STOML-2过表达抑制人宫颈鳞癌Siha细胞凋亡

目的研究STOML-2过表达抑制人宫颈鳞癌Siha细胞凋亡的机制,以期为宫颈癌的治疗开辟新的路径。方法用携带STOML-2基因的腺病毒感染Siha细胞作为过表达组,同时设立空白载体组及空白组作为对照,72 h后用Western blot检测STOML-2的过表达,并用MTT法检测STOML-2过表达对细胞增殖的影响。用IC50的顺铂处理各组细胞24 h后,利用荧光显微镜观察STOML-2过表达对细胞凋亡的影响,并利用流式细胞仪进一步分析细胞的凋亡率;采用Western blot检测线粒体凋亡途径相关蛋白caspase3、cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax以及线粒体内外细胞色素C(Cyt C)表达量的变化。结果与空白组及空白载体组相比,Western blot结果显示过表达组STOML-2的表达量明显增加;MTT结果显示,STOML-2过表达后可明显促进Siha细胞的增殖。用IC50的顺铂处理细胞24 h后,荧光显微镜下,空白载体组凋亡细胞的细胞核大小不一,浓染致密的蓝色荧光显示核固缩,部分核裂解为凋亡小体,而过表达组细胞核多较完整,着色较浅,染色质密度均匀一致,并且流式细胞仪结果同样提示STOML-2过表达后细胞凋亡率明显降低。Western blot结果显示过表达组线粒体凋亡途径相关蛋白cleaved-caspase3、Bax以及线粒体外Cyt C表达水平降低,而caspase3、Bcl-2及线粒体内Cyt C的表达水平则相应升高。结论 STOML-2过表达可以促进Siha细胞增殖,其抑制凋亡的机制可能与线粒体凋亡途径相关。