SPR生物传感器的特点及其在生物特异性相互作用分析中的应用

利用表面等离子模共振技术(SPR)进行生物特异性相互作用分析(BIA)已成为现代基因工程技术中的一种先进的手段。与传统的研究方法如酶联免疫吸附测定(ELISA)相比,它具有方便快捷、灵敏度高、应用范围广、实时监控等多项特点。利用这种新型研究手段对于生命科学的基础研究、医学诊断以及治疗等方面有着十分重要的意义。本文粗略概括了近几年来利用SPR生物传感器进行基础研究的基本情况以及对其的改进,并简要分析了此项技术的优点以及发展前景。

SARS-CoV核蛋白和宿主细胞相互作用的初步研究

寻找与SARS-CoV核蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,从而探索SARS-CoV的致病机理。可溶性表达SARS-CoV核蛋白,利用His标签和离子交换层析对表达的蛋白进行了纯化,获得较纯的可溶性核蛋白。再将SPR/BIA技术与MALDI-TOF MS技术结合起来,使用SPR生物传感芯片作为亲和吸附的表面,分别捕获2BS细胞和A549细胞裂解液中与SARS-CoV核蛋白相互作用的细胞蛋白,收集足够量的相互作用蛋白,再利用MALDI-TOF-MS分析获得蛋白的性质。结果鉴定出与SARS-CoV核蛋白相互作用的蛋白:26S蛋白酶调节亚单位S10B(蛋白酶体亚单位p42)(蛋白酶体26S亚单位ATPase 6)(P62333),属于泛素/蛋白酶体系统;目前国内外尚未见类似报道。此研究初步发现了一种与SARS-CoV核蛋白在细胞外相互作用的蛋白,但这种相互作用在SARS-CoV感染及SARS的发生发展中发挥的作用还有待于深入研究和探索。

表面等离子共振-质谱法对相互作用的生物分子在10^-^(15)mol水平的微量鉴定

利用生物传感芯片质谱法 (BIA/MS)对微球蛋白及其抗体的相互作用进行分析和鉴定 .将微球蛋白抗体偶联到芯片上 ,让微球蛋白溶液流过芯片表面 ,然后使用“三明治”结构的微再生方法把结合的微球蛋白从芯片上洗脱下来 ,再对其进行酶解及质谱鉴定 ,在 1 0 - 1 5mol水平得到了明确的结果 .

生物特异相互作用分析及其应用进展

生物特异相互作用分析是 2 0世纪 90年代发展起来的一种应用生物传感芯片上配位体与生物分子的特异相互作用以表面等离子共振为检测系统的新的分析方法。本文综述生物特异相互作用与检测系统的原理、分析仪器及其在基因组学和基因工程药物研究中的应用进展。