嗜麦芽寡养单胞菌感染及其耐药性分析

目的 :了解嗜麦芽寡养单胞菌感染的临床及耐药性特点。方法 :1997年 7月～ 2 0 0 0年 6月从临床送检标本分离 114株嗜麦芽寡养单胞菌 ,对其进行抗菌药物敏感试验和诱导型 β-内酰胺酶测定。结果 :114例嗜麦芽寡养单胞菌感染病例中 ,肺部感染为 5 8.77% ,泌尿系感染为 2 5 .4 4 %。该菌对氨苄西林、羧苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢曲松、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星的耐药率均在 6 0 %以上 ,对亚胺培南的耐药率几乎为 10 0 % ,但对替卡西林 /克拉维酸、环丙沙星、SMZ/ TMP的耐药率在 30 %以下。其诱导型β-内酰胺酶产生率为 6 3.16 %。结论 :治疗嗜麦芽寡养单胞菌感染 ,可选 SMZ/ TMP、环丙沙星或替卡西林 /克拉维酸。

抗生素抗性筛选在微生物菌株选育中的作用

选育优良微生物菌株对微生物药物研发尤其是对微生物制药实现产业化具有至关重要的意义。抗生素抗性筛选基于微生物对抗生素产生抗性,因其实验操作简便、效果显著而在有用微生物菌株选育中得到广泛应用。在微生物药物领域抗生素抗性筛选技术主要用来筛选获取高产菌株,但近来发现微生物的抗生素抗性突变可赋予突变株新生次级产物的代谢生产能力,因此在拓展药源微生物资源领域具有潜在应用价值。本文主要综述抗生素抗性筛选在微生物菌株选育中的作用以及相关新近研究进展。

红霉素高产株SIPI 2—13的推理选育和工业生产

本文对红霉素产生菌的推理选育和高产株的工业生产进行了研究。出发亲株86—610经紫外线诱变后,选得一些对红霉素前体丙酸抗性突变型菌株,所有这些菌株皆为正变株,其中一株SIPI 2—13比亲株增产34%。这一高产菌株的形态和生理特性与亲株不同;在工业生产中比原来的菌株14—74增产24%,最高水平达到7830u/ml;终产物的主要组分红霉素A在94%以上,效价为940u/mg。

螺旋霉素产生菌螺旋霉素链霉菌遗传育种

本文是利用抗生素抗性与产量之间的相关性来进行螺旋霉素产生菌螺旋霉素链霉菌的遗传育种,旨在获得高效价菌株,从而提高螺旋霉素的生产水平。首先用正交试验法确定出发菌株最佳发酵培养基,并在此基础上通过紫外线诱变,和在螺旋霉素浓度梯度平板上筛选螺旋霉素抗性菌株。按上述方法理性化筛选得到的菌株多为正突变株。从本实验得到一株螺旋霉素抗性菌株SPM^r-248,其抗性较出发菌株提高300％,生产能力较出发菌株提高81.3％。菌株SPM^r-248的高效价生产性能遗传特性稳定。在7m^3罐做发酵放大,与出发菌株相比,发酵效价提高31.4％,发酵指数提高18.8％,具有一定的学术意义和经济价值。

林可霉素高产菌株的选育

目的选育出高产稳产的林可霉素生产菌株。方法以林可霉素产生菌L92为出发菌株,采用氯化锌、紫外线(UV)、硫酸二乙酯(DES)三重复合诱变,再经连续推理选育林可霉素、丙基脯氨酸和α,D-吡喃半乳糖抗性突变株,获得高产菌株L-96。结果摇瓶发酵单位提高1倍,经百吨罐生产验证,平均放罐效价提高45%。结论生产能力得到了大幅度提高,传代实验证明该突变株的高产性能遗传稳定。

格尔德霉素高产菌株的抗性筛选及其发酵的研究

目的用实验室保藏的格尔德霉素产生菌Streptomyces melanosporofaciens 101,通过抗性选育,获得高产突变株。并研究该菌株的工业化发酵工艺。方法经硫酸二乙酯诱变和添加代谢终产物(格尔德霉素)抗性筛选,格尔德霉素抗性浓度从5g/L提高到10g/L,筛选高产突变菌株。再进行发酵罐上工艺优化,分别进行了单批发酵和分批补料发酵研究。结果获得的高产突变株其生产能力比出发菌株提高了1000倍。在96、120、144和168h分别补加总体积3%的葡萄糖,该分批补料发酵工艺适合格尔德霉素工业化生产。结论格尔德霉素高产突变株的筛选和发酵工艺的确定为该项目产业化奠定了基础。

推理选育与抗性筛选在罗咪酯肽高产菌的育种研究

目的通过对罗咪酯肽产生菌进行推理选育与抗性筛选,提高罗咪酯肽的产量。方法采用罗咪酯肽合成前体结构类似物α-氨基丁酸和快速利用氮源的结构类似物甘氨酸对罗咪酯肽产生菌进行推理诱变,同时比较以抗生素链霉素和自身抗性罗咪酯肽进行抗性诱变效果。结果在考察的4种方法中,以甘氨酸推理诱变的方法最好,正突变率高达48%,最高产量达到87.6mg/L,是原始菌株的3.5倍。自身抗性筛选的突变株最高产量65.9mg/L,是原始菌株的2.6倍。结论采用甘氨酸推理育种方法和自身抗性筛选方法,能有效提高罗咪酯肽产生菌的生产能力。

利福霉素B产生菌─—地中海诺卡氏菌的推理选育

利福霉素Ｂ的生物合成受芳香族氨基酸（Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ）的反馈抑制。用紫外线处理Ｎ．ｍｅｄｉｔｅｒｒａｎｅｉＸＣ－１０２菌丝悬浮液后，并在含０．１％芳香族氨基酸的琼脂平板上分离芳香族氨基酸抗性变种。结果表明，芳香族氨基酸抗性变种的发酵效价高于自然分离株和紫外线诱变株；色氨酸抗性变种（Ｔｒｐｒ）的发酵效价又高于酪氨酸抗性变种（Ｔｙｒｒ）和苯丙氨酸抗性变种（Ｐｈｅｒ）；０．５％Ｔｒｐｒ变种比０．１％Ｔｒｐｒ变种更高产。其中０．５％Ｔｒｐｒ变种ＸＣ－５４０的生产能力较出发菌株ＸＣ－１０２增加４２．１６％。传代试验表明ＸＣ－５４０的遗传特性稳定，在７ｍ３罐做发酵放大，与出发菌株相比，发酵效价和发酵指数分别提高５１．１１％和５１．０２％。