血链球菌细菌素对唾液生物膜中牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌拮抗作用的实验研究

目的:提取血链球菌标准菌株(ATCC10556)细菌素,研究其对唾液生物膜中牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的拮抗作用。方法:通过超声破碎,高速离心,盐析等方法提取血链球菌细菌素;采用二倍稀释法,测定血链球菌细菌素对浮游状态下牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的最小抑制浓度(MIC);在体外建立牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌唾液生物膜模型,利用激光共聚焦扫描电镜观察该生物膜中细菌活性的变化。结果:血链球菌细菌素对浮游状态下的牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的MIC为0.5 g/L;使用血链球菌细菌素作用牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌生物膜,活菌百分比显著下降,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。结论:血链球菌细菌素对浮游状态下和生物膜中的牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌生长均有显著的抑制作用。

血链素的提纯和初步鉴定

目的 提纯血链素 ,为进一步从分子水平研究血链球菌及血链素对牙周可疑致病菌的作用机理提供实验基础。方法 利用 DEAE- Sepharose梯度洗脱和葡聚糖凝胶过滤相结合的方法 ,将 4 72 g/L 硫酸铵沉淀的血链素粗提物进一步提纯 ,测定其抑菌活性 ,并进行初步鉴定。结果 提纯获得了纯化的血链素 ,初步鉴定显示其具有蛋白质的性质 ,SDS- PAGE电泳结果显示主要区带一条 ,相对分子质量为 6 5× 1 0 3。体外抑菌试验显示提纯物对牙龈卟啉单胞菌、中间普雷沃菌和具核梭杆菌具有较强抑菌能力。结论 纯化血链素具有拮抗牙周可疑致病菌的重要作用 。

血链球菌血链素的分离纯化及其化学组成的测定

目的:分离纯化血链球菌血链素,并对其组成成分进行检测。方法:通过羟基磷灰石(HA)柱层析、SephadexG-150凝胶柱层析、中空纤维柱超滤脱盐、浓缩,分离并纯化血链素,SDS-PAGE检测其纯度及亚基分子量并检测其分子量,同时以紫外线吸收法及苯酚-硫酸法检测血链素蛋白及糖含量。结果:血链素分子量为180kDa,亚基分子量为110kDa和70kDa,其中蛋白含量为87.51%,糖含量为12.49%。结论:纯化的血链素是一种由两个亚基组成的糖蛋白。