氧化苦参碱诱导结肠癌细胞株SW1116凋亡的实验研究

目的:探讨氧化苦参碱(OM)抗肿瘤的作用机制,为OM在抗结肠癌方面的应用提供理论依据。方法:采用流式细胞仪检测不同浓度的OM对结肠癌细胞凋亡率及其细胞周期分布的影响。结果:OM具有一定的诱导结肠癌细胞凋亡的作用,可使S期细胞数目减少,随着OM剂量的加大,结肠癌细胞凋亡率增高,与剂量呈正相关。随药物浓度及作用时间的变化,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高。结论:OM具有一定的抗结肠癌作用,其机制与抑制癌细胞的增殖及促进癌细胞的凋亡有关。

β－胡萝卜素对人大肠癌细胞株SW1116增殖和核DNA含量的影响

不同剂量（１０－５ｍｏｌ／Ｌ、１０－６ｍｏｌ／Ｌ和１０－７ｍｏｌ／Ｌ）β－胡萝卜素对体外人大肠癌细胞株ＳＷ１１１６增殖显示明显的抑制作用，癌细胞核ＤＮＡ含量明显减少、分布改变。此作用不仅由于β－胡萝卜素的ＶｉｔＡ活性，也由于其自身活性，其作用机制可能表现为抗氧化、抑制癌基因表达、损伤核结构等。

体内连续筛选法建立人结肠癌肝转移阶梯细胞模型

目的:通过在裸鼠体内进行SW1116结肠癌细胞株原位种植肝转移连续筛选,建立人结肠癌肝转移阶梯细胞模型系统,为研究结肠癌转移的分子机制提供实验模型。方法:将SW1116细胞株在裸鼠皮下连续5次传代后,取皮下种植瘤在裸鼠结肠进行原位种植,继而取肝脏转移灶进行下一代裸鼠结肠原位种植,经3次结肠原位种植肝转移筛选,建立大肠癌肝转移阶梯细胞模型。用免疫组化法验证种植瘤及转移灶的组织来源,并行同期体内外侵袭实验,检测经体内连续筛选出的癌细胞侵袭转移能力变化。结果:经5代皮下连续传代及3代结肠至肝的体内转移筛选,成功建立了第三代结肠癌肝转移筛选细胞系(CRCLM3)。裸鼠种植瘤及转移灶均表达人癌胚抗原,而同期体内外侵袭试验结果显示,经体内筛选得到的结肠癌细胞株转移能力逐渐加强。结论:经体内连续肝转移筛选所建立的结肠癌细胞系侵袭转移能力增强,而CRCLM3细胞系是研究结肠癌肝转移机制的理想细胞模型。

野生型p53基因重组质粒的构建及其体外抑瘤作用

重组体，用电穿孔方法将其导入有ｐ５３基因突变的人肠癌ＳＷ１１１６细胞，通过标记基因ＮｅｏＲ筛选带外源ｐ５３基因的Ｇ４１８抗药性克隆，以观察抗药性克隆数量，同时对Ｇ４１８抗药性细胞的生长速度及细胞增殖周期进行观察，结果表明：导入ＷＴ—ｐ５３基因能使肠癌ＳＷ１１１６细胞的Ｇ４１８抗药性克隆形成减少，细胞生长速度较对照细胞明显减慢，细胞增殖周期Ｇ１期增加、Ｓ期下降。这些结果证明人野生型ｐ５３基因能抑制肠癌细胞的生长。本研究为大肠癌ＷＴ—ｐ５３实验性基因治疗提供了理论依据，说明基于恢复ｐ５３肿瘤抑制基因功能的基因治疗在治疗结直肠癌方面有着广阔的应用前景。

奥沙利铂对结肠癌细胞XIAP表达及凋亡的影响

目的研究奥沙利铂对人结肠癌细胞株SW1116中XIAP表达及凋亡的影响,探讨其诱导凋亡的作用机制。方法应用流式细胞仪检测XIAP表达及凋亡的情况。结果奥沙利铂对XIAP表达有明显的抑制作用(P<0.05),凋亡率明显高于对照组(P<0.01)。结论奥沙利铂具有抑制结肠癌细胞株SW1116中XIAP表达,诱导结肠癌细胞凋亡作用,其机制与抗凋亡相关基因表达减弱有关。

野生型P53基因对人肠癌细胞株的抑瘤效应

为了探讨野生型P53基因对人肠癌细胞株的抑瘤效应。用电穿孔方法将正向携带有野生型P53基因cDNA全长的反转录病毒重组质粒(Dol p53)导入有P53基因突变的人肠癌SW1116细胞,通过标记基因NeoR筛选带外源P53基因的G418抗药性克隆,以观察抗药性克隆数量,同时对G418抗性细胞的生长速度及细胞增殖周期等方面进行观察,结果表明:导入WT-P53基因能使肠癌SW1116细胞的G418抗药性克隆形成减少,细胞生长速度较对照细胞明显减慢,细胞增殖周期G1期增加、S期下降。结果证明人野生型P53基因对肠癌细胞有明确的抑瘤效应,说明基于恢复P53肿瘤抑制基因功能的基因治疗在治疗结直肠癌方面有广阔应用前景。