利用酵母重组SSB抗原建立间接ELISA法检测抗SSB抗体的初步研究

目的:利用纯化的酵母重组SSB抗原建立间接ELISA法,用于检测抗SSB抗体。方法:将毕赤酵母菌重组表达的SSB抗原包被于聚苯乙烯微量反应板,与待检血清中抗SSB抗体反应后,经洗涤,再加入辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG与之结合,然后用TMB作用显色。结果:本法的敏感性和特异性分别为93.33%和100%,与欧蒙斑点酶免疫法检测结果之间的符合率为94.87%。结论:本法敏感性和特异性均较高,具有很好的临床诊断应用前景。

免疫亲和层析在纯化可提取性核抗原SSB/La中的应用

生化提纯高纯度有生物活性的蛋白质一直是一项艰巨的工作.主要综述了免疫亲和层析的纯化特点,以及用此方法在分离纯化具有临床诊断价值的可提取性核抗原SSB La中的有效应用.

分析HLA-DQA1基因与干燥综合征患者临床特征的相关性

目的 探讨人类白细胞抗原DQA1(human leucocyte antigen-DQA1,HLA-DQA1)与干燥综合征(Sjögren’s syndrome,SS)患者临床特征的相关性。方法 选取2022年8月至2023年8月包头医学院第一附属医院收治的242例SS患者为研究对象,根据HLA-DQA1检测结果,将患者分为HLA-DQA1阳性组(n=147)和HLA-DQA1阴性组(n=95)。比较两组患者的临床表现、实验室指标、唇腺活检和疾病活动度。采用受试者操作特征曲线分析HLA-DQA1对SS患者疾病活动度的诊断价值。结果 HLA-DQA1阳性组患者的口干、眼干、紫癜占比和抗干燥综合征A抗体(anti-Sjögren’s syndrome A antibody,抗SSA抗体)、抗干燥综合征B抗体(anti-Sjögren syndrome’s B antibody,抗SSB抗体)、抗核抗体(antinuclearantibody,ANA)阳性占比及免疫球蛋白G水平均显著高于HLA-DQA1阴性组(P<0.05),血红蛋白水平显著低于HLA-DQA1阴性组(P<0.05);HLA-DQA1阳性组患者的疾病活动度显著高于HLA-DQA1阴性组(P<0.05)。HLA-DQA1、抗SSA抗体、抗SSB抗体判断SS患者疾病活动度的曲线下面积分别为0.593、0.534、0.593。三者联合判断SS患者疾病活动度的曲线下面积为0.638。结论 HLA-DQA1与SS患者的疾病活动度相关,在HLA-DQA1阳性患者中,口干、眼干、高球蛋白血症、贫血和紫癜等症状更明显,同时,抗SSA/SSB抗体和ANA阳性率较高,提示HLA-DQA1表达有助于判断SS患者的病情。

自身抗原SSB/La抗原优势表位分析

目的 :探讨自身抗原La的抗原优势表位 ,为疾病机制的研究提供依据。方法 :根据计算机软件进行的蛋白质序列结构分析 ,采用PCR法克隆自身抗原La多肽片段的cDNA ,定向插入表达载体PGEX 2T ,并且导入大肠杆菌中表达重组融合蛋白 ,用GST亲合层析柱进行纯化 ,经免疫印迹法与患者阳性血清进行反应。结果 :SSB/La的抗原优势表位主要存在于1～ 2 8,80～ 10 7,10 8～ 188,2 83～ 338位。不同病人在不同病程的La优势表位有所不同。结论 :抗原驱动机制在自身免疫疾病的发病中起重要作用 。