基于SREBP-2/Lipin1轴调控的线粒体途径探讨糖尿病周围神经病变的发生机制

目的基于SREBP-2/Lipin1轴调控的线粒体途径探讨糖尿病周围神经病变的发生机制。方法 60只成年雄性SD大鼠,20只作为正常对照组,另外40只给予高糖高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,继续饲养6周,待大鼠尾部坐骨神经传导速度(SNCV)<30 m/s为糖尿病周围神经病变(DPN)模型成功。取正常对照组、DPN模型组大鼠各10只,取双侧坐骨神经,试剂盒法检测其活性氧(ROS)水平,Western blot检测SREBP-2、Lipin1蛋白表达。另外取10只正常对照组,30只DPN大鼠随机分为空白对照(NC)组、SREBP-2-siRNA(si-SREBP-2)组、Lipin1过表达(LV-Lipin1)组。si-SREBP-2组通过尾静脉注射SREBP-2-siRNA,LV-Lipin1组、NC组分别通过尾静脉注射Lipin1慢病毒载体、空慢病毒载体。取坐骨神经检测SREBP-2、Lipin1蛋白表达;8周后观察各组大鼠空腹血糖,测定SNCV;取坐骨神经检测线粒体膜电位、ROS、B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyto C)表达变化。结果与正常对照组比较,DPN模型组大鼠ROS含量、SREBP-2蛋白表达增加,Lipin1蛋白表达减少;调节SREBP-2、Lipin1表达后,与NC组大鼠比较,si-SREBP-2组、LV-Lipin1组大鼠坐骨神经SREBP-2蛋白表达下降,Lipin1蛋白表达升高,空腹血糖下降,SNCV加快,线粒体膜电位升高,ROS含量降低,Cyto C、Bcl-2水平升高,同时Bax蛋白水平下降。结论 DPN大鼠坐骨神经中存在SREBP-2、Lipin1表达异常,调节SREBP-2、Lipin1表达后可改善DPN大鼠坐骨神经病变,表明DPN的发生机制与SREBP-2、Lipin1调控的线粒体途径有关。

红鳍东方鲀SREBP-1和SREBP-2基因克隆及表达分析

为了研究红鳍东方鲀SREBP-1和SREBP-2基因的功能及在脂肪代谢中的分子机制,从红鳍东方鲀脂肪组织提取总RNA,反转录获得c DNA模板,利用设计的引物PCR扩增获得SREBP-1和SREBP-2开放阅读框(ORF),SREBP-1基因ORF区的c DNA序列长度为3 330 bp,编码1 109个氨基酸,SREBP-2基因ORF区的c DNA序列为3 444 bp,编码1 147个氨基酸。实时荧光定量PCR检测SREBP-1基因在红鳍东方鲀不同组织中的表达特征,结果表明,SREBP-1在脑组织中表达丰度最高,其次为眼、脂肪组织、肠、鳃、脾脏、心脏及肝脏,在肌肉中表达丰度最低。将SREBP-1连接到原核表达载体p ET32a上,利用IPTG对重组质粒p ET32a-SREBP-1在大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE电泳显示在141 k Da处有特异性的条带出现。

保肝消脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织SREBP-1、SREBP-2的影响

目的:通过保肝消脂颗粒对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝组SREBP-1、SREBP-2影响的研究,探讨保肝消脂颗粒治疗NAFLD的机理。方法:高脂饲料制备SD大鼠脂肪肝模型,将模型大鼠随机分为模型组,辛伐他汀组和保肝消脂颗粒高、中、低剂量组,并设空白组。治疗8周后,观察大鼠的一般情况,记录肝指数,采用酶联免疫法测定肝匀浆中SREBP-1、SREBP-2水平。结果:与正常对照组相比,造模组肝指数、肝组织中的SREBP-1、SREBP-2水平显著升高(P<0.05),经保肝消脂颗粒治疗后,肝指数、肝匀浆组织中SREBP-1、SREBP-2水平明显下降,其中保肝消脂颗粒中、高剂量组与模型组差异具有显著性。结论:保肝消脂颗粒可有效地降低肝组织匀浆SREBP-1、SREBP-2水平,该作用可能是其治疗非酒精性脂肪肝的作用机理之一。

补阳还五汤对高脂血症模型金黄地鼠血脂水平及SREBP-2/Pcsk9信号通路的影响

目的研究补阳还五汤对高脂血症模型金黄地鼠血脂水平及胆固醇调节元件结合蛋白2型(SREBP-2)/前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9型(Pcsk9)信号通路的影响。方法 60只金黄地鼠采用随机数字表法随机分为正常组、模型组、补阳还五汤低、中、高(5、10、20g/kg)剂量组和辛伐他丁(0.01g/kg)组,每组10只。正常组地鼠给予普通饲料,其余组地鼠给予高脂饲料建立高脂血症模型,4周后同时灌胃给予相应药物,正常组和模型组地鼠灌胃给予等体积蒸馏水,每天1次,连续给药4周。末次给药后,检测各组地鼠血总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT),肝脏组织病理及油红O染色,肝脏组织SREBP-2、Pcsk9、低密度脂蛋白受体(LDL-R)蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组地鼠血TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平增高[TC:(20.64±4.98)mmol/L比(1.31±0.23)mmol/L,TG:(19.20±6.88)mmol/L比(0.65±0.01)mmol/L,LDL-C:(17.91±2.69)mmol/L比(1.35±0.28)mmol/L,AST:(193.47±28.53)U/L比(25.37±5.58)U/L,ALT:(146.57±37.10)U/L比(47.43±14.52)U/L,P均<0.01],HDL-C水平降低[(1.06±0.48)mmol/L比(3.64±0.74)mmol/L,P<0.01];SREBP2、Pcsk9、LDL-R蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);肝脏组织脂肪浸润明显,脂肪空泡明显增加,脂质沉积。与模型组比较,补阳还五汤中、高剂量组地鼠血TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平降低[TC:(16.07±2.68)mmol/L、(8.58±3.57)mmol/L比(20.64±4.98)mmol/L,TG:(12.42±3.60)mmol/L、(9.83±2.60)mmol/L比(19.20±6.88)mmol/L,LDL-C:(10.16±3.14)mmol/L、(13.86±2.56)mmol/L比(17.91±2.69)mmol/L,AST:(134.13±51.15)U/L、(107.21±56.32)U/L比(193.47±28.53)U/L,ALT:(130.55±47.49)U/L、(92.01±33.52)U/L比(146.57±37.10)U/L,P<0.05或P<0.01],HDL-C水平升高[(1.71±0.44)mmol/L、(2.26±0.52)mmol/L比(1.06±0.48)mmol/L,P<0.05或P<0.01],SREBP2、Pcsk9、LDL-R蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01),肝组织脂肪空泡减少,脂质沉积减少,以补阳还五汤高剂量组最显著。补阳还五汤高剂量组金黄地鼠血TC、TG、LDL-C、HDL-C水平及AST、ALT水平与辛伐他汀组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论补阳还五汤对高脂血症模型黄金地鼠具有显著降血脂作用,改善肝脏组织脂肪变性,促进肝脏脂质代谢,其机制可能与调节SREBP-2/Pcsk9信号通路有关。

Ox-LDL对急性冠脉综合症患者外周血单核-巨噬细胞SREBP-2和HMGCR mRNA表达的影响

目的探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对急性冠脉综合征(ACS)患者单核-巨噬细胞SREBP-2,HMGCR mRNA表达的影响。方法利用超速密度梯度离心法分离低密度脂蛋白(LDL),铜离子氧化法制备ox-LDL。选择冠状动脉造影确诊为急性冠脉综合症患者,分离培养外周血单核细胞,氟波脂(PMA)刺激使之转变为巨噬细胞,分别采用0、20、40、100ng/mL的ox-LDL进行干预。采用荧光定量逆转录多聚酶链反应检测干预后细胞内SREBP-2和HMGCR mRNA的表达变化。结果在ACS患者单核-巨噬细胞内,各干预组SREBP-2和HMGCR mRNA相对表达量较对照组增加(P<0.05),各干预组内SREBP-2和HMGCR mRNA表达的量也有显著性差异(P<0.05)。结论Ox-LDL能显著促进ACS患者单核-巨噬细胞内SREBP-2和HMGCR mRNA的表达增加,并且在一定范围内,随着ox-LDL浓度的增加,SREBP-2和HMGCR mRNA的表达量也随之明显增加。

芪茵颗粒对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织SREBP-1、SREBP-2的影响

目的探讨芪茵颗粒对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠肝组织中固醇调节元件蛋白1(SREBP-1)、固醇调节元件蛋白2(SREBP-2)表达的影响及作用机制。方法雄性SD大鼠72只,随机分成空白对照组、模型组、芪茵颗粒低、中、高剂量组和阳性药组硫普罗宁组,每组12只。除空白对照组正常进食、自由饮水外,其余5组大鼠予高脂乳剂进行灌胃,每日1次,共10w,造模成功后分别用芪茵颗粒低、中、高剂量及硫普罗宁灌胃治疗,共10w。观察大鼠的一般情况,记录各组大鼠体质量和肝指数,光镜观察肝脏病理组织学变化,酶联免疫法测定肝匀浆中SREBP-1、SREBP-2的含量。结果 (1)芪茵颗粒低、中、高剂量组治疗前、后大鼠体质量增长的速度明显低于模型组大鼠治疗前、后体质量的增长(P<0.05)。与模型组相比,芪茵颗粒中、高剂量组治疗后的体质量明显减少(P<0.05)。与空白对照组相比,模型组肝指数明显增高(P<0.05)。治疗后芪茵颗粒高、中、低剂量组肝指数与模型组相比均降低(P<0.05);(2)模型组大鼠肝脏NAS积分与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,芪茵颗粒高、中、低剂量组及硫普罗宁组均能不同程度的降低肝脏NAS积分;(3)与空白对照组比较,模型组、芪茵颗粒高、中、低剂量组及硫普罗宁组SREBP-1、SREBP-2含量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,芪茵颗粒高、中、低剂量组及硫普罗宁组SREBP-1、SREBP-2含量均明显降低(P<0.05);与硫普罗宁组比较,芪茵颗粒高、中剂量组SREBP-1、SREBP-2含量明显降低(P<0.05)。结论芪茵颗粒可以控制NAFLD大鼠体质量增长,显著改善NAFLD大鼠肝指数和肝组织脂肪变性,有效降低肝组织匀浆中SREBP-1、SREBP-2的水平,从而发挥NAFLD的治疗作用。

胰胆舒胶囊联合腹腔镜微创取石术对胆囊结石患者血清CCK-A、SREBP-2水平影响

目的探讨胰胆舒胶囊联合腹腔镜微创取石术对胆囊结石(GS)患者血清胆囊收缩素A型受体(CCK-A)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP-2)水平的影响。方法选取2017年1月至2020年1月北京博爱医院84例GS患者,随机分为观察组和对照组,各42例。两组患者均行腹腔镜微创取石术治疗,对照组术后接受常规西药治疗,观察组术后在对照组基础上予以胰胆舒胶囊治疗。比较两组治疗效果、术前、术后3个月胆囊收缩功能及胆囊壁厚度、血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CCK-A、SREBP-2水平、并发症及不良反应发生率,随访2年统计两组复发情况。结果术后3个月观察组总有效率高于对照组(P<0.05);术后3个月观察组胆囊收缩功能及胆囊壁厚度优于对照组(P<0.05);术后3个月观察组血清IL-6、TNF-α、SREBP-2水平低于对照组,血清CCK-A水平高于对照组(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05),术后均未发生并发症;随访2年,观察组复发率低于对照组(P<0.05)。结论胰胆舒胶囊可进一步提高GS患者腹腔镜微创取石术的手术效果,改善胆囊收缩功能及胆囊壁厚度,调节血清SREBP-2、CCK-A、IL-6、TNF-α水平,减轻炎性反应,减少复发,且安全性高。

SREBP-2基因1784G>C位点多态性与血清脂质水平变化的关系

目的:为探讨固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)基因1784G>C位点多态性与高胆固醇血症人群膳食干预效果的关系。方法:从北京市西城区8个社区居民中筛出110名高胆固醇血症患者,按所在社区随机分为干预组(64人)和对照组(46人),对两组人群进行血脂谱水平检测、膳食调查、体格检查及SREBP-2基因1784G>C位点多态性检测(PCR-RFLP方法),并对干预组进行为期6个月的膳食干预。结果:与对照组相比,干预组干预后膳食结构趋向合理,血清TC、LDL-C和HDL-C水平明显下降(P<0.05),且SREBP-2基因1784G>C位点GG基因型携带者TC和LDL-C水平降低幅度大于GC/CC基因型。结论:本研究初步得出SREBP-2基因1784G>C位点多态性可部分解释高胆固醇血症人群膳食干预易感性的差异,但仍需进一步证实。

visfatin对大鼠肝脏胆固醇代谢及SREBP-2的调控作用

目的:探讨visfatin对血浆胆固醇代谢和肝胆固醇合成的影响.方法:将空载体转染对照组(NC组),大鼠visfa-tin基因真核表达质粒转染普通饲料组(NT组)和高脂组(HT)大鼠,并测定转染前后各组大鼠血浆胆固醇及肝脏HMG CoA还原酶和固醇调节元件结合蛋白2(SREBP2)mR-NA表达的变化.结果:visfatin质粒注射3 d后,NT和HT组大鼠血浆胆固醇均较注射前明显下降[(1.61±0.18)vs(1.25±0.09)mmol/L和(2.37±0.11)vs(1.74±0.12)mmol/L,均P<0.05];高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)也明显降低[(0.83±0.09)vs(0.56±0.09)mmol/L和(1.32±0.09)vs(0.91±0.04)mmol/L,P<0.05];NT和HT组大鼠SREBP2mRNA表达均明显高于NC组[(0.37±0.06),(0.36±0.07)vs(0.21±0.04),均P<0.05],NT组HMG CoA还原酶mRNA水平明显高于NC,HT组[(0.89±0.13)vs(0.37±0.07)和(0.55±0.16),均P<0.05],NC组与HT组无明显差异.结论:visfatin可能通过促进SREBP2和HMG CoA还原酶表达来调节体内胆固醇代谢.

腹腔镜胆囊切除术对胆结石患者血清CCK-A、SREBP-2及TCB水平的影响

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术对胆结石患者血清CCK-A、SREBP-2及TCB水平的影响效果。方法:选择胆结石患者104例,用随机数字法分为对照组和研究组,每组各52例。对照组应用小切口胆囊切除术治疗,研究组应用腹腔镜胆囊切除术治疗。对两组患者的手术情况、胆固醇指标以及并发症发生率进行比较。结果:研究组手术情况优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);手术前,两组血清CCK-A水平、血清SREBP-2水平、血清TCB水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);手术后,研究组胆固醇指标优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组并发症发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胆结石患者治疗时,应用腹腔镜胆囊切除术治疗,治疗效果明显,有效缩短胆结石患者的住院时间,降低出血量,减少疼痛感,同时,明显提高胆结石患者机体中的血清CCK-A水平,降低血清SREBP-2、TCB水平,抑制炎性反应,并减少发生并发症的情况,安全性高,进而有利于促进患者尽早康复,值得在临床上进一步推广应用。

儿茶素对HUVECs细胞胆固醇蓄积及SREBP-2基因表达的影响

目的探讨儿茶素对HUVECs细胞内胆固醇蓄积以及对SREBP-2基因表达的影响。方法60μmol·L^(-1)儿茶素处理体外培养HUVECs细胞24 h后,采用MTT法检测细胞活性,采用油红O染色法观察细胞内脂质蓄积,酶法测定细胞内胆固醇水平,qRT-PCR检测基因SREBP-2表达。结果与对照组比较,Chol∶MβCD处理组细胞增殖率降低,细胞内脂滴明显增加,游离胆固醇、总胆固醇含量增加。经儿茶素共孵育后,与Chol∶MβCD组比较细胞增殖率增加,细胞内脂滴显著减少,游离胆固醇、总胆固醇含量降低,SREBP-2 mRNA表达显著降低。结论儿茶素可减少HUVECs细胞内胆固醇蓄积,其作用机制可能与调节SREBP-2的表达有关。

经脐单孔腹腔镜胆囊切除术对胆囊结石患者胃肠功能和血清固醇激素调节元件结合蛋白2水平的影响

目的 探讨经脐单孔腹腔镜胆囊切除术(TUSPLC)对胆囊结石患者胃肠功能和血清固醇激素调节元件结合蛋白2 (SREBP-2)水平的影响。方法 选取2021年9月-2022年8月于该院治疗的100例胆囊结石患者作为研究对象,采取随机数表法分为对照组和研究组,各50例。对照组行腹腔镜胆囊切除术(LC),研究组行TUSPLC,比较两组患者临床疗效。结果 两组患者术中出血量比较,差异无统计学意义(P> 0.05);研究组手术时间长于对照组,住院时间、肛门排气时间、进食时间、肠鸣音恢复时间和排便时间短于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05)。术前,两组患者麦吉尔布里斯班症状评分(MBSS)、血清SREBP-2、白细胞介素-6 (IL-6)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)比较,差异均无统计学意义(P> 0.05);术后3个月,两组患者MBSS、血清SREBP-2、IL-6和TNF-α较术前降低,且研究组降低幅度大于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05);两组患者并发症发生率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论TUSPLC治疗胆囊结石的效果确切,可降低血清SREBP-2和炎症因子水平,促进患者胃肠功能恢复,安全性高。

中药复方益糖康对2型糖尿病大鼠肝脏AMPK/SREBP-1C/FAS的影响

目的 通过观察中药复方益糖康对2型糖尿病大鼠血脂水平、肝脏形态学变化及肝脏中单磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)/固醇调节元件结合蛋白1C(sterol regulatory element binding protein 1C,SREBP-1C)/脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase, FAS) mRNA与蛋白表达的影响,探究益糖康对2型糖尿病大鼠脂代谢的干预作用及机制。方法 SPF级Wistar大鼠32只,随机选取8只为正常对照组予正常饲料喂养,其余大鼠予高脂饲料喂养。4周后,高脂喂养的大鼠予链脲佐菌素(streptozocin, STZ)腹腔注射造模,并随机分为模型组、益糖康组与二甲双胍组(n=8),正常对照组大鼠腹腔注射等量缓冲溶液。益糖康组与二甲双胍组分别予相应药物日1次灌胃治疗,正常对照组与模型组大鼠同期给予等体积生理盐水灌胃。给药6周后,检测大鼠血清总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoproteincholesterol, HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C)水平以及空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)和空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)水平,HE与油红O染色观测大鼠肝脏形态学变化与脂质沉积情况,RT-qPCR与Western blot分别检测AMPK/SREBP-1C/FAS mRNA与蛋白的表达情况。结果 与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏可见脂肪空泡与炎性细胞浸润,油红着色脂滴沉积,血清FBG、FINS、TC、TG与LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著下降(P<0.01);肝脏AMPK mRNA与蛋白表达显著降低,SREBP-1C、FAS mRNA与蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,益糖康、二甲双胍组肝脏脂肪空泡与炎性细胞浸润减轻,油红着色脂滴减少,血清FBG、FINS、TC、TG与LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著升高(P<0.05,P<0.01);肝脏AMPK mRNA与蛋白表达显著升高,SREBP-1C、FAS mRNA与蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 中药复方益糖康可能通过调控脂代谢相关通路AMPK/SREBP-1C/FAS,上调AMPK,下调SREBP-1C/FAS mRNA与蛋白表达改善2型糖尿病大鼠脂代谢紊乱。

脾虚高脂血症大鼠肝脏miRNA-122a的表达及其与SREBP-2通路调控的关系

目的:通过观察脾虚高脂血症(HLP)大鼠肝脏miRNA-122a及其与SREBP-2通路调控的关系,探讨脾虚对肝脏胆固醇代谢的影响及机制。方法:SD大鼠随机分为空白对照组、HLP组、脾虚HLP组。HLP组喂饲高脂饲料,脾虚HLP组同时予疲劳加饮食不节。造模结束后,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、淀粉酶(AMY),HE及油红O染色观察肝脏脂质沉积,实时荧光定量PCR检测肝脏miRNA-122a及胆固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)m RNA的表达,Western blotting检测肝脏上述蛋白。结果:与空白对照组比较,两组模型血清TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C、AMY水平显著降低(P<0.05,P<0.01),以后者改变显著(P<0.05,P<0.01);并且两组模型肝细胞均形成大量脂质沉积,肝脏miRNA-122a及其调控的基因和蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),以后者改变明显(P<0.05,P<0.01)。结论:脾虚加重血清胆固醇水平异常及肝脏脂质沉积,可能与miRNA-122a调控SREBP-2通路有关。

糖肾一号胶囊对糖尿病肾病大鼠血清SREBP-1c、SREBP-2c水平及肾组织IRS-1、PI3K、podocin、CD2AP蛋白表达影响

目的:观察糖肾一号胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用及可能机制。方法:SD大鼠采用腔注射STZ方法建立糖尿病肾病模型,对造模成功大鼠分为模型组、厄贝沙坦片组(15.75mg/kg)、糖肾一号组(1800mg/kg)、糖肾一号组(900mg/kg)、糖肾一号组(450mg/kg),各15只,另设正常对照组15只,连续给药8周,观察血糖、血脂、胱抑素C、SREBP-1c、SREBP-2c水平,尿微量白蛋白,肾组织IRS-1、PI3K、podocin、CD2AP蛋白表达水平。结果:与模型对照组比较,糖肾一号胶囊(900mg/kg、1800mg/kg)各组大鼠血糖、血脂、胱抑素C、尿微量白蛋白明显降低,肾脏组织IRS-1及PI3K、podocin、CD2AP蛋白表达水平明显升高,糖肾一号胶囊(450mg/kg)组升高不明显,糖肾一号胶囊(900mg/kg)组与糖肾一号胶囊(450mg/kg)比较,具有统计学意义,糖肾一号胶囊(900mg/kg)为有效剂量。结论:糖肾一号胶囊通过激活胰岛素受体底物-1(IRS-1),激活胰岛素信号传导系统,达到降糖;降低血清SREBP-1c、SREBP-2c水平,调节血脂代谢;提高肾组织podocin、CD2AP蛋白表达,改善肾足细胞损伤,降低尿蛋白,进而通过上述综合作用达到改善肾脏纤维化、硬化作用。

染料木黄酮对HepG2细胞胆固醇代谢和SREBP-2通路的调控作用

目的探讨染料木黄酮(Gen)对HepG2人肝癌细胞胆固醇代谢和SREBP-2通路的调节作用。方法体外培养HepG2细胞,将HepG2细胞在含有0、0.01、0.10、1.00、10.00、50.00、100.00μmol/L Gen的培养液内分别培养24、48、72 h后,用MTT法检测细胞增殖活性。用分别含0、0.01、1.00、10.00、50.00μmol/L Gen的完全培养液培养HepG2细胞24 h,收集细胞,分别进行细胞内总胆固醇(TC)含量检测、实时荧光定量PCR检测细胞低密度脂蛋白受体(ldlr)、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(hmgcr)基因的mRNA表达和蛋白印迹法检测核转录因子SREBP-2的表达。结果 0.01、0.10、1.00、10.00、50.00、100.00μmol/L Gen分别作用于HepG2细胞24 h,0.01、0.10、1.00μmol/L Gen组细胞增殖率高于溶剂对照组(均P<0.05);作用48、72 h,1.00、10.00、50.00、100.00μmol/L Gen组细胞增殖率均低于溶剂对照组(均P<0.05)。1.00、10.00、50.00μmol/L Gen与HepG2细胞共同孵育24 h,HepG2细胞内TC水平分别为(1.81±0.15)、(2.29±0.17)、(2.88±0.08)mmol/L,均高于对照组[(1.44±0.17)mmol/L],且随着Gen浓度升高,呈增加趋势(R2=0.48,P<0.01);各Gen实验组的hmgcr和ldlr基因的mRNA表达水平随着Gen浓度升高而升高(R2分别为0.53、0.79,均P<0.01)。1.00、10.00、50.00μmol/L Gen组蛋白表达灰度值均高于对照组(均P<0.01)。结论染料木黄酮能够调节细胞内胆固醇的代谢,其作用机制可能与调控SREBP-2通路有关。

全谷豆复合包经SREBP-2、LDLR和Visfatin调控胆固醇代谢机制的探讨

目的探讨全谷豆复合包改善脂代谢紊乱大鼠胆固醇代谢的可能机制。方法 44只雄性SD大鼠随机分为高脂模型组、米面组、全谷豆复合包组和阴性对照组,分别给予对应饲料连续喂养8周。实验前后测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;实验结束后股动脉取血,分离脏器称重,计算脏体比和脂体比,检测血清中Visfatin浓度、肝脏组织中SREBP-2 mRNA和LDLR mRNA的表达以及脂肪组织中VisfatinmRNA的表达。结果与高脂模型组和米面组相比,全谷豆复合包组大鼠体重、血清TC、TG、LDL-C水平显著下降(P<0.05),血清HDL-C水平显著升高(P<0.05)。全谷豆复合包组大鼠血清Visfatin水平显著低于高脂模型组和米面组(P<0.05);与高脂模型组和米面组比较,全谷豆复合包组大鼠肝脏组织中SREBP-2 mRNA和LDLRmRNA的表达显著升高(P<0.05),脂肪组织中Visfatin mRNA的表达明显降低(P<0.05)。结论全谷豆复合包可以改善高脂膳食诱导的脂代谢紊乱大鼠的血脂和Visfatin水平,可能的机制是全谷豆复合包能增加SREBP-2和LDLR的mRNA表达,降低Visfatin mRNA的表达,经SREBP-2、LDLR和Visfatin途径调控胆固醇的代谢,起到维持TC和LDL-C的正常水平,改善脂代谢紊乱的作用。

菖蒲郁金汤化裁方对2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠SREBP-1c表达和胰岛素抵抗的影响

目的观察菖蒲郁金汤化裁方对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏组织病理、胰岛素抵抗(IR)和固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)表达的影响。方法将32只SD大鼠分成正常组8只和模型组24只,采用高脂饮食结合链脲佐菌素(STZ)建立T2DM合并NAFLD大鼠模型。造模成功后,再将成模大鼠随机分成中药组、阳性药组、模型组各8只。中药组灌服菖蒲郁金汤化裁方药液,阳性药组灌服二甲双胍粉末混悬液,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,8周后麻醉处死取材。HE染色观察各组大鼠肝脏病理变化,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS)含量,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),RT-PCR法测定大鼠肝脏SREBP-1c的表达水平。结果与模型组相比,中药组肝脏脂肪变现象明显改善,INS和HOMA-IR水平明显降低(P<0.05或P<0.01),SREBP-1c在肝脏内的表达水平明显降低。结论菖蒲郁金汤化裁方对T2DM合并NAFLD大鼠有较明显的治疗作用,其作用机制可能与降低SREBP-1c的表达水平,从而减少肝脏脂肪沉积和细胞变性,并改善IR有关。

姬松茸多糖对2型糖尿病大鼠SREBP-1c和SCD-1蛋白表达的影响

目的分析姬松茸多糖对2型糖尿病大鼠肝脏保护作用及对SREBP-1c和SCD-1表达的影响。方法将60只雄性SD大鼠(随机数字表)分为空白对照组、2型糖尿病模型组、姬松茸多糖组(150、100、50 mg/kg)及二甲双胍组(150 mg/kg),分别为A、B、C、D、E和F组。除A组外,B-F组均腹腔注射STZ(35 mg/kg)诱导复制糖尿病大鼠模型;A和组注射等体积生理盐水,C-F组按相应的药物及剂量进行灌胃处理干预,4周后取大鼠血清,检测血清FBG、TG、TC、HDL-C、LDL-C;取大鼠肝脏组织进行HE染色观察,采用qRT-PCR和Western blotting检测SREBP-1c和SCD-1 mRNA和蛋白水平。结果B组大鼠血糖水平明显高于A组(P<0.05),给药后C、D和F组血清FBG、LDL-C、TC、TG水平均显著低于B组(P<0.05),而HDL-C水平高于B组(P<0.05);与B组相比较,E组的FBG、LDL-C、TC、TG、HDL-C水平有降低的趋势,其差异无统计学意义。HE染色结果:与B组比较,C组和F组小叶结构清晰、肝细胞排列规则、肝脏细胞脂肪变性减少。qRT-PCR和Western blotting结果表明,B组肝脏SREBP-1c和SCD-1 mRNA和蛋白表达高于A组(P<0.05);与B组相比较,C、D和F组肝脏SREBP-1c和SCD-1 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),E组SREBP-1c和SCD-1 mRNA和蛋白降低,但差异无统计学意义。结论姬松茸多糖高、中剂量对2型糖尿病大鼠干预后,血糖血脂水平、肝脏SREBP-1c和SCD-1表达降低,肝脏细胞脂肪变性和肝细胞坏死减少,对肝脏有一定的保护作用,在治疗2型糖尿病中具有较高的应用前景。

瓜子金基于HMG-COA/SREBP/LXRa通路的LO2细胞脂代谢研究

目的:探索瓜子金不同萃取部位在体外对人正常肝细胞(LO2)脂代谢的影响.方法:建立LO2高胆固醇、高甘油三酯模型,利用酶标仪比色法考察不同萃取部位对LO2细胞内胆固醇、甘油三酯的影响,利用Western-Blot考察不同萃取部位对HMG-COA还原酶、SREBP-2、LXRa蛋白表达的影响.结果:二氯甲烷部位(Ⅱ)和正丁醇部位(Ⅲ)能显著降低LO2细胞中胆固醇及甘油三酯的含量(P<0.05);进一步的Western-Blot结果表明,在高胆固醇模型中,Ⅱ部位和Ⅲ部位均可显著降低细胞中HMG-COA还原酶蛋白的表达,Ⅱ部位对SREBP-2蛋白和LXRa的影响无显著性差异,Ⅲ部位则表现出降低SREBP-2而升高LXRa的作用;在高甘油三酯模型中,Ⅱ部位和Ⅲ部位均对HMG-COA无影响,但均可降低SREBP-2的表达,另Ⅱ部位降低LXRa的表达呈显著性差异.结论:瓜子金二氯甲烷部位和正丁醇部位可干预LO2细胞的胆固醇、甘油三酯代谢,并且可能是通过调节SREBP-2/HMG-COA/LXRa的表达而实现的.