其临床病理特征的关系。方法选取接受根治手术治疗的GC患者100例,取其GC组织标本作为观察组,另选取100例经病理学检查确认为正常胃黏膜组织的癌旁组织标本作为对照组。采用免疫组化法检测SOX2、EGFR的表达,比较两组SOX2、EGFR的阳性表达率,并探讨SOX2、EGFR的阳性表达与临床病理特征的关系。结果相较于对照组,观察组SOX2阳性表达率显著降低(P<0.05);EGFR阳性表达率显著升高(P<0.05)。同时,GC组织中SOX2、EGFR阳性表达均与肿瘤浸润情况、分化程度、临床分期以及淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者性别、年龄及肿瘤直径无关(P>0.05)。结论GC组织中SOX2呈低表达,而EGFR呈高表达,同时表达水平均与肿瘤浸润情况、分化程度、临床分期以及淋巴结转移有关,可作为评估GC发展和预后的关键指标。

血清SOX9水平变化与胃癌临床病理特征及患者预后的相关性研究

目的探讨血清SOX9水平变化与胃癌临床病理特征及患者预后的关系。方法收集胃癌患者85例纳入胃癌组,同时期收集慢性胃炎患者60例纳入慢性胃炎组,体检健康志愿者60名纳入对照组。采用酶联免疫吸附试验检测血清SOX9蛋白水平。分析SOX9水平变化与胃癌临床病理特征及患者预后的关系。结果三组血清SOX9水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05),胃癌组患者SOX9水平高于对照组和慢性胃炎组,而慢性胃炎组SOX9水平又高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。血清SOX9水平与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床分期、浸润深度、Lauren分型相关(P<0.05),血清SOX9水平与患者性别、年龄无关(P>0.05)。血清SOX9水平区分胃癌组和对照组的AUC为0.942,95%CI为0.921~0.982,区分胃癌组和慢性胃炎组的AUC为0.842,95%CI为0.782~0.913。将SOX9水平为46.0 ng/mL作为临界值,诊断胃癌的灵敏度为88.1%,特异度为88.5%,进一步诊断早期胃癌,AUC为0.755,灵敏度为72.5%,特异度为70.1%。结论血清SOX9水平与胃癌临床病理特征及患者预后有关,可用于诊断胃癌,还可用于预测患者预后恢复情况。

下调SETDB1通过SOX7甲基化抑制口腔癌上皮-间充质转化、侵袭和转移的机制探讨

目的:探讨SETDB1通过SOX7甲基化抑制口腔癌上皮-间充质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)、迁移和侵袭机制。方法:应用qRT-PCR和Western印迹法检测口腔癌KB细胞和口腔黏膜上皮ATCC细胞中SETDB1和SOX7 mRNA和蛋白表达水平。构建SETDB1 si-RNA,以脂质体介导法转染口腔癌KB细胞。siRNA-SETDB1为实验组(si-S),siRNA空载体为阴性对照组(si-N),未转染KB细胞为空白对照组(NC)。qRT-PCR和Western印迹法检测SETDB1 mRNA和蛋白表达水平,验证转染效果;焦磷酸测序检测SOX7甲基化水平。Western印迹法检测N-钙黏蛋白(N-cadherin)、Vimentin、β-catenin和Slug蛋白表达,MTT法检测细胞存活能力,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。采用SPSS 21.0软件包进行统计学分析。结果:Rt-qPCR和Western印迹法检测结果显示,si-S组SETDB1 mRNA和蛋白表达量显著下降(P<0.05)。焦磷酸测序检测结果显示,下调SETDB1可显著降低SOX7甲基化率,增加SOX7蛋白表达。Western印迹法检测结果显示,下调SETDB1可显著抑制口腔癌KB细胞中EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin、β-catenin和Slug的表达(P<0.05)。细胞功能学结果显示,下调SETDB1可显著抑制KB细胞的存活、迁移和侵袭能力。结论:下调SETDB1可通过调控SOX7甲基化水平,抑制口腔癌细胞EMT、迁移和侵袭,为口腔癌临床诊断和治疗提供新思路和靶点。

SOX9上调LINC01503表达促进喉鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为和肿瘤干细胞干性

目的:探究SOX9通过上调长链非编码RNA LINC01503的表达对喉鳞状细胞癌(LSCC)细胞的增殖、迁移、侵袭及肿瘤干细胞干性的影响。方法:常规培养人LSCC细胞AMC-HN-8、TU177、TU212和TU686,用转染试剂将敲减序列及其对照核酸(si-SOX9-NC、si-SOX9#1、si-SOX9#2、si-LINC01503-NC、si-LINC01503#1、si-LINC01503#2)或过表达质粒及其对照核酸(pcDNA3.1-SOX-NC、pcDNA3.1-SOX-oe、pcDNA3.1-LIN01503-NC和pcDNA3.1-LIN01503-oe)分别转染至TU177细胞或TU686细胞,记为si-SOX9-NC组、si-SOX9#1组、si-SOX9#2组、si-LINC01503-NC组、si-LINC01503#1组、si-LINC01503#2组;pcDNA3.1-SOX9-NC组、pcDNA3.1-SOX9-oe组、pcDNA3.1-LINC01503-NC组、pcDNA3.1-LINC01503-oe组、si-SOX9-NC+pcDNA3.1-LINC01503-NC组和si-SOX9+pcDNA3.1-LINC01503-oe组。qPCR法检测SOX9 mRNA和LINC01503在各组细胞中的表达,生物信息学分析SOX9与LINC0503启动子区的结合位点,双萤光素酶报告基因实验和染色质免疫共沉淀实验验证SOX9与LINC01503启动子区是否直接结合,WB法检测SOX9的敲减效率及LINC01503对TU177和TU686细胞干性标志物表达的影响,MTS法检测各组细胞的增殖活力,划痕愈合和Transwell小室实验检测各组细胞的迁移能力,克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成能力。结果:SOX9在各种LSCC细胞中呈高表达(均P<0.05),数据库数据分析显示,在头颈部鳞状细胞癌中,SOX9与LINC01503表达呈正相关(R=0.12,P=0.0059);SOX9可与LINC01503启动子区直接结合并促进其转录表达(均P<0.05);敲减LINC01503可明显抑制TU177细胞的增殖、迁移、侵袭(均P<0.05),过表达LINC01503明显促进TU686细胞增殖、迁移、侵袭的能力(均P<0.05),提高TU686细胞克隆形成能力和细胞干性标志物分子CD133、OCT4、SOX2的mRNA和蛋白水平表达(均P<0.05),敲减LINC01503则均可抑制TU686细胞的克隆形成和细胞干性标志物的表达(均P<0.05);敲减SOX9均可明显抑制TU177细胞的增殖、迁移和侵袭能力,降低其干性细胞标志物的表达(均P<0.05),同时过表达LINC01503则可部分逆转敲减SOX9对TU177细胞恶性生物学行为和干性标志物表达的抑制作用(均P<0.05)。结论:SOX9和LINC01503在LSCC细胞中呈高表达,SOX9可能通过上调LINC01503表达提高LSCC细胞增殖、转移和侵袭能力和肿瘤干细胞干性。

SOX7通过靶向调控SHP-2/Wnt/β-catenin/ROS通路抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的研究SOX7调控SHP-2/Wnt/β-catenin/ROS通路从而影响结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的分子机制。方法将20只裸鼠皮下移植瘤模型随机分为SOX7 NC组(n=5)、SOX mimic组(n=5)、SOX7 NC+PHPS1组(n=5)和SOX7 mimic+PHPS1组(n=5),观察肿瘤生长情况。通过脂质体法将人结直肠癌细胞系SW480细胞转染后,将细胞分为6组,分别为SOX7 NC组、SOX7 mimic组、SOX7 NC+H_(2)O_(2)组、SOX7 mimic+H_(2)O_(2)组、SOX7 NC+PHPS1组、SOX7 mimic+PHPS1组。通过Western blot实验检测各组SW480细胞SHP-2/Wnt/β-catenin/ROS通路相关蛋白的表达,通过细胞划痕实验和Transwell侵袭迁移实验检测SW480细胞的侵袭迁移能力,通过CCK-8检测SW480细胞的增殖。结果小鼠体内实验显示:SOX7 mimic组肿瘤体积明显小于SOX7 NC组(P<0.01),经过PHPS1干预的肿瘤体积明显增大,SOX7 mimic+PHPS1组肿瘤体积和SOX7 NC+PHPS1组的差异无统计学意义。体外实验发现:SOX7 mimic抑制了SW480细胞Wnt、β-catenin、NOX2、NOX4、PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT蛋白表达(P<0.01),促进了p-SHP-2蛋白表达(P<0.01);加入H_(2)O_(2)和SHP-2抑制剂后SOX7 mimic组和SOX7 NC组的Wnt、β-catenin、NOX2、NOX4、PI3K、P-PI3K、AKT、P-AKT的蛋白表达水平升高,但差异无统计学意义,SHP-2、p-SHP-2蛋白的表达水平降低,但差异无统计学意义;细胞划痕、Transwell侵袭迁移实验和CCK-8实验结果表明SOX7通过氧化应激和SHP-2通路抑制了SW480细胞的迁移、侵袭和增殖(P<0.01)。结论SOX7可通过靶向SHP-2/Wnt/β-catenin/ROS通路抑制结直肠癌增殖、侵袭和迁移。

红鲫胚胎发育过程中Sox8基因对壬基酚胁迫的响应

【目的】明确红鲫SRY相关高迁移率族盒蛋白8基因(Sox8)表达模式及壬基酚(NP)暴露对红鲫胚胎发育过程中Sox8基因表达的影响,为揭示NP胁迫下红鲫胚胎发育畸形的分子机制提供科学依据。【方法】运用RACE克隆红鲫Sox8基因cDNA全长序列,通过ProtParam、ProtScale、InterPro、PredictProtein、DeepTMHMM等在线软件进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR检测红鲫Sox8基因在各成体组织及不同胚胎发育阶段的表达情况,以及不同浓度NP暴露对红鲫胚胎期Sox8基因表达的影响。【结果】红鲫Sox8基因c DNA序列全长2163 bp,其开放阅读框(ORF)1176bp,共编码391个氨基酸残基;红鲫SOX8蛋白相对分子量为43798.30Da,理论等电点(pI)为6.90,脂溶指数为49.92,不稳定指数为66.04,总平均亲水性指数(GRAVY)为-1.026,其N端含有Sox_N二聚化结构域和HMG-box结构域;基于SOX8氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树显示红鲫与鲫的亲缘关系最近。红鲫Sox8基因在各成体组织中广泛表达,以脑组织中的Sox8基因相对表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05,下同);在红鲫胚胎发育过程中,Sox8基因的表达从受精后到14体节期呈逐渐下降趋势,但从21体节期开始Sox8基因相对表达量显著增高,直到孵化期始终维持在较高水平。在大多数情况下,NP暴露能显著影响红鲫胚胎发育过程中Sox8基因的表达,特别是14体节期后的发育阶段,NP暴露主要是不同程度地激活Sox8基因表达。【结论】Sox8基因表达在红鲫成体中具有组织特异性,且在胚胎发育过程中呈先降低后升高的变化趋势。NP暴露能显著影响红鲫胚胎发育过程中Sox8基因的表达,14体节期后Sox8基因表达水平升高可能是NP致畸红鲫胚胎的重要原因之一。

通关藤注射液联合SOX方案治疗进展期胃癌临床观察

目的观察通关藤注射液联合SOX方案治疗进展期胃癌的疗效。方法将60例进展期胃癌患者随机分为对照组和观察组,每组30例。对照组患者接受标准SOX方案化学治疗;观察组患者加用通关藤注射液治疗。治疗前后分别检测患者血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原(carbohydrate antigen,CA)125、CA153、CA199水平,以及肝肾功能和血清白蛋白,并检测血小板、淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞计数及中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-to-lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet-to-lymphocyte ratio,PLR),采用卡氏功能状态量表(Karnofsky’s performance status,KPS)评价患者生活质量,比较两组患者总生存期(overall survival,OS)和无进展生存期(progression-free survival,PFS)。结果观察组在降低血清CA125、CA199、PLR水平,提高KPS评分,防止血清白蛋白和淋巴细胞水平降低,延长OS和PFS方面均显著优于对照组(P<0.05)。结论通关藤注射液联合SOX方案治疗进展期胃癌具有增效减毒作用,可降低化学治疗药物不良反应,延长患者生存期。

艾迪注射液辅助SOX方案治疗晚期胃癌临床研究

目的:观察艾迪注射液辅助SOX方案治疗晚期胃癌的临床疗效。方法:选取64例晚期胃癌患者,按照奇偶数随机分为试验组和对照组,每组32例。对照组行SOX方案治疗,试验组在SOX方案基础上联用艾迪注射液治疗。21 d为1个疗程,2组均治疗6个疗程,随访18个月。比较2组临床疗效、肿瘤标志物[血清糖类抗原724(CA724)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原199(CA199)、癌胚抗原(CEA)]水平、症状积分、piper疲乏调查量表(PSR-R)评分、Karnofsky(KPS)评分、不良反应发生率、肿瘤进展时间(TTP)及中位生存时间(MST)。结果:治疗6个疗程后,试验组疾病控制率(DCR)为93.75%,疾病有效率(ORR)为68.75%,均高于对照组68.75%、40.63%,差异均有统计学意义(P<0.05);2组血清CA125、CA199、CA724、CEA水平均较治疗前降低,试验组血清CA125、CA199、CEA水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);2组血清CA724水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组症状积分、PSR-R评分均较治疗前降低,KPS评分均较治疗前升高,差异均有统计学意义(P<0.05);试验组症状积分及PSR-R评分均低于对照组,KPS评分高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗6个疗程期间,除肝肾功能损害外,试验组血小板减少、血红蛋白减少、白细胞减少、周围神经毒性不良反应发生率均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访18个月,试验组TTP和MST均长于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:艾迪注射液辅助SOX方案治疗晚期胃癌能够提升治疗效果,延长患者的生存期,降低不良反应发生率。

VEGF和SOX2在卵巢癌中的表达及与病人预后的关系研究

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)和Y染色体性别决定区相关的高迁移率族盒蛋白2(SOX2)在卵巢癌中的表达及与病人预后的关系。方法 筛选收集病理科存档的卵巢癌手术或穿刺标本,对筛选收集的患者进行随访,获取随访资料,查阅病历,获取临床资料,采用免疫组织化学方法检测46例晚期卵巢癌、28例早期卵巢癌及20例正常卵巢组织手术或穿刺标本中VEGF、SOX2的表达情况,观察上述指标的阳性表达差异及相关性,并分析其与卵巢癌患者临床病理参数及生存资料的关系。结果 不同标本中的VEGF、SOX2阳性表达率相比,晚期卵巢癌>早期卵巢癌>正常卵巢组织(P<0.05)。卵巢癌标本中VEGF与SOX2的表达有正相关性(P<0.05)。在淋巴结转移患者中,VEGF、SOX2阳性表达率明显上升,且在III~IV期患者中,VEGF阳性表达率明显上升(P<0.05)。VEGF、SOX2同时阳性者的OS明显短于VEGF、SOX2同时阴性者(P<0.05)。结论 VEGF、SOX2在卵巢癌尤其是晚期卵巢癌中均呈高表达状态,且两者呈正相关,VEGF在淋巴结转移、高分期患者中表达更高,而SOX2在淋巴结转移患者中表达更高,两者的高表达均可能提示患者预后不佳。

血清SDC4、sOX40L水平与糖尿病肾病患者病情严重程度及预后的关系

目的分析血清SDC4、sOX40L水平与糖尿病肾病(DN)患者病情严重程度及预后的关系。方法以青岛市市立医院2019年5月—2021年11月收治的172例糖尿病患者为研究对象,其中DN患者84例(DN组),无肾病患者88例(单纯糖尿病组),另选取同期在我院体检的80例健康人群为对照组。比较三组血清SDC4、sOX40L水平;分析血清SDC4、sOX40L水平与DN患者临床指标的关系;Spearman相关性分析DN患者血清SDC4、sOX40L水平与肾脏病理损伤程度的关系;根据是否出现死亡或发展为终末期肾病(ESRD)将DN患者分为预后良好组和预后不良组,Logistic回归分析DN患者预后的影响因素。结果与对照组相比,糖尿病患者血清SDC4、sOX40L水平均显著升高(P<0.05),且DN组患者血清SDC4、sOX40L水平显著高于单纯糖尿病组(P<0.05);DN组患者血清SDC4、sOX40L水平与糖尿病病程、空腹血糖(FBG)、24 h尿蛋白定量、糖化血红蛋白(HbA_(1)c)、肾小球滤过率(eGFR)、血肌酐均相关(P<0.05),而与DN患者年龄、性别、BMI无关(P>0.05);DN组患者血清SDC4、sOX40L水平与肾小球分级、小管萎缩(IFTA)评分、间质炎症均相关(P<0.05),且随着肾脏损伤程度的加深,血清SDC4、sOX40L水平逐渐升高(P<0.05);Spearman相关性分析表明,DN组患者血清SDC4、sOX40L水平与肾小球分级、IFTA评分、间质炎症均呈显著正相关(P<0.05);预后不良组患者血清SDC4、sOX40L水平均显著高于预后良好组患者(P<0.05);Logistic回归分析结果表明,糖尿病病程、FBG、24 h尿蛋白定量、HbA1c、eGFR、血肌酐、SDC4、sOX40L是影响DN患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论DN患者血清SDC4、sOX40L表达水平与肾脏损伤程度及预后均具有相关性,血清SDC4、sOX40L表达水平越高,DN患者病情越严重,预后越差。

SOX7靶向ERK1/2/PD-L1通路抑制结直肠癌血管生成

目的探讨性别决定区Y框蛋白7(SOX7)对结直肠癌血管生成的影响及潜在作用机制。方法应用免疫荧光检测结直肠癌患者组织样本中SOX7表达水平,之后通过裸鼠、转染SOX7 mimic的人结直肠癌细胞系SW480细胞和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养进一步研究。用Western-blot验证SOX7与ERK1/2/PD-L1对结直肠癌细胞的相关蛋白表达的影响。用CCK8检测SOX7与ERK1/2/PD-L1对HUVEC增殖的影响。通过体外内皮细胞成管实验测定SOX7与ERK1/2/PD-L1对肿瘤血管生成的影响。结果SOX7在人结直肠癌组织中表达被抑制(P<0.01),同时SOX7的过表达抑制了小鼠体内肿瘤生长(P<0.01)。SW480细胞中SOX7的过表达抑制了ERK1/2、c-Jun的表达,并在ERK1/2的激动剂Senkyunolide I的作用下上调了SW480细胞的ERK1/2、c-Jun蛋白表达(P<0.01),逆转了SOX7对SW480细胞中ERK1/2、c-Jun蛋白表达的影响(P<0.01)。HUVEC中SOX7抑制了PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,Senkyunolide I上调了HUVEC的PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,并逆转了SOX7对HUVEC中上述相关蛋白表达的影响(P<0.01)。PD-1/PD-L1 Inhibitor 3抑制了PD-L1、V-EGFR2、p-PI3K、HIF-1α的蛋白表达,SOX7过表达在PD-1/PD-L1 Inhibitor 3的影响下并没有表现出抑制作用。CCK8实验结果显示SOX7过表达显著抑制了HUVEC的增殖能力,Senkyunolide I作用下的两组HUVEC增殖能力较SOX7 NC组与SOX7 mimic组明显上升,PD-1/PD-L1 Inhibitor 3作用下的两组HUVEC增殖能力较SOX7 NC组与SOX7 mimic组明显下降,以上均有明显统计学差异(P<0.01)。成管实验结果显示SOX7过表达抑制了HUVEC的血管生成,Senkyunolide I强烈加速了血管生成,而PD-1/PD-L1 Inhibitor 3血管生成则被显著抑制,以上均有明显统计学差异(P<0.01)。结论SOX7通过ERK1/2/PD-L1通路抑制结直肠肿瘤的增殖和血管生成,SOX7可能是晚期CRC患者临床治疗中潜在的抗血管生成靶点。

Sox2、BrdU及Nestin在神经系统疾病中的表达及其与疾病发展的关系研究

本研究旨在探究患有神经系统疾病的小老鼠模型中,不同疾病状态下血清中Nesfatin-1、以及Sox2、BrdU和Nestin的表达水平,并分析它们与疾病状态之间的潜在关联。方法 实验采用患有神经系统疾病的小老鼠模型,将其分为活动组(疾病活跃期)、稳定组(疾病稳定期)和对照组(健康小老鼠)。通过免疫学方法测定各组小老鼠血清中Nesfatin-1、Sox2、BrdU和Nestin的表达水平。利用统计学分析比较各组间的表达差异,并结合疾病状态进行评估。结果 研究结果显示,在活动组小老鼠中,血清中的Nesfatin-1、Sox2、BrdU和Nestin的表达水平相较于稳定组和对照组均出现显著差异。其中,Sox2和BrdU的表达在活动组中显著上调,暗示神经细胞的增殖活动增加;而Nestin的表达水平则呈现复杂的变化模式。特别值得注意的是,Nesfatin-1的表达水平在活动组中也有显著变化,可能与疾病的活跃状态密切相关。结论 本研究表明,在神经系统疾病小老鼠模型中,血清中的Nesfatin-1、Sox2、BrdU和Nestin的表达水平与疾病状态之间存在密切关系。这些发现有助于进一步理解神经系统疾病的发病机制和进程,并为未来的治疗策略提供新的思路和潜在靶点。未来的研究应深入探讨这些分子在神经系统疾病中的具体作用和调控机制。

Sox2、BrdU及Nestin作为干细胞标记物在室周器官干细胞研究中的应用及临床前景

探讨Sox2、BrdU及Nestin这三种标记干细胞的因子在室周器官干细胞研究中的应用及临床前景。根据已获得的数据,分析出特定条件下不良反应与所采用的医疗干预措施之间的关系。方法 分析了111份样本的采集过程中不良反应的发生情况和与性别、年龄、循环血量等因素的关系,同时对对比了接受不同医疗干预措施后的结果。结果 在医疗干预措施中,雌性的病例对钙剂输入的需求较大。采用输入钙剂措施的情况下,口唇麻木和肢端麻木的发生率明显高于未采用的情况。结论 Sox2、BrdU及Nestin等因子在室周器官干细胞研究中具有重要作用,通过对不良反应的分析和医疗干预措施的选择,可以更好地指导临床操作,提高干细胞的采集效率。在临床实际应用中,应根据病人的具体状况,选择合适的医疗干预措施,既能提高采集效率,又能减少不良反应的出现。

电针通过HIF-1α和SOX-9维持兔膝骨关节炎软骨稳态及抗炎机制研究

目的观察电针对兔膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)模型软骨缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、性别决定区Y框蛋白9(SRY-box transcription factor 9,SOX-9)、基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、Ⅱ型胶原蛋白和炎症因子表达的影响,探讨电针干预改善KOA软骨稳态以及抗炎的可能作用机制。方法采用随机数字表法将实验兔分为对照组、模型组和电针组,每组10只。对模型组和电针组实验兔的右膝关节采用木瓜蛋白酶制造兔KOA模型。制模完成后,电针组给予电针犊鼻及内膝眼穴干预,每次30 min,每天1次,共14 d。模型组每天在固定器上固定15 min。对照组右膝关节注射等量0.9%氯化钠溶液。使用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE染色)检测软骨组织的病理情况,原位末端转移酶标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay,TUNEL)检测软骨细胞的凋亡情况,免疫组化检测软骨中Ⅱ型胶原蛋白的表达情况,酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测软骨中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平,蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)检测HIF-1α、SOX-9、MMP-1和MMP-13的蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测HIF-1α、SOX-9、MMP-1和MMP-13的mRNA水平。结果HE染色结果显示,与对照组相比,模型组软骨细胞数量明显减少,细胞核皱缩,基质染色呈浅色,潮线不完整,而电针组较模型组显著改善;改良Mankin's评分结果显示,模型组较对照组显著升高,电针组较模型组显著降低;TUNEL结果显示,电针组软骨细胞凋亡率显著低于模型组;免疫组化结果显示,与模型组相比,电针组的Ⅱ型胶原蛋白表达明显升高;ELISA结果显示与模型组相比,电针组的TNF-α、IL-1β表达明显降低;WB和qRT-PCR结果显示,与对照组相比,模型组的HIF-1α和SOX-9蛋白表达水平和mRNA水平显著降低(P<0.05),与模型组相比,电针组显著升高(P<0.05)。结论电针可能通过上调HIF-1α和SOX-9的表达,减少MMP-1、MMP-13、TNF-α、IL-1β的表达,增加Ⅱ型胶原蛋白的形成,从而发挥缓解软骨损伤、减少炎症反应的作用。

妊娠糖尿病孕妇血清SOX5和GLUT4表达水平与糖脂代谢和妊娠结局的关系

目的探讨SOX5、葡萄糖转运体4(GLUT4)在妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中的表达水平及与妊娠结局的相关性。方法选取2021年1月至2023年3月该院收治的154例GDM妊娠期妇女作为GDM组,根据妊娠结局分为不良妊娠结局组(59例)和正常妊娠结局组(95例),选取同期在该院进行产检的健康妊娠期妇女150例作为对照组。收集一般资料,检测血清SOX5和GLUT4表达水平;采用Pearson相关性分析GDM组妊娠期妇女血清SOX5和GLUT4与胰岛素抵抗(IR)的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价SOX5和GLUT4表达水平对不良妊娠结局的预测价值,Logistic回归分析影响不良妊娠结局发生的因素。结果GDM组患者血清GLUT4表达水平[(2.47±0.51)μg/L]低于对照组[(5.33±1.59)μg/L],GDM组患者血清SOX5表达水平[(6.53±0.96)ng/mL]高于对照组[(1.76±0.34)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,GDM组妊娠期妇女血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平下降,差异有统计学意义(P<0.05);GDM组血清SOX5表达水平与TC、TG、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR呈正相关,与HDL-C表达水平呈负相关,GLUT4表达水平与TC、TG、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR呈负相关,与HDL-C表达水平呈正相关(均P<0.05);不良妊娠结局组患者血清GLUT4表达水平[(1.88±0.47)μg/L]低于正常妊娠结局组[(2.84±0.54)μg/L],不良妊娠结局组患者血清SOX5表达水平[(8.02±1.05)ng/mL]高于正常妊娠结局组[(5.61±0.91)ng/mL],差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清SOX5和GLUT4表达水平预测GDM患者不良妊娠结局的曲线下面积(AUC)分别为0.871(95%CI:0.807~0.919)、0.884(95%CI:0.822~0.930),对应的灵敏度分别为88.14%、74.58%,特异度分别为74.74%、88.42%,二者联合预测的AUC为0.940(95%CI:0.889~0.972),灵敏度为74.58%,特异度为96.84%;多因素Logistic回归分析结果显示,SOX5、TG、LDL-C、FBG、FINS、HOMA-IR均是影响不良妊娠结局发生的危险因素,GLUT4、HDL-C是影响不良妊娠结局发生的保护因素(P<0.05)。结论GDM患者血清GLUT4表达水平下降,SOX5表达水平上升,二者均为影响GDM患者不良妊娠结局发生的因素,有望成为GDM患者不良妊娠结局的有效预测指标。

SOX9、L-SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原在青少年特发性脊柱侧凸患者顶椎终板软骨的共表达及意义

目的:观测SOX9、L-SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原在青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者顶椎终板软骨中的表达,探讨其与AIS发生、发展的关系。方法:12例AIS患者,每例在前路手术时截取顶椎终板软骨1份,每份标本均包含凸侧与凹侧。切片行HE染色观察其组织细胞形态;行免疫组织化学染色,应用病理图像分析系统观测凸侧与凹侧的SOX9、L-SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原表达的阳性细胞数和累积光密度(IOD),并计算这4个因子表达的相关性。结果:HE染色显示终板软骨有类似四肢长骨骺板样软骨内成骨组织形态,与凹侧比较凸侧显示了更强的软骨细胞活性。凸侧SOX9、L-SOX5、SOX6及Ⅱ型胶原表达的阳性细胞数和前三者的IOD值均明显大于凹侧,差异均有显著性(P<0.05),凸侧Ⅱ型胶原表达的IOD值与凹侧比较无显著性差异(P>0.05),4个因子表达的阳性细胞数之间的相关系数为0.46～0.91(P<0.05),IOD之间为0.64～0.98(P<0.05),均呈正性相关。结论:AIS患者顶椎凸侧与凹侧终板软骨的组织形态学及SOX9、L-SOX5、SOX6和Ⅱ型胶原的表达均存在差异,其可能是脊柱不同部位间机械应力差异下的继发性变化;4个因子的共表达异常触发AIS的可能性小。

FOLFOX、SOX、mFOLFOX6方案用于治疗晚期胃癌的临床观察

目的分析FOLFOX、SOX及mFOLFOX6三种化疗方案用于治疗晚期胃癌的效果。方法选取65例胃癌晚期患者作为研究对象,根据自主意愿选择化疗方案将其分为FOLFOX组(n=21,予以FOLFOX方案进行化疗)、SOX组(n=25,予以SOX方案进行化疗)及mFOLFOX6组(n=19,予以mFOLFOX6方案进行化疗)。3组均化疗3个周期,对比其临床疗效及不良反应。根据随访资料绘制Kaplan-Meier生存曲线分析其疾病进展时间(PFS)及总生存率(OS)。结果FOLFOX组疾病客观缓解率(ORR)为23.81%,SOX组ORR为32.00%,mFOLFOX6组ORR为26.32%,3组ORR对比无显著差异(P>0.05)。SOX组恶心呕吐发生率为16.00%,显著低于FOLFOX组的42.86%及mFOLFOX6组的52.63%(P<0.05),且SOX组恶心呕吐分级显著优于FOLFOX组及mFOLFOX6组(P<0.05)。FOLFOX6组平均无疾病进展生存时间及平均生存时间分别为6、9个月,PFS及OS分别为44.0%、46.90%;SOX组平均无疾病进展生存时间及平均生存时间分别为8、11个月,PFS及OS分别为92.20%、87.6%;mFOLFOX6组平均无疾病进展生存时间及平均生存时间分别为6、9个月,PFS及OS分别为57.90%、63.2%,3组PFS、OS差异有统计学意义(P<0.05)。结论FOLFOX、SOX及mFOLFOX6三种化疗方案临床疗效相似,然SOX方案可减少患者于化疗过程中恶心呕吐的不良反应,提升患者PFS及OS,安全性较好。

基于转录组测序分析SOX18在湖羊毛囊毛乳头细胞中的功能

旨在初步探究SOX18基因在湖羊毛囊毛乳头细胞中的功能。本研究首先采用免疫荧光染色试验对从湖羊毛囊中分离的细胞进行鉴定,然后构建SOX18基因过表达载体并通过qRT-PCR和Western blot检测其过表达效率。将经过鉴定且生长状态良好的毛乳头细胞分为两组,分别转染SOX18过表达载体和空载质粒,每组3个重复。采用Trizol法提取6个样本的总RNA并构建cDNA文库,利用Illumina Novaseq6000平台进行测序,然后对样本相关性和差异表达基因进行分析,并对差异表达基因进行GO功能分类和KEGG通路注释,寻找SOX18基因调控的相关候选基因和通路。为确认转录组数据的准确性,随机选取9个差异表达基因进行qRT-PCR验证。免疫荧光结果显示,毛乳头相关基因在所分离的细胞中高表达,表明所分离的毛乳头细胞纯度高。qRT-PCR和Western blot检测发现,SOX18基因过表达能够增加毛乳头细胞中SOX18的mRNA和蛋白水平,表明构建的SOX18基因过表达载体可用于后续试验。转录组分析结果表明样本间相关性好,SOX18过表达组和对照组相比共发现157个基因差异表达,其中103个基因在SOX18过表达后上调,54个基因下调,qRT-PCR分析表明转录组数据准确性高。GO功能分析显示,一些差异基因富集于细胞进展和毛囊发育过程。KEGG富集分析表明,一些差异表达基因富集于细胞增殖和毛囊发育相关信号通路。GO功能分析和KEGG富集分析表明SOX18在毛乳头细胞的增殖和毛囊发育过程中起作用。本研究通过转录组测序分析发现SOX18可能通过影响细胞增殖和毛囊发育相关的基因和信号通路来影响毛乳头细胞增殖和毛囊生长发育,研究结果为解析SOX18基因在湖羊毛乳头细胞和毛囊中的分子调控机制提供了理论基础。