Osteoclasts are multinucleated bone-resorbing cells,and their formation is tightly regulated to prevent excessive bone loss.However,the mechanisms by which osteoclast formation is restricted remain incompletely determ...Osteoclasts are multinucleated bone-resorbing cells,and their formation is tightly regulated to prevent excessive bone loss.However,the mechanisms by which osteoclast formation is restricted remain incompletely determined.Here,we found that sterol regulatory element binding protein 2(SREBP2)functions as a negative regulator of osteoclast formation and inflammatory bone loss.Cholesterols and SREBP2,a key transcription factor for cholesterol biosynthesis,increased in the late phase of osteoclastogenesis.展开更多
目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)对肠道糖异生的调控作用。方法饥饿处理C57BL/6小鼠、SREBP1c纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)小鼠,通过qPCR、Western blot检...目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)对肠道糖异生的调控作用。方法饥饿处理C57BL/6小鼠、SREBP1c纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)小鼠,通过qPCR、Western blot检测糖异生途径限速酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase catalytic,G6PC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在肝脏、空肠和回肠组织中的表达水平;在肠上皮细胞CaCo-2中过表达或敲低SREBP1c,检测细胞内G6PC和PCK1表达水平。结果饥饿处理后,C57BL/6小鼠空肠、回肠组织中G6PC、PCK1和SREBP1c表达水平均显著增加(P<0.05)。SREBP1c基因敲除后,小鼠空肠、回肠组织中由饥饿诱导的糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达明显下调(P<0.05)。在肠上皮细胞CaCo-2中过表达SREBP1c,可显著上调糖异生途径关键酶G6PC和PCK1的表达,促进细胞内葡萄糖的产生(P<0.05);反之,敲低SREBP1c的表达,可明显下调G6PC和PCK1,抑制细胞内葡萄糖的产生(P<0.05)。结论饥饿状态下,SREBP1c可调控肠上皮细胞中糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达,进而影响葡萄糖的生成,表明SREBP1c可能参与肠道糖异生的调控,机制有待进一步探索。展开更多
目的筛选影响胆固醇调节元件结合蛋白1a(cholesterol regulatory element binding protein,SREBP1a)蛋白稳定性的去泛素化酶,并探索其调控机制。方法通过去泛素化酶库筛选显著影响SREBP1a表达的去泛素化酶,免疫蛋白印记实验和实时荧光定...目的筛选影响胆固醇调节元件结合蛋白1a(cholesterol regulatory element binding protein,SREBP1a)蛋白稳定性的去泛素化酶,并探索其调控机制。方法通过去泛素化酶库筛选显著影响SREBP1a表达的去泛素化酶,免疫蛋白印记实验和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)评估去泛素化酶对SREBP1a以及升脂基因表达的影响;通过红色荧光蛋白标记人源低密度脂蛋白(human Dil-low density lipoprotein,Human Dil-LDL)摄取和油红O染色等实验技术检测细胞摄取低密度脂蛋白(LDL)和脂质沉积情况。结果去泛素化酶库筛选发现泛素特异肽酶37(ubiquitin specific peptidase 37,USP37)可显著增加肝细胞SREBP1a蛋白表达水平,促进胆固醇摄取及脂质沉积。USP37基因敲除可显著降低SREBP1a蛋白表达水平,抑制升脂基因表达及脂质沉积。结论去泛素化酶USP37通过稳定SREBP1a蛋白表达,促进胆固醇摄取及脂质沉积,揭示了SREBP1a翻译后调控的新模式。展开更多
【目的】探讨成纤维细胞生长因子(FGF21)在小鼠非酒精性脂肪肝病程中肝组织和血清中的变化及其与胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的相关性,探讨其中的可能机制。【方法】分别给予C57BL/6小鼠素食和高脂饮食喂养1、9、18周,Western blot...【目的】探讨成纤维细胞生长因子(FGF21)在小鼠非酒精性脂肪肝病程中肝组织和血清中的变化及其与胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的相关性,探讨其中的可能机制。【方法】分别给予C57BL/6小鼠素食和高脂饮食喂养1、9、18周,Western blot和实时荧光定量RT-PCR检测肝脏组织FGF21和SREBP的表达,并分析二者的相关性;ELISA法检测小鼠血清的FGF21水平,分析血清FGF21水平与肝组织FGF21的蛋白和m RNA水平的相关性。【结果】高脂饮食喂养至9周时,小鼠肝脏的大体外观呈典型脂肪肝表现,至18周时HE染色可见肝细胞内大量的脂质颗粒聚集。与素食喂养小鼠相比,小鼠肝组织FGF21 m RNA水平在高脂饮食喂养至9周和18周时明显升高(均P<0.05),与高脂饮食的时间呈正相关(r=0.952,P=0.000)并同时与SREBP m RNA水平正相关(r=0.725,P=0.000)。而与素食喂养小鼠相比,小鼠肝组织FGF21蛋白在高脂饮食喂养至9周和18周时明显降低(P<0.05),SREBP蛋白表达则呈相反的趋势。血清的FGF21水平,与素食喂养相比,在高脂饮食喂养至9周和18周时明显升高(均P<0.05),与高脂饮食的时间呈正相关(r=0.944,P=0.000),与肝组织的FGF21蛋白水平负相关(r=-0.704,P=0.000),与FGF21 m RNA水平正相关(r=0.910,P=0.000)。【结论】在小鼠脂肪肝的逐渐进展中,肝组织FGF21 m RNA水平升高,蛋白水平降低,血清水平升高,并伴随SREBP的表达升高,提示肝脏中FGF21转录合成增加同时分泌亦明显增加,并与肝脏脂质合成及沉积密切相关。展开更多
基金supported by the National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin diseases (NIAMS)of NIH under Award Number R01 AR069562 and AR073156 (to K.H.P.-M.)by the National Research Foundation of Korea NRF2020R1A6A3A03037133 (to H.K.)+1 种基金by the support for the Rosensweig Genomics Center from The Tow Foundation,and by R03 AR068118 (to L.D.)NIH/NCI Cancer Center Support Grant P30 CA008748 (to L.D.)。
文摘Osteoclasts are multinucleated bone-resorbing cells,and their formation is tightly regulated to prevent excessive bone loss.However,the mechanisms by which osteoclast formation is restricted remain incompletely determined.Here,we found that sterol regulatory element binding protein 2(SREBP2)functions as a negative regulator of osteoclast formation and inflammatory bone loss.Cholesterols and SREBP2,a key transcription factor for cholesterol biosynthesis,increased in the late phase of osteoclastogenesis.
文摘目的研究固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP1c)对肠道糖异生的调控作用。方法饥饿处理C57BL/6小鼠、SREBP1c纯合敲除型(SREBP1c-KO)和同窝野生型(SREBP1c-WT)小鼠,通过qPCR、Western blot检测糖异生途径限速酶葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase catalytic,G6PC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase 1,PCK1)在肝脏、空肠和回肠组织中的表达水平;在肠上皮细胞CaCo-2中过表达或敲低SREBP1c,检测细胞内G6PC和PCK1表达水平。结果饥饿处理后,C57BL/6小鼠空肠、回肠组织中G6PC、PCK1和SREBP1c表达水平均显著增加(P<0.05)。SREBP1c基因敲除后,小鼠空肠、回肠组织中由饥饿诱导的糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达明显下调(P<0.05)。在肠上皮细胞CaCo-2中过表达SREBP1c,可显著上调糖异生途径关键酶G6PC和PCK1的表达,促进细胞内葡萄糖的产生(P<0.05);反之,敲低SREBP1c的表达,可明显下调G6PC和PCK1,抑制细胞内葡萄糖的产生(P<0.05)。结论饥饿状态下,SREBP1c可调控肠上皮细胞中糖异生限速酶G6PC和PCK1的表达,进而影响葡萄糖的生成,表明SREBP1c可能参与肠道糖异生的调控,机制有待进一步探索。
文摘目的筛选影响胆固醇调节元件结合蛋白1a(cholesterol regulatory element binding protein,SREBP1a)蛋白稳定性的去泛素化酶,并探索其调控机制。方法通过去泛素化酶库筛选显著影响SREBP1a表达的去泛素化酶,免疫蛋白印记实验和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)评估去泛素化酶对SREBP1a以及升脂基因表达的影响;通过红色荧光蛋白标记人源低密度脂蛋白(human Dil-low density lipoprotein,Human Dil-LDL)摄取和油红O染色等实验技术检测细胞摄取低密度脂蛋白(LDL)和脂质沉积情况。结果去泛素化酶库筛选发现泛素特异肽酶37(ubiquitin specific peptidase 37,USP37)可显著增加肝细胞SREBP1a蛋白表达水平,促进胆固醇摄取及脂质沉积。USP37基因敲除可显著降低SREBP1a蛋白表达水平,抑制升脂基因表达及脂质沉积。结论去泛素化酶USP37通过稳定SREBP1a蛋白表达,促进胆固醇摄取及脂质沉积,揭示了SREBP1a翻译后调控的新模式。
文摘【目的】探讨成纤维细胞生长因子(FGF21)在小鼠非酒精性脂肪肝病程中肝组织和血清中的变化及其与胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)的相关性,探讨其中的可能机制。【方法】分别给予C57BL/6小鼠素食和高脂饮食喂养1、9、18周,Western blot和实时荧光定量RT-PCR检测肝脏组织FGF21和SREBP的表达,并分析二者的相关性;ELISA法检测小鼠血清的FGF21水平,分析血清FGF21水平与肝组织FGF21的蛋白和m RNA水平的相关性。【结果】高脂饮食喂养至9周时,小鼠肝脏的大体外观呈典型脂肪肝表现,至18周时HE染色可见肝细胞内大量的脂质颗粒聚集。与素食喂养小鼠相比,小鼠肝组织FGF21 m RNA水平在高脂饮食喂养至9周和18周时明显升高(均P<0.05),与高脂饮食的时间呈正相关(r=0.952,P=0.000)并同时与SREBP m RNA水平正相关(r=0.725,P=0.000)。而与素食喂养小鼠相比,小鼠肝组织FGF21蛋白在高脂饮食喂养至9周和18周时明显降低(P<0.05),SREBP蛋白表达则呈相反的趋势。血清的FGF21水平,与素食喂养相比,在高脂饮食喂养至9周和18周时明显升高(均P<0.05),与高脂饮食的时间呈正相关(r=0.944,P=0.000),与肝组织的FGF21蛋白水平负相关(r=-0.704,P=0.000),与FGF21 m RNA水平正相关(r=0.910,P=0.000)。【结论】在小鼠脂肪肝的逐渐进展中,肝组织FGF21 m RNA水平升高,蛋白水平降低,血清水平升高,并伴随SREBP的表达升高,提示肝脏中FGF21转录合成增加同时分泌亦明显增加,并与肝脏脂质合成及沉积密切相关。
