U73122和SQ22536对豚鼠视网膜色素上皮细胞分泌bFGF的影响

目的:观察磷脂酶C抑制剂U73122和腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536对豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法:培养原代豚鼠RPE细胞,传2代后用于实验。用含U73122及SQ22536浓度均为1×10-5mol/L的两种培养液培养RPE细胞,设含有单纯溶质的培养液作为对照。分别于实验2、4、6、8、16、24、48 h收集培养液,ELISA法检测bFGF的含量。结果:ELISA结果显示:加入1×10-5mol/L U73122后,实验组bFGF的分泌量与对照组相比在2、4、6、8、16h减少(P<0.05),24、48 h变化无统计意义(P>0.05);而SQ22536组与对照组相比RPE细胞bFGF的分泌量在各时间点均有减少(P<0.05)。结论:U73122和SQ22536对RPE细胞bFGF的分泌均有抑制作用。提示RPE细胞内可能是通过磷脂酶C信号途径和腺苷酸环化酶信号途径共同调控bFGF的分泌。

丁香酚通过激活cAMP抑制3T3⁃L1前脂肪细胞分化

为研究丁香酚对3T3⁃L1前脂肪细胞成脂分化过程的影响及其分子机制,以未分化的3T3⁃L1前脂肪细胞为对照组,3⁃异丁基⁃1⁃甲基黄嘌呤、地塞米松、胰岛素和罗格列酮诱导分化的成熟脂肪细胞为模型组,探究3T3⁃L1细胞分化过程中的丁香酚处理对脂质积累的影响;使用腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536处理细胞,探究环腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)在丁香酚抑制脂质积累中发挥的关键作用。结果表明,与模型组相比,50µmol/L丁香酚处理显著降低脂质含量(P<0.0001),显著升高胞内cAMP水平(P<0.01)。当培养基中存在SQ22536时,丁香酚对3T3⁃L1细胞成脂分化过程中脂质积累的抑制作用由24.7%被削弱至6.7%,而丁香酚对细胞内cAMP水平的促进效果被完全消除。实时荧光定量聚合酶链式反应分析结果表明,丁香酚显著下调3T3⁃L1细胞成脂分化过程中脂质生成基因CEBPα(P<0.05)和aP2(P<0.01)的表达,显著上调产热相关基因UCP1的表达(P<0.01);SQ22536处理削弱或完全消除丁香酚对3T3⁃L1细胞脂质积累的抑制作用。因此,丁香酚可有效抑制3T3⁃L1细胞脂质积累,其作用机制与cAMP的激活有关。

染料木素抑制大鼠离体胃肠平滑肌收缩活动的研究

目的观察染料木素对大鼠离体胃肠平滑肌收缩活动的影响,并探讨其作用机制。方法取大鼠胃肠平滑肌条安置在恒温灌流肌槽中,记录其收缩活动,同时做CaCl2的量效曲线。结果染料木素能降低胃肠平滑肌条的张力,减小其收缩波平均振幅。酚妥拉明、左旋-NG-硝基精氨酸、格列本脲、SQ22536可部分阻断染料木素对大鼠离体胃肠收缩活动的抑制作用。1.00mol/L的染料木素对CaCl2的量效曲线无影响,50.0mol/L染料木素使CaCl2的量效曲线右移。结论染料木素对大鼠胃肠平滑肌条收缩活动具有抑制作用。