ST8SIA3在胶质瘤细胞替莫唑胺耐药性的作用

目的探讨ST8α-乙酰神经氨酸酶α-2,8-唾液酸转移酶3(ST8SIA3)对胶质瘤产生耐替莫唑胺(Temozolomide,TMZ)特性的影响。方法将胶质母细胞瘤细胞株U87-MG进行慢病毒转染,分为对照组、下调组(ST8SIA3表达下调)、过表达组(ST8SIA3过表达),使用qRT-PCR检测3组ST8SIA3相对表达,通过Western-blot检测3组A2B5表达与O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferese,MGMT)表达。采用不同TMZ浓度(0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L)与3组细胞培养48h后,使用CCK-8检测并绘制TMZ浓度-细胞生存率曲线。通过单细胞成球实验观察下调组和过表达组ST8SIA3对胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSC)自我更新能力及干细胞标志物(CD133、SOX2)的影响。采用TCGA及CGGA数据库的人脑胶质瘤临床数据,分析ST8SIA3表达与患者预后关系。裸鼠种瘤后记录裸鼠出现恶病质的时间并进行生存分析统计,免疫组织化学方法检测裸鼠原位移植瘤标本MGMT和A2B5表达。结果过表达组A2B5和MGMT相对表达增加。CCK-8实验结果显示:随着ST8SIA3表达增加,TMZ的LC_(50)(半致死浓度)逐渐升高。单细胞成球实验显示:随着ST8SIA3表达增高,成球细胞数量及体积逐渐增加。裸鼠原位移植瘤模型结果显示:过表达ST8SIA3明显缩短裸鼠生存期;随着ST8SIA3表达增加,Ki-67、A2B5、MGMT表达随之增加。结论ST8SIA3通过合成干细胞标志物A2B5从而促进U87-MG细胞成球能力,进而表现出GSC耐TMZ特性。

长链非编码RNA MEG3等在肺癌组织中的表达

目的探讨长链非编码RNA MEG3、ST8SIA3和TUG1在肺癌中的表达。方法选择47例肺癌患者的癌组织和癌旁正常组织,利用TRIzol提取总RNA,SYBR Green实时荧光定量PCR检测MEG3、ST8SIA3和TUG1 RNA的相对表达量。结果 MEG3和TUG1在癌组织中经对数转换后的相对表达量分别为4.74±2.31和12.90±1.36,均低于癌旁正常组织(分别为6.89±2.19和13.68±1.39),差异有统计学意义(P<0.05);ST8SIA3在癌组织中经对数转换后的相对表达量为13.12±1.55,与癌旁正常组织(13.61±1.72)的差异无统计学意义。Spearman等级相关显示,肺癌组织中ST8SIA3、TUG1的相对表达量与TOPOⅡ呈负相关(分别为r=-0.47,P=0.00;r=-0.42,P=0.01),ST8SIA3的相对表达量与TNM分期呈正相关(r=0.29,P=0.04);未发现其他指标间呈相关性。结论 MEG3、TUG1在癌组织中的相对表达量均降低,提示可能在肺癌的发生发展中起到抑癌因子的作用。