AUGMENTATION OF IMMUNE FUNCTIONS AND AUTOLOGOUS TUMOR-KILLING ACTIVITY BY KAPPA-SELENOCARRAGEENAN IN MICE BEARING SARCOMA 180

Objective: To study the enhancement of the immune functions and autologous tumor killing (ATK) activity by kappa selenocarrageenan (KSC) in mice bearing sarcoma 180. Methods: To measure the effects of KSC and/or Cyclophosphamide (Cy) on natural killer (NK) activity, lymphokine activated killer (LAK) activity, the produc tion of interleukin 2 (IL 2), ATK activity and the growth of sarcoma 180 (S 180 ). Results: KSC promoted NK activity, LAK activity and ATK activity in vivo , increased IL 2 production at 40 mg/kg/d×9d. It also enhanced the antitumor action of Cy (20 mg/kg/d×9d) and offset the inhibition of Cy on immunocopetent cells. The ATK activity in splenocytes of S 180 bearing mice could be induced and increased by recombinant interleukin 2 (rIL 2) in vitro . Conclusion: KSC has an up regulating effect on the immune functions and ATK activity in tumor bearing mice. It can be used as a biological response modifier (BRM) in cancer biotherapy.

聚焦超声结合原卟啉对S180肿瘤细胞杀伤作用的研究

采用频率为2.2MHz及不同强度的聚焦超声激活原卟啉对小鼠腹水型S180肿瘤细胞的杀伤作用进行研究。台盼蓝拒染法检测了不同处理后细胞的相对存活率,通过扫描电镜和透射电镜观察细胞超微结构的变化。实验结果表明:单纯原卟啉对S180肿瘤细胞几乎没有影响,单纯超声和超声结合原卟啉对细胞均有一定的损伤,肿瘤细胞受损程度随着声照强度的增加而加剧,并且在一定范围内随着原卟啉剂量浓度的加大,细胞受损也逐渐增强。当原卟啉浓度为120μM时,超声激活原卟啉对腹水型S180肿瘤细胞的协同杀伤效应表现最为明显。

藏药雪灵芝粗多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的观察藏药雪灵芝粗多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法建立S180荷瘤小鼠模型,将其随机分为对照组,环磷酰胺(CTX)组,AKCP高(AKCP-H)、中(AKCP-M)、低剂量(AKCP-L)组,连续给药10 d后处死,取瘤称重并计算抑瘤率;HE染色法观察瘤组织形态;荧光定量PCR及Western blot法检测瘤组织中增殖相关因子Cyclin D1、PCNA、Ki67,凋亡相关因子Bcl-2、Bax的m RNA和蛋白的表达。结果 CTX、AKCP-H、AKCP-M、AKCP-L组瘤体质量低于对照组(P<0.05),抑瘤率分别为58.033%、25.574%、31.803%、23.279%;HE染色显示,CTX组及AKCP各剂量组肿瘤组织出现不同程度坏死区及间质增多现象;与对照组比较,各实验组Cyclin D1、PCNA、Ki67、Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax的m RNA及蛋白表达无显著差异(P>0.05)。结论雪灵芝粗多糖在一定程度上抑制了S180荷瘤小鼠肿瘤生长,可能具有抑瘤作用。

人胎肝中低分子天然抑瘤物对小鼠肉瘤S-180作用的研究

从人胎儿肝脏中分离出一种分子量较小的抑瘤物质(FLS-MeOH),观察了它对小鼠肉瘤S-180细胞生长的抑制效应。在体外琼脂培养中,当FLS-MeOH浓度达到300μg/ml时,可完全抑制S-180细胞的集落形成;给荷瘤小鼠每日注射FLS-MeOH8mg/g体重,共20d,可明显延长小鼠的存活时间,部分小鼠可以无病存活。这些结果说明FLSMeOH在体内外均有明显的抗肿瘤活性,而且具有分子量小、无组织和种系特异性,以及对肿瘤细胞不可逆的毒性作用等特性。

多抗乙素对小鼠S_(180)肉瘤中免疫活性细胞浸润的影响

曾经证明多抗乙素有明显的抑瘤作用。本文以小鼠实验性S_(180)肉瘤为模型观察了多抗乙素对肿瘤组织内和肿瘤周围Mφ、L_3T_4^- 及Lyt_2^-细胞的影响,同时观察了肿瘤坏死组织周围中性粒细胞浸润及小血管内血栓形成的改变。结果提示:Pb治疗组,肿瘤周围及肿瘤内浸润的L_3T_4^-和Lyt_2^-细胞显著增多,说明Pb可诱导肿瘤组织中淋巴细胞浸润;肿瘤组织的坏死灶周围明显充血、小血管血栓形成显著增加,并有带状中性粒细胞浸润。这些改变与TNF介导的肿瘤组织损伤相符,提示Pb的抑瘤作用主要是通过免疫活性细胞产生的TNF实现的。

预设靶标免疫靶向盐酸吡柔比星治疗小鼠S180肉瘤的试验研究

目的:制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-盐酸吡柔比星(THP)免疫靶向偶联物,在肿瘤组织中接种人IgG非特异性靶点,探讨人造靶点免疫导向治疗肿瘤的可行性。方法:制备小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP偶联物,建立荷瘤小鼠模型。采用ELISA法测定小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP偶联物抗体活性;体外细胞毒性实验(四甲基偶氮唑蓝法)比较分析小鼠抗人IgG、THP、小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP对S180细胞的毒性作用;比较THP、小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP、小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP+人IgG的抑瘤作用及对荷瘤小鼠生存时间的影响。结果:制备的偶联物中,小鼠抗人IgG、葡聚糖与THP物质的量比为1∶2.5∶54;偶联物保留了小鼠抗人IgG抗体活性;体外细胞毒性实验表明偶联物对S180细胞有体外杀伤作用。小鼠抗人IgG-葡聚糖-THP+肿瘤中接种人IgG组对小鼠移植性S180肉瘤的抑瘤率达34.3%,并可延长荷瘤小鼠的生存时间。结论:通过在肿瘤组织中接种IgG非特异性靶点,用抗人IgG单克隆免疫靶向THP治疗小鼠S180肉瘤较对照组具有明显靶向作用。

盐酸洛拉曲克在荷S180肉瘤小鼠组织中的分布及对体外培养肝癌细胞株的作用

目的 :研究盐酸洛拉曲克 (nola trexeddihydrochloride ,NLTX)在体外对正常人胚肝细胞Fb和人HepG2、QSG770 3肝癌细胞株以及小鼠S180肉瘤细胞株的抗增殖作用 ;探讨其在荷S180肉瘤小鼠组织中的分布情况。方法 :四氮唑盐 (MTT )法测定NLTX在体外对细胞的抗增殖作用 ,高效液相色谱法测定在荷S180肉瘤小鼠血液、肝脏和肉瘤组织中NLTX的浓度。结果 :NLTX在体外对HepG2、QSG770 3以及S180肿瘤细胞株的半数抑制浓度分别为2 17、0 61及 0 72 μg/mL ,对正常人胚肝细胞Fb则为 82 60 μg/mL ;以 10 0mg/kg剂量单次灌胃给药后 ,NLTX在小鼠血、肝及肉瘤组织中可达到的最高浓度分别为(18 2 4± 5 68)、 (4 0 12± 16 81)和(16 0 8± 7 64 ) μg/mL。 结论 :NLTX在体外有显著的抗细胞增殖作用 ,对肿瘤细胞的作用强度高于正常细胞 ,对肿瘤细胞的抑制作用有选择性 ;该化合物在小鼠组织中可以达到有效的治疗浓度。

小鼠胚胎成纤维细胞介导的IL-12抗S-180肿瘤作用

目的:将IL-12重组载体转染入小鼠成纤维细胞,研究探讨转染后的抗肿瘤作用.方法:取小鼠胚胎获得原代成纤维细胞,应用PEI法将IL-12重组载体转染到小鼠胚胎成纤维细胞,同时设对照.建立肉瘤细胞(S-180)荷瘤小鼠模型,分别接种S-180细胞.于注射瘤细胞后定期给予转染后的成纤维细胞瘤体内注射,并设对照组.于致瘤后第21日处死小鼠,测肿瘤质量;ELISA法检测小鼠血清IL-12及γ-干扰素(IFN-γ)的表达;检测NK(natural killer cells)细胞活性和脾淋巴细胞增殖情况、CD4/IFN-γ、CD8/IFN-γ双标记阳性细胞的克隆能力.结果:抑瘤率、NK细胞活性及淋巴细胞增生反应、血清IL-12、IFN-γ水平、CD4/IFN-γ及CD8/IFN-γ双标记阳性细胞的百分率均高于对照组(P<0.01).结论:转染后的IL-12重组质粒可进一步增强机体的免疫功能发挥其抗肿瘤的治疗作用.

兴安升麻总苷抗肿瘤药效研究

目的观察升麻总苷对小鼠移植性肿瘤和人肿瘤细胞裸鼠移植瘤的体内抗肿瘤作用,以及体外对人肿瘤细胞株的抑瘤活性,并对其抑瘤机制进行初步探讨。方法MTT法检测体外升麻总苷对人肿瘤细胞的增殖抑制作用;体内实验观察其对小鼠S180和裸鼠体内移植人肺腺癌A549的抑制作用;同时采用流式细胞仪和肿瘤病理切片对接种的A549肿瘤细胞凋亡进行观察。结果升麻总苷对A549、HepG2、HL60、Eca-109、MDA-MB231肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为20.3、27.1、21.2、23.4和32.7μg/mL。小鼠口服升麻总苷100mg/kg和200mg/kg可明显抑制S180移植瘤(抑瘤率分别为42.8%和54.6%)和裸鼠移植人肺腺癌A549的生长(T/C值分别为58.1%和52.2%),肿瘤组织病理切片和流式细胞仪对A549肿瘤细胞凋亡的检测显示,升麻提取物可诱导体内肿瘤细胞凋亡。结论升麻体内体外均具有抗肿瘤活性,其体内抑制肿瘤生长可能与诱导细胞凋亡相关。

狼毒蛋煎剂毒性及抑瘤效应的实验研究

目的 :研究狼毒蛋煎剂的毒性和对肉瘤S180 、HepA肿瘤细胞的抑瘤作用。方法 :①半数致死量(LD50 )毒性实验 ;②抑制HepA肿瘤细胞实验 ;③抑制肉瘤S180 实验。结果 :毒性实验 :口服狼毒蛋煎剂组LD50 >12 0 ,腹腔注射狼毒蛋煎剂组LD50 为 4 9113;口服狼毒煎剂组LD50 >12 0 ,腹腔注射狼毒煎剂组LD50 为 1 86 6 8。抑制HepA肿瘤实验 :狼毒蛋煎剂组瘤重 (0 714± 0 149)g ,5 FU组平均瘤重(0 52 1± 0 114)g ,生理盐水组平均瘤重 (9 82± 0 2 13)g。狼毒煎剂组与生理盐水组相比P <0 .0 5。抑制肉瘤S180 实验狼毒蛋煎剂组平均瘤重 1 17g ,生理盐水组平均重 2 4 6g ,两组比较P <0 .0 1。结论 :狼毒蛋煎剂能安全有效地抑制HepA肿瘤细胞和肉瘤S180 。

不同细胞株对血卟啉吸收特性的比较研究

分别用不同浓度的血卟啉(Hematoporphyrin,Hp)依次孵育细胞,研究了S180、Eac、H22腹水型肿瘤细胞对其的吸收特性.结果表明,随着孵育时间的延长和孵育浓度的增加,腹水型肿瘤细胞对Hp的吸收也相应增加.当浓度≤50μg/mL时,三种细胞对Hp的吸收量缓慢增加;当浓度大于50μg/mL时,细胞对Hp的吸收迅速,H22在60 min左右出现峰值.S180对Hp的吸收能力稍强于Eac,前两者明显强于H22,而且不同的浓度范围可能导致同一细胞对Hp的吸收差异.这种吸收特点可能与肿瘤细胞膜表面的差异以及本身结构和功能特性有关.

枸杞多糖对荷瘤小鼠免疫功能的增强效应及抑瘤作用的研究

荷S18 0 肉瘤小鼠腹腔注射枸杞多糖 (LBP) 2 0 0mg/kg·d× 7d ,在停药后早期 ,脾重及脾有核细胞数目明显增多 ,显著提高NK细胞活性以及脾细胞产生IL - 2的能力。在停药后第 1、5、10天 ,抑瘤率分别为 5 5 .5 7%、2 4.85 %、5 .6 7%。结果表明 。

硒酸酯多糖增强荷瘤小鼠免疫功能和自身肿瘤杀伤活性的作用

本文研究了硒酸酯多糖(KSC)对荷S180肉瘤小鼠NK细胞活性、LAK细胞活性、IL-2分泌能力和自身肿瘤杀伤活性(ATK)的影响及抑癌效应.结果表明,KSC(40mg/kg·d×9d,ig)能增强荷瘤鼠NK细胞和LAK细胞活性,促进脾细胞产生IL-2,增强ATK活性;加强环磷酰胺(Cy,20mg/kg·d×9d,ip)的抑瘤作用,并能拮抗Cy对免疫活性细胞的抑制效应.体外用rIL-2激活荷瘤鼠脾淋巴细胞可诱生或增强ATK活性.本研究结果提示,KSC上调肿瘤宿主NK细胞和LAK细胞活性及IL-2的分泌水平,增强ATK活性,可作为生物反应调节剂(BRM)应用于肿瘤生物治疗.