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Relationship between polymorphism of class Ⅱ transactivator gene promoters and chronic hepatitis B 被引量:2
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作者 Ying-RenZhao LingGong +2 位作者 Ying-LiHe FangLiu ChangLu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第6期854-857,共4页
AIM: To investigate the relationship between the polymorphism of class Ⅱ transactivator (CIITA) gene promoters and chronic hepatitis B (CHB). METHODS: Genomic DNA was prepared from peripheral blood leukocytes. Promot... AIM: To investigate the relationship between the polymorphism of class Ⅱ transactivator (CIITA) gene promoters and chronic hepatitis B (CHB). METHODS: Genomic DNA was prepared from peripheral blood leukocytes. Promoters Ⅰ,Ⅲ and Ⅳ of gene were analyzed respectively with polymerase chain reaction single strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) in 65 patients with CHB, 26 patients with acute hepatitis B (AHB) and 85 normal controls. RESULTS: No abnormal migration was found in PCR-SSCP analysis of the three promoters in the three groups. Also, no sequential difference was observed at the three promoters among the CHB patients, AHB patients and normal controls. CONCLUSION: No polymorphism in promoters I, III and IV of CIITA gene exists in CHB patients, ABH patients and normal controls, suggesting that the promoter of CIITA gene might be a conserved domain. 展开更多
关键词 Class transactivator gene promoter Hepatitis B
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小麦SBEⅡa、SSⅡa基因片段的克隆及VIGS重组载体的构建 被引量:2
2
作者 李淼淼 南富波 +1 位作者 刘伟 李卫华 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1961-1966,共6页
【目的】克隆小麦SBEⅡa、SSⅡa基因部分序列并构建二者的VIGS重组载体,为在小麦上利用VIGS技术研究SBEⅡa、SSⅡa基因与小麦淀粉合成的关系奠定基础。【方法】根据GenBank中公布的小麦SBEⅡa(AF286319.1)、SSⅡa(AF155217.2)基因序列... 【目的】克隆小麦SBEⅡa、SSⅡa基因部分序列并构建二者的VIGS重组载体,为在小麦上利用VIGS技术研究SBEⅡa、SSⅡa基因与小麦淀粉合成的关系奠定基础。【方法】根据GenBank中公布的小麦SBEⅡa(AF286319.1)、SSⅡa(AF155217.2)基因序列分别设计特异引物,利用RT-PCR技术克隆SBEⅡa、SSⅡa基因的特异片段。然后以BSMV:γ-PDS为原载体,通过酶切连接用SBEⅡa、SSⅡa基因片段分别将原载体中的PDS基因进行替换,从而构建BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体。【结果】克隆的SBEⅡa和SSⅡa基因片段长分别是178 bp和171 bp。序列分析表明:SBEⅡa基因片段与小麦SBEⅡa(AF286319.1)序列同源性为100%;、SSⅡa基因片段与SSⅡa(AF155217.2)序列同源性也为100%;酶切鉴定结果表明成功构建BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体。【结论】构建的BSMV:γ-SBEⅡa和BSMV:γ-SSⅡa重组载体将为下一步利用VIGS技术在小麦上研究SBEⅡa、SSⅡa基因与小麦淀粉合成的关系奠定基础。 展开更多
关键词 小麦 SBEⅱa ssⅱa VIGS载体
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小麦淀粉合成酶SSⅡa基因克隆及生物学分析 被引量:3
3
作者 韩俊杰 王昊龙 +2 位作者 李淼淼 南富波 李卫华 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期903-909,共7页
淀粉合成酶SSⅡa基因是小麦淀粉合成中的关键酶基因。为了从分子水平上了解造成不同小麦品种(系)淀粉含量差异的原因,本研究根据GeneBank中的SSⅡa基因序列AF155217.2设计引物,对8个不同抗性淀粉含量的小麦品种(系)SSⅡa基因进行克隆和... 淀粉合成酶SSⅡa基因是小麦淀粉合成中的关键酶基因。为了从分子水平上了解造成不同小麦品种(系)淀粉含量差异的原因,本研究根据GeneBank中的SSⅡa基因序列AF155217.2设计引物,对8个不同抗性淀粉含量的小麦品种(系)SSⅡa基因进行克隆和多态性分析,并对其氨基酸序列进行结构域预测。结果表明,8个品种的SSⅡa基因序列高度保守,与GeneBank中已发表的序列相似度达98.19%以上,共发现40个单核苷酸变异,导致20个氨基酸发生了变异。蛋白结构域分析发现这些变异位点均位于α-淀粉催化酶氨基N-末端外侧,而在α-淀粉催化酶的催化区域并未发现变异位点。另外,在新春12中,还发现了一个缺失位点,缺失片段为249bp,该缺失片段包含了糖基转移酶的部分位点。本研究为进一步从分子水平理解SSⅡa基因的结构与抗性淀粉含量之间的关系及开发分子标记辅助选择育种提供了序列信息。 展开更多
关键词 抗性淀粉 ssⅱa基因 多态性分析
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玉米淀粉合成酶SSⅡa启动子的克隆及功能分析
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作者 陈展宇 王阔 +2 位作者 王晓梅 刘相国 崔喜艳 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期15-22,共8页
【目的】克隆玉米Zea mays淀粉合成酶SSⅡa启动子,并分析其功能,为进一步研究和应用SSⅡa启动子奠定基础。【方法】通过NCBI上公布的玉米基因组序列,在网站Maize GDB上BLAST查找到SSⅡa 5'侧翼序列,利用PCR方法从玉米B73中克隆SSⅡ... 【目的】克隆玉米Zea mays淀粉合成酶SSⅡa启动子,并分析其功能,为进一步研究和应用SSⅡa启动子奠定基础。【方法】通过NCBI上公布的玉米基因组序列,在网站Maize GDB上BLAST查找到SSⅡa 5'侧翼序列,利用PCR方法从玉米B73中克隆SSⅡa启动子;通过Plant Care在线分析启动子顺式作用元件,用特异性引物分别克隆出长度为1 407、867、633、483和365 bp的片段,与植物表达载体p CAMBIA3301连接,构建5种5'缺失体的植物表达载体,命名为P1、P2、P3、P4和P5。用农杆菌介导法转化拟南芥Arabidopsis thaliana,获得转基因拟南芥。【结果】以玉米B73基因组DNA为模板,用特异性引物SSⅡa F/SSⅡaR进行扩增,得到2 526 bp序列;除草剂筛选的阳性拟南芥植株PCR验证均检测出gus基因;GUS组织化学分析表明,5种类型启动子构建的表达载体在成熟期叶片、果荚中均显蓝色;gus基因定量分析表明,成熟期5种转基因拟南芥叶片中,gus基因表达量P1最高,其他基本一致;种子中gus基因表达量P1和P2相近,且高于P3、P4和P5。【结论】成功克隆玉米SSⅡa启动子;构建的5种SSⅡa启动子缺失体表达载体在转基因拟南芥中均具有活性,长度为1 407 bp(P1)和867 bp(P2)的启动子具有胚乳特异性。 展开更多
关键词 玉米 淀粉合成酶 ssⅱa启动子 克隆 载体构建 功能分析
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小麦SSⅡ-A基因片段的克隆及其RNAi表达载体的构建 被引量:3
5
作者 张付芸 陈伟霞 +2 位作者 刘子渲 李保云 梁荣奇 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第7期50-54,共5页
可溶性淀粉合成酶Ⅱ(SSⅡ)是小麦籽粒支链淀粉合成的主要角色,但是其三个部分同源基因(SSⅡ-A、SSⅡ-B和SSⅡ-D)对支链淀粉合成的贡献大小目前还未见报道,探究它们对支链淀粉合成的作用,对小麦淀粉合成的遗传操纵和淀粉品质改良具有重... 可溶性淀粉合成酶Ⅱ(SSⅡ)是小麦籽粒支链淀粉合成的主要角色,但是其三个部分同源基因(SSⅡ-A、SSⅡ-B和SSⅡ-D)对支链淀粉合成的贡献大小目前还未见报道,探究它们对支链淀粉合成的作用,对小麦淀粉合成的遗传操纵和淀粉品质改良具有重要意义。此文通过RT-PCR方法克隆了小麦SSⅡ-A基因cDNA的部分序列(长度为539bp),经序列比对发现,它与AB201445.1(Triticum aestivumwSSII-A gene for starch synthase II-A,complete cds)的同源性为100%。以H质粒为中间载体,构建了SSⅡ-A基因片段的发夹结构,并将之连接到pBAC47P上高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)1Dx5启动子的下游,得到了高效特异的SSⅡ-A RNAi表达载体。这些工作为下一步遗传转化获得转基因植株以深入探究SSⅡ-A基因对支链淀粉合成的贡献大小奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 ss-A基因 RNAi表达载体
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玉米SSⅡb蛋白多克隆抗体的制备及其应用 被引量:1
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作者 余国武 青芸 +1 位作者 何珊 黄玉碧 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期259-264,共6页
抗体是蛋白质功能研究的重要试剂。玉米蛋白的功能研究因缺乏相应的抗体而难以开展。玉米淀粉合酶Ⅱb与淀粉合酶Ⅱa均属于淀粉合酶,其主要负责支链淀粉的延伸。但对淀粉合酶Ⅱb的报道较少,本研究以原核表达的淀粉合酶Ⅱb的C端(455~704 a... 抗体是蛋白质功能研究的重要试剂。玉米蛋白的功能研究因缺乏相应的抗体而难以开展。玉米淀粉合酶Ⅱb与淀粉合酶Ⅱa均属于淀粉合酶,其主要负责支链淀粉的延伸。但对淀粉合酶Ⅱb的报道较少,本研究以原核表达的淀粉合酶Ⅱb的C端(455~704 aa) GST融合蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔,分离血清制备SSⅡb多克隆抗体。Western blot试验发现, SSⅡb多克隆抗体不但能识别SSⅡb-C (455~704 aa)抗原,而且能识别玉米不同发育阶段胚乳中SSⅡb蛋白。利用该多克隆抗体的Western blot试验表明,玉米SSⅡb蛋白的表达在授粉后10 d到30 d的胚乳中表达模式是先增后降,授粉后15 d表达量最高,而半定量RT-PCR的结果表明授粉后20 d SSⅡb的转录水平最高。这些结果表明成功制备了特异的玉米SSⅡb的多克隆抗体,并能在Western blot中特异识别玉米内源SSⅡb蛋白,为进一步深入研究SSⅡb蛋白功能奠定基础。 展开更多
关键词 ssb 多克隆抗体 原核表达 Western blot
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SSY-Ⅱ石英伸缩仪与SS-Y伸缩仪的对比分析 被引量:5
7
作者 姜振海 史小平 《地震研究》 CSCD 北大核心 2010年第1期63-67,共5页
兰州十里店地震台于1985年安装了1台SSY-Ⅱ石英伸缩仪,于2006年又安装了1台SS-Y伸缩仪。对这两套仪器的主要构造部件——基线、换能系统、标定系统进行了对比分析,并从产出资料的趋势变化、调和分析、干扰、地震事件等方面进行了对比分... 兰州十里店地震台于1985年安装了1台SSY-Ⅱ石英伸缩仪,于2006年又安装了1台SS-Y伸缩仪。对这两套仪器的主要构造部件——基线、换能系统、标定系统进行了对比分析,并从产出资料的趋势变化、调和分析、干扰、地震事件等方面进行了对比分析,总结了这两套仪器各自的优缺点。 展开更多
关键词 ssY-石英伸缩仪 ss—Y伸缩仪 基线 换能器 标定 调和分析 干扰
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SS115—31.5Ⅱ减速器输入轴轴承箱内轴承轴向游隙的确定
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作者 纪贵军 《黑龙江电力》 CAS 2000年第B05期47-48,共2页
介绍了SS115-31.5Ⅱ型减速器输入轴轴承箱内轴承的安装结构,分析了影响轴承轴向游隙的原因,最后确定地轴承轴向的游隙。
关键词 减速器 轴承 游隙 ss115-31.5 输煤皮带机
全文增补中
用衔接头PCR克隆新的胡萝卜Ⅱ型转化酶基因启动子 被引量:19
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作者 王新国 肖成祖 +1 位作者 张国华 方荣祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期61-65,共5页
为克隆新的胡萝卜 型转化酶基因启动子 ,将胡萝卜基因组 DNA分别用 Pvu 、Eco R 、Dra 和 Sma 酶切 ,酶切片段与一特殊的衔接头连接 .取连接产物作模板 ,以衔接头引物和基因特异引物做 PCR,得到的主要 PCR产物分别为 3.4kb、1 .3kb、0 ... 为克隆新的胡萝卜 型转化酶基因启动子 ,将胡萝卜基因组 DNA分别用 Pvu 、Eco R 、Dra 和 Sma 酶切 ,酶切片段与一特殊的衔接头连接 .取连接产物作模板 ,以衔接头引物和基因特异引物做 PCR,得到的主要 PCR产物分别为 3.4kb、1 .3kb、0 .4kb和 0 .6kb.将 Eco R -衔接头体系的 PCR产物克隆和测序 ,并将其序列与 Gen Bank中的已知序列进行比较分析 ,发现了一个新的胡萝卜 型转化酶启动子序列 ,它含有类似于 TATA box和 CAAT box的元件 ,在启动子的远上游区域还含有多个 AT富含区 .该启动子的发现对于研究植物中糖代谢具有重要意义 . 展开更多
关键词 衔接头PCR 型转化酶 启动子 胡萝卜 糖代谢
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川芎嗪对血管紧张素Ⅱ诱导的人α_1(I)胶原基因启动子活性的影响 被引量:7
10
作者 张冬梅 秦英 +6 位作者 杨君 于海 牛福玲 朱陵群 王硕仁 姜良铎 周春华 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2005年第9期21-22,共2页
目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的调控作用和川芎嗪干预的影响环节。方法将2.5kb长度的人α1(I)胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)“报告基因”组成的重组体pCOLH2.5,采用脂质体法转染至培养的... 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的调控作用和川芎嗪干预的影响环节。方法将2.5kb长度的人α1(I)胶原基因启动子片段与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)“报告基因”组成的重组体pCOLH2.5,采用脂质体法转染至培养的大鼠心肌成纤维细胞,分别加入AngⅡ和川芎嗪,ELISA法测定CAT活性。结果AngⅡ可明显促进pCOLH2.5片段的启动活性,川芎嗪能抑制AngⅡ的促pCOLH2.5启动活性(P<0.05)。结论川芎嗪能在转录水平上阻断AngⅡ诱导的人α1(I)胶原基因启动子活性增加,从而抑制I型胶原的合成,阻滞和延缓心肌纤维化的发生发展。 展开更多
关键词 启动子 胶原 血管紧张素 川芎嗪
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GFP标记的植物促生菌B96-Ⅱ-gfp的定殖能力研究 被引量:12
11
作者 郝变青 马利平 乔雄梧 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期861-865,共5页
采用绿色荧光蛋白基因标记技术研究了植物促生菌B96-Ⅱ的标记菌B96-Ⅱ-gfp在盆栽黄瓜土壤中的时间、空间定殖动态以及在黄瓜植株上的分布。研究表明:B96-Ⅱ-gfp在土壤中具有持久的定殖能力,接种180d时在自然土和黄瓜枯萎菌病土中的定殖... 采用绿色荧光蛋白基因标记技术研究了植物促生菌B96-Ⅱ的标记菌B96-Ⅱ-gfp在盆栽黄瓜土壤中的时间、空间定殖动态以及在黄瓜植株上的分布。研究表明:B96-Ⅱ-gfp在土壤中具有持久的定殖能力,接种180d时在自然土和黄瓜枯萎菌病土中的定殖数量分别为2.7×104cfu·g-1和6.6×104cfu·g-1,360d时在土壤中仍可检测到B96-Ⅱ-gfp的存在。B96-Ⅱ-gfp可在盆栽植株生长土壤的表层(0~4cm)、中层(4~8cm)和底层(8~12cm)定殖,定殖数量随土壤深度的增加而增加。此外,B96-Ⅱ-gfp还可在黄瓜的根、茎和叶上定殖,根部定殖的数量(7.2×104cfu·g-1)显著高于茎部和叶部定殖的数量;黄瓜植株体内定殖的数量多于体表定殖的数量。对土壤中可培养的3大微生物类群影响的研究表明:B96-Ⅱ-gfp对土壤中真菌数量具有显著抑制作用,而对细菌和放线菌数量则没有明显影响。防病促生试验表明:B96-Ⅱ-gfp可增加黄瓜株高、鲜重和干重,对黄瓜枯萎病有一定的防治效果,且与未标记菌株B96-Ⅱ的防病促生作用无显著差异。 展开更多
关键词 植物促生菌 B96--gfp 绿色荧光蛋白 定殖 枯草芽孢杆菌 防病促生
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T7启动子具有真核生物聚合酶Ⅱ顺式作用因子的功能 被引量:3
12
作者 李月琴 朱嘉明 +3 位作者 李弘剑 谢卫兵 周天鸿 王彤歌 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2000年第5期455-461,共7页
根据a-鹅膏蕈碱(a-amanitin)对真核生物RNA聚合酶的选择性抑制,以氯霉素乙酰转 移酶基因(CAT)作为报道基因进行体内表达实验,证明T7噬菌体启动子可为真核生物RNA 聚合酶Ⅱ所启动。应用建立的竞争性DNA... 根据a-鹅膏蕈碱(a-amanitin)对真核生物RNA聚合酶的选择性抑制,以氯霉素乙酰转 移酶基因(CAT)作为报道基因进行体内表达实验,证明T7噬菌体启动子可为真核生物RNA 聚合酶Ⅱ所启动。应用建立的竞争性DNA-蛋白质凝胶泳动技术,分别以TATA框、CAAT 框、GC框和八核苷酸序列(octamer)为竞争性寡核苷酸分子,发现人工合成的T7启动子可能 与 TFⅡD起始转录因子结合,形成 DNA-核蛋白质结合物。将 TATA框和八核苷酸序列分别 接入T7启动子上游,CAT实验显示八核苷酸序列可以增强RNA聚合酶Ⅱ对T7启动子的转录 起始作用。实验结果表明T7启动子可作为RNA聚合酶Ⅱ的顺式作用因子。 展开更多
关键词 T7启动子 顺式作用因子 转录起始 真核生物POL
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人胰岛素样生长因子Ⅱ基因P1、P3启动子克隆及意义 被引量:5
13
作者 汤绍辉 杨冬华 +1 位作者 舒建昌 黄卫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1662-1666,共5页
目的 :人胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF -Ⅱ )基因P1、P3启动子的克隆。方法 :根据GenBank数据库提供的IGF -Ⅱ基因DNA全序列及有关文献 ,应用巢式PCR技术从L - 0 2正常人胎肝细胞系中扩增分离出P1、P3启动子片段 ,并采用TOPOTACloningkit将... 目的 :人胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF -Ⅱ )基因P1、P3启动子的克隆。方法 :根据GenBank数据库提供的IGF -Ⅱ基因DNA全序列及有关文献 ,应用巢式PCR技术从L - 0 2正常人胎肝细胞系中扩增分离出P1、P3启动子片段 ,并采用TOPOTACloningkit将PCR产物克隆入pCR2 .1-TOPOT载体。结果 :经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定 ,克隆的IGF -Ⅱ基因P1、P3启动子片段碱基序列与GenBank数据库一致。结论 :成功克隆了IGF -II基因P1、P3启动子。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子 基因 启动子区(遗传学) 克隆 分子
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生长抑素(SS)与硫氧还原蛋白(Thioredoxin)相融合生成的2种基因工程化融合蛋白SS-N/X和SS-N/S的表达特性 被引量:1
14
作者 刘永庆 陈溥言 +1 位作者 杜念兴 赵国屏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期172-176,共5页
对基因工程化生长抑素 (som atostatin,SS) -硫氧还原蛋白 (Thioredoxin)融合蛋白 SS- N/ X和 SS- N/ S的表达产量、水溶性、Triton X- 10 0对 SS融合蛋白水溶性的影响、包涵体的溶解和复性特点以及 SS的抗原性与免疫原性等特性进行了... 对基因工程化生长抑素 (som atostatin,SS) -硫氧还原蛋白 (Thioredoxin)融合蛋白 SS- N/ X和 SS- N/ S的表达产量、水溶性、Triton X- 10 0对 SS融合蛋白水溶性的影响、包涵体的溶解和复性特点以及 SS的抗原性与免疫原性等特性进行了研究。结果显示 ,在 30℃的低温下用 IPTG诱导表达 ,SS- N/ X融合蛋白主要以可溶性形式存在 ,占 75 .8% ,包涵体仅占 2 4 .2 % ;而 SS- N/ S融合蛋白则主要以包涵体的形式存在 ,占 81.1% ,可溶性蛋白仅占 18.9% ;32 C载体(p ET- 32 C)蛋白则居二者之间 ,可溶性蛋白与包涵体大约等比例出现。SS- N/ S在低温下诱导可超量表达 SS融合蛋白 ,其表达量约占菌体总蛋白的 4 0 .94 %。 0 .5 % Triton X- 10 0对融合蛋白的水溶性有非常显著的影响 ,几乎可使所有的 SS- N/ X融合蛋白和大部分 SS- N/ S融合蛋白及 32 C硫氧还原蛋白变成水溶性的。 32 C硫氧还原蛋白包涵体在尿素中的溶解度明显高于 SS- N/ S包涵体 ,2 mol/ L尿素可使近一半的 32 C硫氧还原蛋白包涵体溶解 ,而 SS- N/ S包涵体只有 2 7.5 %溶解 ;但在 5 mol/ L 尿素时 ,两者均可基本全部变为可溶性的。在 SS融合蛋白包涵体溶解时加入还原剂二硫苏糖醇 ,可明显降低 SS的抗原性。 SS融合蛋白 展开更多
关键词 硫氧还原蛋白 基因工程化融合蛋白 生长抑素 ss 基因工程疫苗 抗原性 免疫原性
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RNA聚合酶Ⅱ启动子调控RNA干扰在肿瘤治疗中的应用前景 被引量:2
15
作者 陈青 潘秋卫 +1 位作者 蔡荣 钱程 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第8期806-815,共10页
RNA干扰是双链RNA介导的特异性转录后基因表达沉默现象.由于双链小干扰RNA介导的RNA干扰技术设计简便、作用迅速、效果明显,目前已被广泛应用于基因功能和重大疾病治疗的研究,尤其为肿瘤治疗提供了一条新途径.利用RNA干扰技术通过调节... RNA干扰是双链RNA介导的特异性转录后基因表达沉默现象.由于双链小干扰RNA介导的RNA干扰技术设计简便、作用迅速、效果明显,目前已被广泛应用于基因功能和重大疾病治疗的研究,尤其为肿瘤治疗提供了一条新途径.利用RNA干扰技术通过调节肿瘤发生发展相关基因的表达可制定出一系列有效的抗癌策略.然而在现行大多数策略中往往采用不可调控的RNA聚合酶Ⅲ启动子(H1,U6)表达经典的发夹结构RNA,经由Dicer酶切割成功能性siRNA,因此缺乏组织细胞靶向性和抗癌效率.最新研究表明,采用RNA聚合酶Ⅱ启动子可弥补由RNA聚合酶Ⅲ启动子调控RNA干扰缺陷和不足.此外,运用病毒载体特别是具有靶向和溶瘤效应的肿瘤特异性复制腺病毒,介导RNA聚合酶Ⅱ启动子调控表达siRNA有望成为更有效的治疗手段. 展开更多
关键词 RNA干扰 RNA聚合酶启动子 肿瘤治疗
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人肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ基因P2,P4启动子克隆及序列分析 被引量:2
16
作者 汤绍辉 杨冬华 +1 位作者 黄卫 舒建昌 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1635-1637,共3页
目的克隆人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P2,P4启动子并进行序列分析,以明确肝癌组织中IGF-Ⅱ启动子碱基序列有无改变及其与转录调控的关系,为后续研究奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的IGF-Ⅱ基因全序列及有关文献,应用巢式PCR... 目的克隆人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P2,P4启动子并进行序列分析,以明确肝癌组织中IGF-Ⅱ启动子碱基序列有无改变及其与转录调控的关系,为后续研究奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的IGF-Ⅱ基因全序列及有关文献,应用巢式PCR扩增L-02人胎肝细胞系(正常对照)及8例肝癌组织的IGF-ⅡP2,P4启动子,并采用TOPO TA Cloning kit将PCR产物克隆入pCR2.1-TOPO T载体。目的DNA片段和阳性重组子分别通过琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定。结果①L-02细胞及8例肝癌组织P2,P4启动子均扩增成功,长度分别为684 bp及1 246 bp;②8例肝癌组织P2,P4启动子碱基序列与L-02相应的DNA序列完全相同,未见突变、缺失等改变,经与GenBank数据库比较,结果完全一致。结论①成功克隆了IGF-ⅡP2,P4启动子;②本组肝癌组织中IGF-ⅡP2,P4启动子序列稳定,未见突变、缺失等改变,可能与IGF-Ⅱ异常表达的转录调控机制无关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 胰岛素样生长因子 启动子 克隆 序列分析
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胃癌组织中鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ、神经纤毛蛋白2的表达变化及其意义 被引量:5
17
作者 王凯 连海峰 +2 位作者 牛琼 贾兴芳 刘成霞 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第31期8-11,共4页
目的观察胃癌组织中鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)和神经纤毛蛋白2(NRP2)的表达变化,并分析COUP-TFⅡ、NRP2表达与胃癌临床病理参数的关系。方法收集手术切除的新鲜胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织各60例,采用Western blot... 目的观察胃癌组织中鸡卵清蛋白上游启动子转录因子Ⅱ(COUP-TFⅡ)和神经纤毛蛋白2(NRP2)的表达变化,并分析COUP-TFⅡ、NRP2表达与胃癌临床病理参数的关系。方法收集手术切除的新鲜胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织各60例,采用Western blotting法和免疫组化法检测胃癌组织及正常胃黏膜组织中的COUPTFⅡ、NRP2,分析COUP-TFⅡ、NRP2表达与胃癌临床病理参数的关系。结果胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率分别为70.0%、78.3%,正常胃黏膜组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率分别为30.0%、21.7%。胃癌组织、正常胃黏膜组织中COUP-TFⅡ相对表达量分别为0.84±0.22、0.68±0.34,NRP2相对表达量分别为0.86±0.17、0.58±0.22,胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2相对表达量均高于正常胃黏膜组织(P均<0.05)。胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2表达呈正相关关系(r=0.263,P<0.05)。浸润深度为T_3、T_4的胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于浸润深度T_1、T_2的胃癌组织(P均<0.05);中低分化胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于高分化胃癌组织(P均<0.05);有淋巴结转移的胃癌组织中COUP-TFⅡ、NRP2阳性表达率高于无淋巴结转移的胃癌组织(P均<0.05)。结论 COUP-TFⅡ、NRP2在胃癌组织中高表达,并与胃癌的浸润深度、分化程度及淋巴结转移有关,二者可能协同参与了胃癌的发生和发展。 展开更多
关键词 胃肿瘤 胃癌 鸡卵清蛋白基因 鸡卵清蛋白上游启动子转录因子 神经纤毛蛋白2
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人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ基因P3,P4启动子表达及其与p53基因突变的关系 被引量:2
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作者 陈潮文 刘序友 +1 位作者 杨冬华 汤绍辉 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1894-1896,共3页
目的探讨人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P3,P4启动子表达及其与p53基因突变的关系。方法应用半定量RT-PCR、PCR、直接测序分别检测7例正常成人肝组织、23例乙型肝炎病毒阳性肝癌组织IGF-Ⅱ基因P3,P4启动子特异的转录子表达及... 目的探讨人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P3,P4启动子表达及其与p53基因突变的关系。方法应用半定量RT-PCR、PCR、直接测序分别检测7例正常成人肝组织、23例乙型肝炎病毒阳性肝癌组织IGF-Ⅱ基因P3,P4启动子特异的转录子表达及p53基因突变状况。结果①绝大多数肝癌组织P3和P4mRNA表达量显著上调,平均值均明显高于正常成人肝组织(P<0.01);②肝癌组织p53基因的突变率为30.4%(7/23)。③23例肝癌组织中,具有p53基因突变的标本P3,P4mRNA表达水平分别明显高于无p53基因突变的肝癌组织(P<0.05)。结论①IGF-Ⅱ基因P3和P4再激活是大多数乙型肝炎病毒阳性肝癌的重要特征;②肝癌组织P3,P4mRNA显著上调与p53基因突变密切相关,后者可能是P3,P4再激活的转录调控机制之一。 展开更多
关键词 肝肿瘤 胰岛素样生长因子 P53 基因 启动子 转录子
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基于序列和结构特征分析植物TATA和TATA-less启动子 被引量:5
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作者 左永春 李前忠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第7期863-871,共9页
分析启动子区域内调控元件是阐明基因转录起始机制的重要前提.利用从PlanPromDB数据库下载的植物Pol-ⅡTATA和TATA-less启动子数据,深入分析了两类启动子GC偏好、位点结构保守性、序列碱基组分、保守模体分布、TATAbox位点分布及关联位... 分析启动子区域内调控元件是阐明基因转录起始机制的重要前提.利用从PlanPromDB数据库下载的植物Pol-ⅡTATA和TATA-less启动子数据,深入分析了两类启动子GC偏好、位点结构保守性、序列碱基组分、保守模体分布、TATAbox位点分布及关联位点保守性等特点,统计出两类植物启动子许多特有的序列组分和结构规律,这些规律对进一步揭示植物Pol-Ⅱ启动子的转录调控机制有一定的帮助.通过构建能够同时考虑位点保守性和关联性的位点关联性权重矩阵扫描模型(PCWM),利用相应打分函数(Score)对两类启动子进行区分,得到了较好结果,说明PCWM的预测性能要优于单碱基的位点权重矩阵(PWM). 展开更多
关键词 植物Pol-启动子 序列组成偏好特征 TATA和TATA-less启动子 保守模体 位点关联权重矩阵(PCWM)
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IGF-Ⅱ基因启动子低甲基化状态与肝细胞癌变关系的研究 被引量:3
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作者 沈预程 姚登福 +3 位作者 邱历伟 赛文莉 吴玮 吴信华 《交通医学》 2009年第1期1-4,8,共5页
目的:动态观察肝细胞癌变过程中胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)表达及其DNA启动子2(P2)甲基化状态。方法:以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲雄性SD大鼠诱发肝细胞癌,分别观察肝细胞形态学(HE染色)改变、肝及血IGF-Ⅱ动态变化;应用亚硫酸氢钠修饰... 目的:动态观察肝细胞癌变过程中胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)表达及其DNA启动子2(P2)甲基化状态。方法:以2-乙酰氨基芴(2-FAA)喂饲雄性SD大鼠诱发肝细胞癌,分别观察肝细胞形态学(HE染色)改变、肝及血IGF-Ⅱ动态变化;应用亚硫酸氢钠修饰基因组DNA,以甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)扩增分析启动子的甲基化状态。结果:肝细胞在诱癌后从颗粒样变性、不典型增生到高分化肝细胞癌形成过程中,肝和血中IGF-Ⅱ表达呈梯度增加,差异有统计学意义(F=13.2,P<0.01)。正常鼠、肝细胞变性鼠、癌前病变鼠和肝细胞癌变鼠肝IGF-Ⅱ基因P2低甲基化率分别为0%、27.8%、88.9%和100%,肝细胞癌变过程中肝IGF-Ⅱ基因P2逐步去甲基化,各组间差异有统计学意义(χ2=28.414,P<0.001),且与肝或外周血IGF-Ⅱ的异常表达呈明显正相关。结论:IGF-Ⅱ基因启动子逐步低甲基化改变与肝细胞的恶性转化关系密切。 展开更多
关键词 肝细胞癌 胰岛素样生长因子- 启动子 甲基化
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