柴胡皂苷-d对乙醇损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用及其机制研究

目的研究柴胡皂苷-d(SS-d)对乙醇损伤大鼠原代培养肝细胞保护的作用和机制。方法采用胰蛋白酶消化、分离大鼠肝细胞进行原代培养,乙醇体外诱导肝细胞损伤,以不同浓度的SS-d对肝细胞保护,检测培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性和肝细胞内丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性,MTT法检测肝细胞存活率。结果SS-d(1.0,2.0,3.0mg.L-1)明显改善肝细胞存活率,抑制乙醇引起的ALT活性的升高,对肝细胞中MDA含量升高和GSH-px活性降低均有明显的抑制作用。结论SS-d对乙醇损伤大鼠肝细胞有保护作用,其机制可能与SS-d清除自由基、抑制质脂过氧化作用有关。

柴胡皂苷-d对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞活化的影响

目的研究柴胡皂苷-d(SS-d)对酒精性肝纤维化大鼠星形细胞(HSC)活化的影响,以探讨SS-d抗肝纤维化的作用机制。方法SD大鼠随机分为3组:酒精组、SS-d保护组、正常对照组。利用白酒灌胃辅以高脂饲料方法建立大鼠肝纤维化模型,同时给予SS-d保护,12周末处死大鼠。免疫组化检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,H.E染色和Van-Gieson染色观察肝组织病理改变和纤维组织增生,常规生化方法检测肝功能。结果和模型组比较,SS-d明显减少肝组织中α-SMA的表达;降低血清ALT,AST活性和肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;肝组织病理改变明显好转,纤维组织增生明显减少。结论SS-d通过降低α-SAM表达,抑制肝HSC的活化达到抗肝纤维化作用。

柴胡皂苷-d对大鼠肝癌细胞H4-ⅡE细胞内Ca^(2+)的影响研究

目的探讨柴胡皂苷-d(saikosaponin-D,SS-D)诱导大鼠肝癌细胞H4-ⅡE细胞内钙离子浓度([Ca2+]cyt)变化的影响研究。方法通过噻唑蓝(MTT)比色实验选择合适的药物浓度、荧光指示剂Fluo-3/AM检测[Ca2+]cyt及钙库中Ca2+的变化。结果 MTT比色结果显示,10、30、50、70、100μmol/L SS-D对细胞的存活率都在90%以上。第一大组中阴性对照组可引起细胞内钙离子浓度升高,其平均荧光强度(MFI)为35.76±1.37;阳性对照组可使其大幅度升高,其MFI值为74.74±1.26。不同浓度的SS-D也可使其不同程度升高,并且与SS-D呈浓度依赖性,其平均荧光强度(MFI)分别为59.95±1.02、73.89±1.35、80.30±0.04、93.30±0.83。阳性对照组及处理组的MFI值明显高于阴性对照组(P<0.05);处理组1、处理组3及处理组4 MFI值与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);石胆酸(LCA)及SS-D、熊脱氧胆酸(UDCA)都能诱导细胞钙库中Ca2+释放。结论 SS-D能诱导细胞内Ca2+内流,增加[Ca2+]cyt,调控细胞内Ca2+的生理活动。

基于四阶统计2-D切片的直扩信号多参数估计

基于四阶累积量2-D切片,提出了一种低信噪比环境直扩信号的参数估计方法。该方法可同时估计直扩信号的载波频率和扩频码周期,且还具有较强的抑制噪声的能力。计算机仿真实验验证了其有效性。

生长抑素(SS)基因在pET-32表达系统中的高效表达

分别将SS基因克隆至pET 32a和pET 32c表达系统中 ,得到重组质粒SS N/X和SS N/S。实验结果表明 ,SS N/X Thioredoxin (硫氧还原蛋白 )和SS N/S Thioredoxin融合蛋白在IPTG (异丙基硫代 β D半乳糖苷 )诱导 3h后(37℃ )表达产量最高 ,约占菌体总蛋白的 30 %左右。 0 0 5～ 1mmol·L-1IPTG对SS融合蛋白表达产量的影响并不太大 ,0 0 5mmol·L-1IPTG即可达到有效的诱导效果 ,但单位体积内的表达产量以 0 5mmol·L-1时为最高。乳糖诱导 4h(37℃ )的效果明显低于IPTG ,但当培养时间延长至 8h时 ,2 0mg·mL-1的乳糖可达到与IPTG同样的诱导效果 ,10和 5mg·mL-1的乳糖也可接近IPTG的诱导效果。SS N/X融合蛋白在 2 6℃表达时 ,主要以可溶性形式存在 ,占75 8% ,包涵体仅占 2 4 2 % ;而SS N/S融合蛋白则主要以包涵体形式存在 ,占 6 0 2 % ,可溶性蛋白仅占 39 8%。SS可溶性融合蛋白具有良好的SS抗原性。

柴胡皂苷-D对乙醇损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

目的:研究柴胡皂苷-d(SS-d)对乙醇损伤大鼠肝细胞的保护作用。方法:采用胰蛋白酶消化、分离大鼠肝细胞进行原代培养,乙醇体外诱导肝细胞损伤,以不同浓度的SS-d对肝细胞保护,检测培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,肝细胞内丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)的活性,MTT法检测肝细胞存活率。结果:SS-d可明显提高肝细胞存活率、抑制乙醇引起的ALT活性和MDA含量的升高以及GSH-px活性的降低(P<0.05,P<0.01)。结论:SS-d对乙醇损伤大鼠肝细胞有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。

柴胡皂苷d对自身免疫性肝炎小鼠差异表达基因CTLA-4、IL-10和IL-17的影响

目的·选用Agilent-085631芯片筛选自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠差异表达基因,并观察柴胡皂苷d(Saikosaponin d,SS-d)对部分差异表达基因的影响,探讨SS-d治疗AIH的作用机制。方法·健康雄性SPF级C57BL/6小鼠40只,分为芯片组(n=8)和SS-d治疗机制组(n=32)。芯片组分为正常组和模型组[按15 mg/kg剂量给予尾静脉注射刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)](每组n=4),12 h后处死,进行肝脏差异表达基因的筛选,并采用q RT-PCR技术对部分基因进行验证。SS-d治疗机制组分为正常组、模型组(处理同芯片组)、SS-d低剂量组和SS-d高剂量组(参照文献及预实验结果,分别按2.5和5.0 mg/kg剂量腹腔注射SS-d,8 h后按15 mg/kg剂量给予尾静脉注射Con A)(每组n=8)。12 h后收集小鼠静脉血及肝脏总蛋白、总RNA,采用ELISA法检测血清谷丙转氨酶(glutamic pyruvic transaminase,GPT)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)及白介素(interleukin,IL)-10、IL-17的含量,Western blotting检测细胞毒T淋巴细胞相关抗原(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen,CTLA)-4蛋白的表达量,q RT-PCR技术检测IL-10、IL-17和CTLA-4 m RNA表达量。结果·共筛查差异表达基因11 512个(上调5 189个,下调6 323个),与138条信号通路相关;差异表达基因IL-10、IL-17及CTLA-4的q RT-PCR检测结果与芯片筛查结果一致。与正常组比较:模型组小鼠血清GPT、GOT含量升高;IL-17 m RNA表达量升高,IL-10 mRNA和CTLA-4 mRNA表达量降低;血清IL-17含量升高,血清IL-10含量降低,肝组织CTLA-4蛋白表达量降低。与模型组比较:SS-d低剂量组和SS-d高剂量组小鼠血清GPT、GOT含量降低;IL-17 mRNA表达量降低,IL-10 mRNA和CTLA-4 mRNA表达量升高;血清IL-17含量降低,血清IL-10含量升高,肝组织CTLA-4蛋白表达量升高。结论·多条信号通路参与AIH的发病,而SS-d可通过调节IL-10、CTLA-4、IL-17的表达,改善AIH小鼠肝脏炎症反应。

A New D-optimal Design Scheme for the Identification of Cubic Polynomials

In this paper, the limitations of the single cube D-optimal design scheme is studied, and a double cube D-optimal design scheme is suggested in order to overcome the limitations. For a sort of incomplete cubic polynomials, the test design of the identification is developed with this new scheme, and the comparation with the single cube scheme is also given. This scheme is shown to be perfectly suitable for the optimal identification of the complete cubic polynomials.

HPLC法测定不同品种柴胡中的柴胡皂苷a、c、d的含量

目的 考察不同品种柴胡中柴胡皂苷 a、c、d的含量 ,以期扩大柴胡药用品种的范围。方法 采用 RP-HPL C法 ,使用 L U NA C1 8柱、乙腈 -水为流动相进行梯度洗脱 ,检测波长为 2 10 nm ,以柴胡皂苷 a、c、d含量为指标进行比较。结果 不同品种柴胡中的柴胡皂苷 a、c、d含量差异悬殊 ,其中云南会泽产多枝柴胡中的含量最高。结论研究所建立的方法适合不同品种柴胡中柴胡皂苷 a、c、d的定量分析 ,并且结果准确可靠。

生长调控因子与GHRP-6微球的制备及对水貂生长的影响

以乳酸-乙醇酸共聚物为载体,利用复乳-液中蒸发法制备pcDNA3-GRF微球、pIRES-HBs/AgSSM微球和GHRP-6微球。将空微球、pcDNA3-GRF微球(1 mg/kg),pIRES-HBs/AgSSM微球(1 mg/kg)和GHRP-6微球(1mg/kg)分别肌肉注射至水貂骨骼肌。120 d后,3个试验组水貂体长均高于空微球组(P<0.01);采用RIA法测定各组水貂血清IGF-Ⅰ浓度,3个试验组水貂血清IGF-Ⅰ浓度均比空微球组高,但pcDNA3-GRF微球组血清IGF-I浓度显著高于对照组(P<0.05)。结果表明:pcDNA3-GRF乳酸乙醇酸共聚物微球有明显的促水貂生长作用。

疏肝、健脾、疏肝健脾方对肝郁脾虚证模型大鼠消化系统的影响

目的:比较疏肝、健脾、疏肝健脾方对肝郁脾虚证模型大鼠消化系统的影响。方法:大鼠随机分为正常对照、肝郁脾虚证、柴胡疏肝散、四君子汤、柴疏四君汤5组,每组12只。后4组大鼠采用慢性束缚+过度疲劳+饮食失节法,连续4周造模,正常对照组不予处理,其中3个中药干预方组分别于造模第2周末,按10mL/kg给予相应方药灌胃,连续2周;模型组和正常对照组给予等量蒸馏水。于实验第29天,处杀各组大鼠,测定胃动素(MTL)、生长激素(SS)、胃蛋白酶、D-木糖排泄率、琥珀酸脱氢酶(SDH)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-PD)。结果:模型组大鼠血浆MTL、SS及胃蛋白酶均见显著升高(P<0.05),D-木糖排泄率显著降低(P<0.05),肝脏SDH、G-6-PD均见显著升高(P<0.05)。柴胡疏肝散、四君子汤、柴疏四君汤3组大鼠的血清MTL均呈显著性降低(P<0.05);柴胡疏肝散、柴疏四君汤二组大鼠血清SS均见不同程度降低,四君子汤组显著升高(P<0.05);柴胡疏肝散、四君子汤、柴疏四君汤3组大鼠的D-木糖排泄率均呈不同程度升高,其中柴疏四君汤组和四君子汤组均呈显著升高(P<0.05);柴胡疏肝散、四君子汤、柴疏四君汤3组大鼠的胃蛋白酶均呈不同程度降低,其中柴疏四君汤组显著降低(P<0.05)。柴胡疏肝散、四君子汤、柴疏四君汤3组大鼠SDH均呈显著性降低(P<0.05);柴胡疏肝散、四君子汤、柴疏四君汤3组大鼠G-6-PD均见不同程度升高,其中柴疏四君汤组呈显著性升高(P<0.05)。结论:肝郁脾虚证模型大鼠存在消化功能紊乱,柴胡疏肝散、四君子汤、柴疏四君汤对肝郁脾虚证模型的消化功能均有不同程度的改善作用,其中以柴疏四君汤的作用最佳。疏肝健脾方与肝郁脾虚证之间具有更高的关联性。

痛泻要方对腹泻型肠易激综合征大鼠胃肠激素的影响

目的:观察痛泻要方(TXYF)对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠模型组织和血浆中胰高血糖样素肽(GLP-1)、生长抑素(SS)、P物质(SP)含量的影响,探讨其调节相关胃肠激素水平的作用机制。方法:采用灌胃番泻叶及束缚应激建立D-IBS大鼠模型,实验设空白对照组、模型组、匹维溴铵组、TXYF高剂量组、TXYF中剂量组、TXYF低剂量组。经灌胃给药或给生理盐水后,检测粪便干湿重,组织和血浆中GLP-1、SS、SP含量。结果:TXYF各治疗组除TXYF低剂量组外,大鼠粪便含水量均明显减少;组织和血液中GLP-1、SS、SP水平明显下降。结论:痛泻要方能抑制D-IBS大鼠GLP-1、SS、SP的分泌,TXYF高剂量组效果优于匹维溴铵组,且GLP-1与SS、SP关系密切,可能在D-IBS的治疗中起着中心环节的作用。

全数字化超声波探伤成像仪研制

从成像原理、系统主要结构和技术特点分析、软件设计、扫查架和手动聚束斜探头几方面介绍了所研制的一种用于奥氏体钢焊缝超声检验的成像系统。该系统具有体积小、重量轻、功能强、适合于现场使用的特点，仪器实现了同一画面的Ａ型和Ｃ型同时实时显示，能进行包括３Ｄ显示的７种组合图象的计算机处理和打印。

地质构造三维重建算法研究

在综述三维重建算法的基础上提出了一种体素赋值重建算法。该方法从原始地质地震测量中取得数据，然后建立片存储的数据结构，并以象素为体素建立重建模型及算法。同时，利用图象处理中的一系列技术，采用三维重建算法，并引进计算机图形学一些真实感三维图形的产生算法，通过一系列隐面消除、旋转变换、光照模型等处理产生具有真实感的立体三维图象，实现了利用人工地震数据进行地质构造三维重建任务。该方法为地质工作者提出了一幅清晰、直观、形象的地下油层和地质构造分布立体形态图象，为地质分析、地震探矿、油层储量分布与评估提供了一个方便的工具。

独特的微机正弦扫频振动控制技术

以通用微机为主控单元进行正弦扫频振动控制的独特之处在于驱动信号的生成、修正，响应信号的采样、分析以及系统传递函数计算等控制功能均主要由微机软件完成。本文主要介绍上述控制功能的软件设计原理，并给出相应的实验结果。

基于四阶累积量的直接序列扩频信号多参数估计

将高阶统计理论应用于直接序列扩频信号的参数估计,提出了一种基于四阶累积量2-D切片的方法,该 方法能够同时估计载波频率和扩频码周期。计算机仿真结果验证了该方法的有效性。

多塔悬索桥中间桥塔结构顺桥向弹性稳定简化分析方法

为解决多塔悬索桥中间桥塔顺桥向线弹性稳定性简化分析问题,以一座两主跨相等的三塔两跨悬索桥为背景,提出单主跨满布活载和两主跨满布活载2种极限加载工况下中间桥塔顺桥向弹性稳定简化分析方法。该方法将主缆结构对中间桥塔的约束作用等效为一对非线性弹簧,基于加载条件下缆索刚度的变化规律及梁的平衡微分方程,分析了单主跨满布活载和两主跨满布活载2种极限加载工况下中间桥塔的弹性稳定性问题,并将分析结果与有限元计算结果进行了对比。结果表明:多塔悬索桥中间桥塔结构在单主跨满布活载工况下,不会发生整体弹性屈曲失稳;两主跨满布活载工况下,稳定验算解析公式求得的稳定系数与有限元计算结果相差约7%,且偏于安全,能够满足初步设计和结构选型的要求。该方法具有一定的精度,适用于桥塔结构的结构选型和初步设计。

CPAP呼吸机、氨溴索治疗新生儿呼吸窘迫综合征的疗效分析

目的探讨CPAP呼吸机、氨溴索治疗新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的临床疗效。方法方便选取2013年8月—2016年7月于该院儿科住院部确诊NRDS的86例患儿纳入研究并随机分组,对照组42例患儿采用CPAP呼吸机治疗,观察组44例患儿则联合氨溴索静滴治疗,观察两组患儿临床疗效差异。结果经治疗,两组患儿氧分压(PaOP)较治疗前明显升高,吸氧浓度(FiO_2)、二氧化碳分压(PaCO_2)则降低,差异有统计学意义(P<0.05);组间比较显示,两组患儿治疗后24 h及48 h时PaO_2、FiO_2、PaCO_2水平差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患儿住院时间、氧疗时间均更短(P<0.05);对照组总有效率73.81%,观察组为93.19%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组并发症发生率6.82%,低于对照组的23.81%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CPAP呼吸机、氨溴索治疗RDS疗效显著,可提高临床疗效,更好地改善血气指标,且安全可靠,值得推广。

旋流分离器的分离性能X_(50)的一种数学模型

通过对旋流器基本分离性能进行研究,建立一种定性模型,并通过试验,确定相关系数,研究操作参数和结构参数与分离性能间的关系,建立分离性能X的数学模型。

HPLC法HILIC模式测定生长抑素中对映异构体D-Ala1-生长抑素的含量

目的:建立HILIC模式高效液相色谱法测定生长抑素中对映异构体(D-Ala1-生长抑素,生长抑素中1号位丙氨酸为D型结构)的含量。方法:采用Welch氨基柱,流动相为磷酸盐缓冲液(0.02 mol·L^(-1)磷酸二氢铵和0.03 mol·L^(-1)四丁基硫酸氢铵混合水溶液,用稀氨水调pH至3.0)-甲醇-异丙醇(275∶362.5∶362.5);流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为215 nm。结果:对映异构体在1.022~10.220μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9991),加样回收率为102.0%,RSD为1.5%。检测下限为0.103μg·mL^(-1),定量下限为0.320μg·mL^(-1),7批样品测定结果中对映异构体均未检出,稳定性考察时高温及光照检出了该对映异构体。结论:方法准确可靠、重现性好、精密度高,为其质量控制提供依据。