血管紧张素Ⅱ受体抑制剂对雌激素诱导的Ishikawa细胞的增殖及凋亡的影响

目的探讨沙拉新(saralasin)对雌激素诱导的ishikawa细胞的增殖、凋亡和细胞周期的影响。方法以不同浓度的药物和时间处理体外培养的ishikawa细胞,采用四甲基亚唑蓝(MTT)法检测ishikawa细胞的生长抑制情况、流式细胞仪碘化丙锭(PI)染色分析细胞周期分布,流式细胞仪及AnnexinⅤ-TITC试剂盒检测saralasin对ishikawa细胞凋亡的影响。结果 saralasin可明显抑制雌激素诱导的ishikawa细胞增殖,使细胞周期停滞在G1/G0期,S期相对减少,凋亡增多。结论 saralasin可以抑制雌激素诱导ishikawa细胞的增殖作用,可能有助于子宫内膜癌的治疗。

NO参与AngⅡ诱导心肌成纤维细胞胶原含量的变化

目的:探讨NO前体L-Arg和NOS抑制剂L-NAME在血管紧张素Ⅱ诱导CFs胶原合成中的作用。方法:用胰酶消化法分离、纯化、培养新生SD大鼠CFs,采用CFs羟脯氨酸含量测定、以羟脯氨酸标准曲线求出样本中羟脯氨酸含量,胶原含量以羟脯氨酸含量×7.4表示。结果:(1)在培养液中加入AngⅡ10-9～10-5mol/L,CFs胶原含量呈明显的剂量依赖性;(2)分别给予Saralasin和PTX对CFs胶原含量均无明显影响,但可明显抑制AngⅡ增强CFs胶原含量的作用;(3)预先给予NO前体L-Arg,再加入AngⅡ,AngⅡ增加CFs胶原含量的效应明显减弱;(4)加入NOS抑制剂L-NAME后,再加入L-Arg和AngⅡ,明显减弱L-Arg对AngⅡ的抑制作用;(5)在用L-NAME抑制NOS的基础上,再加入AngⅡ,其AngⅡ促心脏CFs的作用进一步增强,而单纯应用L-NAME对基础状态CFs胶原含量无明显影响。结论:AngⅡ能剂量依赖性增加CFs胶原含量,此效应是通过AngⅡ受体实现的,可能部分依赖于PTX敏感的G蛋白;NO明显抑制AngⅡ增加CFs胶原含量的作用,CFs内可能存在L-Arg-NO通路,该通路在调控AngⅡ增加CFs胶原含量中有重要作用。

血管紧张素Ⅱ诱导左心室原癌基因c－fos和c－myc的表达

本实验用Ｌａｎｙｅｎｄｏｒｆｆ心脏灌流装置，探讨血管紧张素Ⅱ对左心室原癌基因ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的作用。观察到血管紧张素Ⅱ能诱导左心室ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的表达，ｃ－ｆｏｓ表达早于ｃ－ｍｙｃ表达，并呈量－效关系。这种作用可被血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂ｓａｒａｌａｓｉｎ所阻断。这些结果提示血管紧张素Ⅱ诱导的ｃ－ｆｏｓ和ｃ－ｍｙｃ的表达是受体介导的。ＴＴＸ完全阻断血管紧张素Ⅱ诱导的ｃ－ｆｏｓ表达。ＴＴＸ对ｃ－ｍｙｃ的表达无明显影响。

血管紧张素Ⅱ对培养心肌细胞c-fos表达和蛋白质合成的作用

本实验在培养新生大鼠心肌细胞上，探讨血管紧张素Ⅱ对心肌细胞c－fosmRNA表达和蛋白质合成的影响。结果显示，血管紧张素Ⅱ能诱导c－fosmRNA的表达，增加蛋白质含量，并呈量-效关系；还能加速3H-亮氨酸的掺入速度。上述这些作用可被血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂saralasin所阻断，提示这些作用是受体介导的。血管紧张素Ⅱ诱导c-fosmRNA的表达亦可被钙通道阻滞剂nicardipine所阻断。

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对胎粪诱导肺损伤中炎症反应的作用

目的:研究胎粪吸入所致肺炎症损伤与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)两者之间的相关性及AngⅡ受体拮抗剂的抗炎作用。方法:30只S-D大鼠,随机分为生理盐水对照组、胎粪吸入组和拮抗剂治疗组,每组10只。模型制备后24h取材,观察其肺组织病理损伤并检测湿/干重比及进行病理评分;检测AngⅡ在肺组织的表达情况及用图像分析方法检测其含量;测定肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量及肺匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性。结果:胎粪组肺组织病理损伤严重,病理评分及湿/干重比较对照组和治疗组明显增加(P<0.05),对照组和治疗组差异无显著意义;各组间AngⅡPU值、TNF-α含量及MPO活性差异有显著性(P<0.01);并且各组中TNF-α含量及MPO活性与其肺组织中AngⅡPU值呈显著正相关(P<0.01),相关系数分别为0.744和0.747。结论:AngⅡ可增加胎粪吸入肺损伤中炎症因子和炎症细胞含量。受体拮抗剂沙拉欣的治疗可以减轻炎症反应导致的肺损伤。

大鼠脑内血管紧张素Ⅱ参与吗啡耐受的证据

给大鼠icv AⅡIgG或saralasin可明显推迟连续6次sc吗啡(6μg/kg)造成的急性吗啡耐受(p<0.01)。给大鼠每日3次sc递增剂量吗啡共注射5d(dl为5 mg/kg,d5为25mg/kg)造成慢性耐受后,icv AⅡIgG(20 mg),可部分翻转吗啡耐受,使吗啡的镇痛作用恢复到耐受前水平的50％(p<0.01)。放免测定表明,连续注射吗啡3或6次的大鼠CSF中AⅡ-ir明显增高,分别高于对照组1.17和1.16倍。连续注射吗啡3或5 d的CSF中A1Ⅱ-ir分别高于对照组1.12和2.85倍。

缰核参与应激性高血压的形成及其机制研究

电击大鼠足底形成应激性高血压（ＳＩＨ），研究了缰核（Ｈｂ）在其中的作用机制。损毁Ｈｂ可降低ＳＩＨ升高的幅度。ＳＩＨ鼠内外侧Ｈｂ（ＭＨｂ，ＬＨｂ）对谷氨酸（Ｇｌｕ）的敏感性高于正常鼠。足底电击使血浆和Ｈｂ内血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）明显升高。侧脑室和ＭＨｂ分别注射ＡｎｇⅡ或ｓａｒａｌａｓｉｎ，在ＳＩＨ鼠引起明显的血压变化。微电泳ＡｎｇⅡ、ｓａｒａｌａｓｉｎ可分别明显改变ＳＩＨ鼠Ｈｂ内神经元的放电活动。ＡｎｇⅡ可抑制Ｈｂ细胞膜上延迟整流Ｋ＋电流（Ｉｋ）通道的活动。以同样的方法观察了Ｎ－硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）和硝普钠（ＳＮＰ）在ＳＩＨ鼠中的作用。由以上可知，电击可使Ｈｂ尤其是ＭＨｂ神经元对ＡｎｇⅡ的反应性明显增强，同时也使ＡｎｇⅡ合成增多，这些变化对于敏感化了的Ｈｂ神经元的作用更强，最终发展为ＳＩＨ。

大鼠脑内血管紧张素Ⅱ参与电针耐受的证据

本工作将AⅡ,抗体或受体拮抗剂Saralasin注入大鼠侧脑室以去除脑内AⅡ的作用,观察其对电针耐受动态过程的影响。结果表明,侧脑室注射AⅡIgG(20μg)或Saralasin(20μg)可明显推迟连续6轮电针造成的电针耐受(P<0.05,ANOVA)。给大鼠连续5轮电针造成耐受后,脑室注射AⅡIgG可部分翻转电针耐受,使电针镇痛作用恢复到耐受前水平的60％(P<0.01,ANOVA)。放免测定表明,未经电针的大鼠CSF中AⅡ-ir为16.4±3.4fmol/0.1ml;电针1h CSF中AⅡ-ir增高至44.8±6.6mol/0.1ml;电针2h达71.1±6.8fmol/0.1ml;以后逐渐波动下降,电针6h CSF中AⅡ-ir仍高于对照组1.3倍。说明电针耐受时释放剑CSF中的AⅡ增多。综合以上结果可以认为,脑内AⅡ任电针耐受的形成中起着重要作用。

缰核内注射血管紧张素Ⅱ对应激性高血压大鼠血压的影响

目的 :观察微量注射血管紧张素Ⅱ (angitensinll,AngⅡ )及受体拮抗剂于应激性高血压 (stress inducdehy pertension ,SIH)大鼠内侧缰核 (medialhabenulanucleus,MHb)、外侧缰核 (lateralhabenulanucleus,LHb)内对血压的影响。方法 :用核团微量注射的方法。结果 :AngⅡ (10ng)微量注入SIH大鼠MHb引起血压明显升高 ,与正常对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,AngⅡ微量注入LHb也可使血压升高 ,但与正常对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。SIH大鼠MHb微量注入saralasin(2 0ng)可使血压明显下降 ,与正常对照组比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,LHb内微量注入saralasin也可使血压下降 ,但与正常对照组比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :应激性高血压大鼠缰核(habenulanucleus,Hb) ,特别是MHb内的AngⅡ在应激性高血压发病中起一定的作用。

侧脑室内注射微量血管紧张素Ⅱ对大鼠胃和十二指肠运动的影响

本文以定点记录大鼠胃和十二指肠运动的方法,观察了侧脑室内注射(ICV)微量血管紧张索Ⅱ(AⅡ)对胃和十二指肠运动的影响。发现AⅡ(ICV)能显著增强胃和十二指肠运动。用基丙抗压素(Saralasin,ICV)或阿托品(i.H.)或切断膈下迷走神经均可完全阻断这一增强效应,但该效应却不受酚妥拉明(i.m.或ICV)、心得安(i.m.或ICV)或阿托品(ICV)的影响,提示AⅡ在脑内可能刺激中枢内与调整胃肠运动有关的神经核团,经迷走神经而使胃肠运动增强。

血管紧张素Ⅱ、心房钠尿肽和血管升压素对大鼠脑片穹窿下器神经元活动的影响

在31个脑片观察了血管紧张素Ⅱ(AGⅡ)、心房钠尿肽(ANP)和血管升压素(AVP)三种多肽对87个穹窿下器(SFO)神经元单位电活动的影响。脑片灌流AGⅡ(10^(-7)mol/L,3min)后,40/55个单应(72.73％)放电频率明显增加,3/55个单位(5.45％)放电频率降低,12/55个单位(21.82％)无明显反应。AGⅡ对SFO放电单位的兴奋作用可被AGⅡ受体阻断剂saralasin(10^(-6)mol/L)完全阻断。脑片灌流心房肽Ⅲ(APⅢ)(10^(-7)mol/L,3min)后,7/17个单位(41.18％)放电频率明显降低,2/17个单位(11.76％)放电频率增加,8/17个单位(47.06％)无明显反应。脑片灌流AVP(10^(-7)mol/L,3min)后,8/15个单位(53.33％)放电频率明显增加,3/15个单位(20.00％)放电频率降低,4/15个单位(26.67％)无明显反应。在观察这三种多肽对同一SFO神经元的作用时,1个单位对AGⅡ和AVP均产生兴奋反应;3个单位对AGⅡ呈兴奋和被APⅢ所抑制;1个单位对AVP呈兴奋,而对APⅢ为抑制,未见到既对AGⅡ和AVP呈兴奋,又为APⅢ所抑制的单位。结果提示:AGⅡ,ANP和AVP三种多肽都能影响SFO神经元的自发电活动,SFO可能也是三者调节机体水盐平衡和血压的中枢部位之一。

血管紧张素Ⅱ、心房钠尿肽Ⅲ和血管升压素对大鼠脑片室旁核神经元放电活动的影响

在28个脑片观察了血管紧张素Ⅱ(AGⅡ)、心房钠尿肽Ⅲ(ANPⅢ)和血管升压素(AVP)三种多肽对101个下丘脑室旁核(PVN)神经元单位电活动的影响。脑片灌流AGⅡ(10^(-7)mol/L,3 min)后,28/50个单位(56.0％)放电频率明显增加,5/50个单位(10.0％)放电频率降低,17/50个单位(34.0％)无明显反应。AGⅡ对PVN放电单位的兴奋和抑制作用均可为AGⅡ受体阻断剂saralasin(10^(-6)mol/L)所阻断。脑片灌流ANPⅢ(10^(-7)mol/L,3 min)后,16/26个单位(61.5％)放电频率明显降低,1/26个单位(3.9％)放电频率增加,9/26个单位(34.6％)无明显反应。脑片灌流AVP,(10^(-7)mol/L,3min)后,19/25个单位(76.0％)放电频率明显增加,1/25个单位(4.0％)放电频率降低,5/25个单位(20,0％)无明显反应。在观察这三种多肽对同一PVN神经元的作用时,4个单位对AGⅡ和AVP均产生兴奋反应;2个单位对AGⅡ呈兴奋和被ANPⅢ所抑制;7个单位对AVP呈兴奋,而对ANPⅢ为抑制,未见到既对AGⅡ和AVP呈兴奋,又为ANPⅢ所抑制的单位。结果提示:AGⅡ,ANP和AVP三种多肽都能影响PVN神经元的自发电活动,PVN可能是神经内分泌和植物性功能调节的中枢整合部位之一。

中枢血管紧张素Ⅱ在慢性应激大鼠颈动脉窦反射重调中的作用

目的 研究慢性应激大鼠颈动脉窦反射（ＣＳＲ）的功能变化，并观察中枢血管紧张素Ⅱ（ＡＮＧⅡ） 在其变化中的作用。方法 应激组大鼠随机足底电击２ 周。在麻醉下孤离颈动脉窦，用多道仪同步记录平均动脉压（ＭＡＰ）和窦内压（ＩＳＰ） 。应用五参数ｌｏｇｉｓｔｉｃ 函数拟合实验数据，并定量分析反射参数的变化。结果 慢性应激后ＣＳＲ 发生慢性重调，表现为调定点移向高ＩＳＰ区， 反射增益和ＭＡＰ反射范围减小；侧脑室（ＬＣＶ） 内注射ＡＮＧⅡ特异拮抗剂肌丙抗增压素后，与注射前相比，增益和ＭＡＰ反射范围增大，调定点减小，但仍高于非应激组。ＬＣＶ 注射ＡＮＧⅡ后非应激大鼠ＣＳＲ增益显著性下降，调定点增大；ＬＣＶ 内肌丙抗增压素预处理可完全阻断ＡＮＧⅡ的上述作用。结论 慢性应激时ＣＳＲ发生了重调，反射功能受到抑制，应激对ＣＳＲ

血管紧张素Ⅱ增加新生鼠脑细胞胞浆Ca^(2+)浓度

本文应用荧光钙测定技术观察了血管紧张素Ⅱ(AⅡ)对新生Wistar鼠脑细胞胞浆Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]_i)的影响。结果表明:血管紧张素Ⅱ在1nmol/L—1μmol/L浓度下可诱导新生鼠脑细胞[Ca^(2+)]_i增加,具量效关系。在无外Ca^(2+)存在对,其增加幅度有所减少。上述效应可被血管紧张素Ⅱ拮抗剂Saralasin所阻断,并呈剂量依赖关系。上述结果提示,血管紧张素Ⅱ可激活血管紧张素AⅡ受体,增加脑细胞[Ca^(2+)]_i,该效应通过细胞内Ca^(2+)释放和细胞外Ca^(2+)内流两条适径实现,前者的作用是主要的。

Proliferation of aortic smooth muscle cells and renin-angiotensin system in SHR rats

目的：探讨ＳＨＲ大鼠主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）异常增殖和肾素血管紧张素系统（ＲＡＳ）的关系．方法：测定血管紧张素Ｉ（Ａｎｇ）、卡托普利（Ｃａｐ）、沙拉新（Ｓａｒ）对培养的ＳＨＲ、ＷＫＹＡＳＭＣ增殖和Ａｎｇ、血管紧张素转化酶（ＡＣＥ）的影响．结果：Ａｎｇ在２％血清培养基中可刺激ＳＨＲＡＳＭＣ增生．ＳＨＲＡＳＭＣ分裂增殖能力比ＷＫＹ强，ＳＨＲＡＳＭＣＲＡＳ处于高功能状态．Ｃａｐ长期（４周）干预显著抑制ＳＨＲＡＳＭＣ异常增殖和Ａｎｇ、ＡＣＥ活性，Ｓａｒ长期干预同样抑制ＳＨＲＡＳＭＣ的增殖和ＡＣＥ活性，但Ａｎｇ水平反而升高．Ｃａｐ短期（２４小时）干预不影响两种大鼠ＡＳＭＣＲＡＳ．结论：Ｃａｐ和Ｓａｒ长期干预通过减少ＳＨＲＡＳＭＣＡｎｇ生成或阻断Ａｎｇ和特异受体结合，抑制其异常增殖．