Inhibitory Effects of Different Extractions of Salvia deserta Schang on Human Aldose Reductase

[Objectives] To explore whether there are natural substances that inhibit human aldose reductase in different extracts of Salvia deserta Schang.[Methods] The inhibitory activities of human aldose reductase from 28 extracts were screened.[Results] The methanol extract of roots of Salvia deserta Schang had the strongest inhibitory effect on human aldose reductase.[Conclusions] It was confirmed that Salvia deserta Schang has inhibitory effect on human aldose reductase.

Inhibition Effects of Salvianolic Acid M and Rosmarinic Acid in Salvia deserta Schang on Human Aldose Reductase

[Objectives]This study aimed to investigate the inhibition effects of two chemical constituents in Salvia deserta Schang on human aldose reductase( AR). [Methods]The isolated salvianolic acid M and rosmarinic acid were prepared into different concentrations of solutions for in vitro enzyme kinetics experiments. [Results]Salvianolic acid M and rosmarinic acid had the strongest inhibition effects at the concentration of 1 g/L. [Conclusions]Salvianolic acid M and rosmarinic acid have inhibition effects on human aldose reductase. The IC50 of salvianolic acid M is 0. 79 μg/mL,and that of rosmarinic acid is 1. 13 μg/mL.

基于UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS技术分析新疆鼠尾草乙酸乙酯提取物化学成分及入血成分

目的采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS)技术分析新疆鼠尾草乙酸乙酯提取物(Ethyl acetate extraction of Salvia deserta Schang,SDS-EE)的化学成分及入血成分。方法新疆鼠尾草根加20倍量95%乙醇,85℃回流提取3次,每次2.5 h,浓缩得醇提浸膏,加水混悬后,再加等比例的乙酸乙酯萃取5次即得SDS-EE。取SD大鼠12只,随机分成空白组和给药组,每组6只。给药组灌胃给予SDS-EE溶液160 mg·kg^(-1)·d^(-1),空白组灌胃给予相同体积0.5%CMC-Na溶液,连续给药20 d。采用三氯化铁诱导建立SD大鼠血栓模型,腹主动脉取血并收集血清样品。采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸乙腈溶液(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,进样量5μL,采用UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS技术,利用Orbitrap Exploris 120质谱,在正、负离子两种模式下获取SDS-EE和血清样品中化合物的相对分子质量、二级质谱裂解碎片离子信息和保留时间,结合相关文献、对照品比对和数据库信息,分析鉴定SDS-EE和吸收入血的化学成分。结果从SDS-EE中共鉴定出52个化合物,包括7个苯丙素类、3个香豆素类、12个萜类、7个酚酸类、3个醌类、5个醛类、5个黄酮类、9个有机酸类和1个其它类。鉴定出入血成分11个,其中9个为原型成分,2个是代谢产物,其主要代谢途径为氧化反应。结论通过UPLC-QE-Orbitrap-MS/MS技术快速分析了新疆鼠尾草SES-EE的化学成分及入血成分。

新疆鼠尾草和丹参对高温干旱胁迫的生理响应

为探究新疆鼠尾草(Salvia deserta Schang)和丹参(S.miltiorrhiza Bunge)对高温干旱胁迫的耐受性,设置常温(昼温27℃、夜温19℃)和高温(昼温42℃、夜温32℃)2个温度水平以及正常状态、中度干旱和重度干旱(土壤相对含水量分别为40%~45%、20%~25%和5%~10%)3个土壤含水量水平,对高温和干旱单一及复合胁迫下2种植物的受害指数、光合生理指标和抗逆生理生化指标的变化进行了比较。结果显示:随着胁迫时间延长,不同胁迫条件下2种植物的受害指数逐渐升高,总体来看,光合生理指标持续下降,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性先升高后降低,丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro)含量持续升高。与对照(昼温27℃、夜温19℃、土壤相对含水量40%~45%)相比,不同胁迫条件下2种植物的受害指数基本上显著(p<0.05)升高,多数光合生理指标显著降低,而多数抗逆生理生化指标则总体上显著升高。胁迫6 d,重度干旱单一胁迫(昼温27℃、夜温19℃、土壤相对含水量5%~10%)和重度复合胁迫(昼温42℃、夜温32℃、土壤相对含水量5%~10%)下2种植物的受害指数均显著高于其他胁迫条件,净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、总叶绿素含量和叶绿素a含量与叶绿素b含量的比值(Chl a/b)总体上显著低于其他胁迫条件;重度复合胁迫下2种植物的SOD活性、MDA含量和Pro含量总体上显著高于其他胁迫条件。比较来看,不同胁迫条件下丹参的受害指数、胞间CO 2浓度、总叶绿素含量、MDA含量和Pro含量总体上低于新疆鼠尾草,净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、Chl a/b值、SOD活性、POD活性、CAT活性和可溶性蛋白质含量总体上高于新疆鼠尾草。研究表明:新疆鼠尾草和丹参对高温干旱胁迫具有较强的耐受性,且丹参的耐受性更强。

新疆鼠尾草茎化学成分的研究

目的 :研究新疆鼠尾草茎的化学成分。 方法 :采用色谱法分离化合物 ,用波谱和化学方法鉴定结构。结果 :从新疆鼠尾草茎中分离得到 5个化合物 :β 谷甾醇 (Ⅰ )、齐墩果酸 (Ⅱ )、7 O acetyl horminone(Ⅲ )、β 谷甾醇葡萄糖苷 (Ⅳ )、丹酚酸K(Ⅴ )。 结论 :除 β 谷甾醇、齐墩果酸、丹酚酸K外 ,其余均为从本属植物的地上部分中首次得到。

紫外分光光度法测定新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮的含量

目的 :测定新疆鼠尾草中 6 ,7 去氢罗列酮的含量。方法 :采用薄层分离紫外分光光度法测定。结果 :6 ,7 去氢罗列酮的含量为 0 .37% ,RSD为 2 .6 % ,平均回收率为 98.3%。结论 :本方法简单 。

新疆鼠尾草的化学成分研究

从新疆鼠尾草 (Salvia deserta Schang)根中分离得到 8个单体成分 ,根据化学和光谱方法鉴定为 :正三十三烷 (Tritriacontane) [ ]、6 ,7-去氢罗列酮 (6 ,7- Dehydroroyleanone) [ ]、7,β-羟基罗列酮 (Tax-ochinon) [ ]、二十六烷酸 (Hexaconsanoic acid) [ ]、3-乙酰齐墩果酸 (3- Acetoxy- oleanolic acid) [ ]、β-谷甾醇 (β- Sitosterol) [ ]、熊果酸 (U rsolic acid) [ ]、D-甘露醇 (Mannitolum) [ ]。

新疆鼠尾草中总酚酸类成分的提取工艺研究

目的确立新疆鼠尾草中总酚酸类成分的最佳提取工艺。方法以总酚酸含量和浸膏得率为指标,采用单因素考察和正交试验相结合的方法确立新疆鼠尾草中总酚酸类成分的最佳提取工艺。结果酚酸类成分的最佳提取工艺为:以25倍量的40%乙醇回流提取,3次,每次1h。在此条件下,新疆鼠尾草中的总酚酸含量为62.81mg/g。结论该方法操作简便,稳定性和重现性好,是检测新疆鼠尾草中总酚酸成分的可靠途径。

新疆鼠尾草种子萌发特性的研究

[目的]探明新疆鼠尾草种子的最佳发芽条件,为新疆鼠尾草的人工栽培提供依据。[方法]在不同温度、光照强度和贮藏条件等因素影响下,对新疆鼠尾草种子进行发芽试验,统计其发芽率。[结果]在光照和贮藏条件不变的情况下,当温度为20℃时,各类种子的平均发芽率最高;在最佳温度20℃条件下,新疆鼠尾草种子在光照与黑暗条件下的发芽率变化不大;在温度20℃及黑暗条件下,经过冷藏处理的种子其平均发芽率为89%,对照种子发芽率为90%,两者相差不大。[结论]温度对新疆鼠尾草种子萌发率的影响最大。

新疆鼠尾草花化学成分的研究

目的:研究新疆鼠尾草花的化学成分。方法:采用色谱法分离化合物,用光谱法和化学方法鉴定结构。结果:从新疆鼠尾草花中分离得到6个化合物:β-谷甾醇、齐墩果酸、5-羟基-4’,6,7三甲氧基黄酮、邻苯二甲酸二丁酯、迷迭香酸、丹酚酸K。结论:除β-谷甾醇、齐墩果酸外,其余均为从鼠尾草属植物的地上部分中首次得到,邻笨二甲酸二丁酯、5-羟基-4’,6,7-三甲氧基黄酮为新疆鼠尾草中首次得到。

新疆鼠尾草总酚酸对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C活性的影响

目的探讨新疆鼠尾草总酚酸对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组(A)10只和造模组50只,采用高脂饲料加链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为5组:糖尿病模型组(B)、盐酸二甲双胍组(C)及新疆鼠尾草总酚酸低(D)、中(E)、高(F)剂量组,每组10只。干预8 w,检测大鼠肾脏指数、血糖、肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAER)、肾脏PKC活性。结果与正常组比较,模型组大鼠肾脏指数、血糖、Ccr、UAER和肾脏细胞膜PKC活性均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,盐酸二甲双胍组和新疆鼠尾草总酚酸高剂量组大鼠肾脏指数、血糖、Ccr、UAER和肾脏细胞PKC活性均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);新疆鼠尾草总酚酸低剂量组大鼠的血糖明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),其余指标无明显下降,差异无统计学意义;新疆鼠尾草总酚酸中剂量组大鼠的血糖、UAER、肾脏细胞膜PKC明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),其余指标无明显下降,差异无统计学意义。结论新疆鼠尾草总酚酸能保护糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏,其作用机制与抑制其肾脏PKC的激活有关。

新疆鼠尾草酚酸类成分对HK-2细胞氧化损伤的保护作用及机制研究

目的研究新疆鼠尾草酚酸类成分对高糖高脂诱导的人肾小管上皮细胞HK-2氧化损伤的保护作用,并初步探讨其可能机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型组、卡格列净片组(阳性对照组,15μmol/L)、新疆鼠尾草酚酸纯化物组(10.8μg/mL)和4个单体成分组(丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸,均为50μmol/L)。除对照组外,其余各组均建立高糖高脂损伤细胞模型(500μmol/L棕榈酸+30 mmol/L葡萄糖处理48 h)并加药培养48 h。检测各组细胞的凋亡率以及细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量和谷胱甘肽(GSH)活性,并检测上述5组(丹参素组、原儿茶醛组、咖啡酸组除外)细胞中核转录因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、血红素氧合酶1(HO-1)、醌NADH脱氢酶1(NQO1)蛋白的表达。结果与对照组比较,模型组细胞的凋亡率显著升高(P<0.01);细胞中MDA含量显著升高(P<0.01),GSH含量和SOD活性显著降低(P<0.01);细胞中Nrf2、NQO1、HO-1蛋白表达显著下调(P<0.01),Keap1蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,各给药组细胞的凋亡率及细胞中MDA含量均显著降低(P<0.01),各给药组细胞中GSH含量及酚酸纯化物组、原儿茶醛组、迷迭香酸组细胞中SOD活性均显著升高(P<0.01);酚酸纯化物组细胞中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达以及迷迭香酸组Nrf2蛋白表达均显著上调(P<0.01),酚酸纯化物组和迷迭香酸组细胞中Keap1蛋白表达均显著下调(P<0.01)。结论新疆鼠尾草酚酸类成分可减轻高糖高脂所致肾小管上皮细胞的氧化应激损伤,其作用可能与其激活Keap1/Nrf2通路、抑制氧化应激反应相关。

HPLC法测定新疆鼠尾草各部位6,7-去氢罗列酮的含量

目的:了解二萜类有效成分中 6 ,7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。 方法 :采用 HPL C测定6 ,7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。结果:确定了 6 ,7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量。 结论 :首次利用 HPL C法明确了 6 ,7-去氢罗列酮在新疆鼠尾草各部位的含量分布情况。测定平均回收率 99.8% ,RSD=0 .92 %。

新疆鼠尾草叶化学成分的基础研究

目的: 研究新疆鼠尾草叶的化学成分。方法: 采用色谱法分离化合物,用波谱和化学方法鉴定结构。结果: 从新疆鼠尾草叶中分离得到4种化合物:β 谷甾醇(Ⅰ)、齐墩果酸(Ⅱ)、熊果酸(Ⅲ)、5 羟基 4′,6,7 三甲氧基黄酮(Ⅳ)。结论: 除β 谷甾醇、齐墩果酸、5 羟基 4′,6,7 三甲氧基黄酮外,其余均为从新疆鼠尾草的地上部分中首次得到。

双波长薄层扫描法测定新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮的含量

目的 :建立新疆鼠尾草中 6 ,7-去氢罗列酮含量测定的一种方法。 方法 :采用双波长薄层扫描法 ,测定波长λS=330 nm,参比波长λR=2 15 nm。 结果 :6 ,7-去氢罗列酮测定的线性范围为 0 .5～ 4.0μg,平均回收率为10 2 .4%。 结论 :用双波长薄层扫描法测定方法简单。

新疆鼠尾草水溶性有效部位的筛选研究

目的:测定新疆鼠尾草水溶性各部位丹酚酸类的含量,寻找有效部位。方法:采用UV分光光度法,分别对各部位丹酚酸类进行含量测定和方法学研究。结果:新疆鼠尾草地上部分80%甲醇提取物经大孔树脂柱分离的10%EtOH-H2O部分中丹酚酸类的含量为53.144%,为有效部位。结论:UV分光光度法操作简便,结果准确,便于推广,为新疆鼠尾草水溶性有效部位的筛选提供了科学依据。

新疆鼠尾草叶片净光合速率日变化特征研究

目的:研究新疆鼠尾草叶片净光合速率日变化及与环境因子的关系。方法:利用LI-6400XT光合仪测定新疆鼠尾草叶片净光合速率,采用Excel 2003和Spass 13.0进行数据整理及作图和进行相关分析。结果:新疆鼠尾草叶片净光合速率、蒸腾速率日变化均呈现"双峰"曲线,有明显的光合"午休"现象;净光合速率峰值分别出现在12:00和18:00,分别为22.77和20.28μmol CO_2·m^(-2)·s^(-1),第1峰值大于第2峰值;蒸腾速率的峰值分别出现在12:00和16:00,分别为13.02和13.09 mmol·m^(-2)·s^(-1)。午间14:00稍有下降,降至12.76 mmol·m^(-2)·s^(-1);相关分析表明,新疆鼠尾草净光合速率与气孔导度呈极显著正相关(r=0.892),与蒸腾速率呈显著正相关(r=0.835),与田间CO_2浓度呈显著负相关(r=-0.849);在有效光照强度、气温、空气湿度、田间CO_2浓度和蒸汽压差亏损5个环境因子中,田间CO_2浓度是影响净光合速率日变化的主要环境因子;在蒸腾速率、气孔导度、胞间CO_2浓度3个自身生理因子中,气孔导度是影响净光合速率日变化的主要自身生理因子;影响蒸腾作用的主要外在环境因素是有效光照强度,主要内在生理因素为气孔的自我调节因素。结论:通过研究新疆鼠尾草叶片净光合速率变化规律及与环境因子的关系,为其更好地开发利用奠定了生物学基础。

新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮对凝血酶诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及机制

目的通过体外实验研究新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮对凝血酶诱导损伤的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的保护作用及可能的机制。方法对HUVEC进行体外培养,通过凝血酶诱导HUVEC建立损伤模型,分为空白组、模型组(30 U/mL凝血酶)、6,7-去氢罗列酮组(0.1、0.2、0.3 mg/mL)预孵育24 h、肝素组(1 mg/mL)预孵育24 h,分别采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测6,7-去氢罗列酮对30 U/mL凝血酶损伤4 h的细胞活力;倒置显微镜下观察细胞形态;酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞裂解液中血管性血友病因子(von willebrand factor,vWF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)和组织型纤溶酶原激活物(Tissue plasminogen activator,t-PA)的含量以及t-PA/PAI-1的比值;实时荧光定量法(real-time quantitative PCR,QRT-PCR)检测vWF、PAI-1、t-PA的分泌及其mRNA的表达,并比较4组异同。结果与空白组比较,凝血酶损伤后的HUVEC活力明显受到抑制(P<0.05),细胞呈不规则形态;与模型组比较,肝素组和6,7-去氢罗列酮组明显提高细胞损伤后的活力,凝血酸损伤的HUVEC形态逐渐恢复至正常的纺锤形态,并能显著上调t-PA的含量及t-PA/PAI-1的比值(P<0.05)。6,7-去氢罗列酮高、中剂量组能够明显下调PAI-1和vWF的含量及其表达。结论6,7-去氢罗列酮对凝血酶诱导损伤的HUVEC具有保护作用,其机制可能与提高细胞纤溶活性,维持血管内皮细胞的正常功能有关。

新疆鼠尾草花蜜腺的发育解剖学研究

新疆鼠尾草(Salvia deserta Schang)花蜜腺位于子房基部的花托上,为盘状的花托蜜腺,其顶部裂成4片,其裂片大小不等,比例悬殊。蜜腺由产蜜组织和分泌表皮构成,又为结构蜜腺。组织化学染色显示淀粉粒动态明显,因此又属淀粉蜜腺。在发育的过程中细胞液泡化动态明显,且淀粉粒和蛋白质具有明显的消长变化,但PAS反应和苏木精脂类染色无明显变化。其泌蜜过程可能为:原蜜汁由邻近的韧皮部提供,经薄壁细胞运送至产蜜组织,在产蜜组织中进一步积聚、合成后,最终蜜汁通过变态气孔和分泌表皮细胞的角质层泌出。

新疆鼠尾草抗菌活性部位的筛选

从新疆鼠尾草地上部分甲醇浸膏中乙酸乙酯部位分离到化合物SLl、SL2，9个不同极性的组份分别为Frl一9。用纸片扩散法测定了E．coli和S．aureus对2个化合物和Frl～9的药敏性，并测定了它们作用于E．coli和S．aureus的最小抑菌浓度。实验结果显示，在鼠尾草的甲醇浸膏中，用正己烷和丙酮比例在10：1以上提取的有效成分有较强的抗菌活性，其中，两种溶剂的比例为5：1时提取物抗菌活性最强。因此，Fr8对E．coli和S．aureus的抗菌性最强，其MIC值均为0．235mg／mL。