水母雪莲乙醇提取物对Lewis肺癌荷瘤小鼠抗肿瘤免疫的影响

目的:初步探讨藏药水母雪莲(SMM)的体内外抗肿瘤免疫功能。方法:C57BL/6野生小鼠接种3LL细胞建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为生理盐水组、SMM1低剂量组、SMM2中剂量组、SMM3高剂量组和环磷酰胺(CTX)组,体内连续治疗21 d。检测Lewis肺癌荷瘤小鼠实体瘤体积、质量和体质量;计算胸腺、脾脏指数;流式细胞仪检测肿瘤浸润组织淋巴细胞(TIL)的CD4^(+)T、CD8^(+)T百分比和CD4^(+)T/CD8^(+)T比例。体内MTT法检测80、100μg/ml SMM乙醇提取物对Lewis肺癌荷瘤小鼠脾CTL杀伤活性的影响;El ISA法检测CTL分泌IFN-γ的水平。结果:与生理盐水组比较,SMM乙醇提取物可显著抑制肿瘤生长并维持荷瘤小鼠体质量增长;胸腺和脾脏指数均显著升高(P<0.05);TIL中CD4^(+)T和CD4^(+)T/CD8^(+)T水平显著升高(P<0.05),SMM1和SMM3组CD8^(+)T显著降低(P<0.05),SMM2组差异无统计学意义。体外显著增强了荷瘤小鼠脾脏CTL的杀伤活性以及分泌IFN-γ的水平(P<0.01)。结论:SMM乙醇提取物可以通过增强免疫细胞功能发挥抗肿瘤免疫效应。

不同理化因子对雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响

在 1 2MS液体培养基上研究了不同理化因子对水母雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响。实验结果表明 :氮源总浓度 (包括NH+4和NO-3)为 30mmol L ;NH+4 NO-3比例为 5∶2 5 ;2 %蔗糖和 3%葡萄糖组合 ;0 . 5mg LGA3和 0 . 5mg LIBA ;pH5 8;18h d的光照 (光强为 35 .0 0lx) ;2 4℃ ;摇床转速为 10 0r min有利于毛状根生长及总黄酮的生物合成。在此培养条件下 ,经过2 1d的培养毛状根生长量达到 12. 8g L(DW) ,总黄酮合成量为 192 .2mg L ,即总黄酮含量占毛状根干重的 15 % ,约为干重野生水母雪莲植株总黄酮含量的 2 5倍。

不同理化因子对雪莲培养细胞中黄酮类形成的影响

研究了不同理化因子对水母雪莲（ＳａｕｓｕｒｅａｍｅｄｕｓａＭａｘｉｍ）愈伤组织生长及黄酮类化合物生物合成的影响。结果表明，有利于细胞生长及黄酮形成的合适温度为２５℃。白光对愈伤组织生长无促进作用，但有利于黄酮的形成。培养基中添加１ｍｇ／ＬＮＡＡ和０２ｍｇ／Ｌ的ＫＴ组合对细胞的生长较有促进作用。５％蔗糖和１％葡萄糖的组合有利于细胞的生长和黄酮的形成。用６０Ｃｏγ射线辐照愈伤组织，在剂量为４０００Ｇｙ的条件下，获得一个合成黄酮能力高于原愈伤组织７０％的细胞系。用高效液相和紫外分光光度法，测定离体培养光照条件下干细胞总黄酮的含量为３２％，是暗培养的４４倍。培养温度２５℃时干细胞黄酮的含量为２０２％，分别为２０℃，３５℃时的５倍和３２倍。

野生雪莲和培养雪莲总黄酮主要药效作用比较研究

目的观察野生、培养雪莲总黄酮的镇痛、抗炎以及免疫调节作用。方法采用小鼠热刺激甩尾实验、小鼠耳肿胀法、大鼠角叉菜胶性足跖肿胀实验以及小鼠脾脏T、B淋巴细胞转化实验观察野生、培养雪莲总黄酮的镇痛、抗炎以及免疫调节作用。结果野生、培养雪莲总黄酮对热刺激所致疼痛具有明显的镇痛效果;对小鼠耳肿胀和大鼠足肿胀有明显的抑制作用;对小鼠T、B淋巴细胞转化功能都有明显抑制作用;野生与培养雪莲总黄酮的主要药效作用无显著性差异。结论野生、培养雪莲总黄酮都具有镇痛、抗炎以及免疫抑制作用,二者作用无显著性差异。

光照对水母雪莲愈伤组织合成生物碱的影响

以水母雪莲 (Saussurea medusa Maxin.)无菌幼苗的根作外植体 ,诱导获得的愈伤组织为材料 ,研究光照对生物碱合成的影响。结果表明 :尽管在水母雪莲的愈伤组织培养物中 ,总生物碱的含量比原植株中的含量低 ,但其组成成分比原植物丰富 ,并且秋水仙碱的含量也比原植物高 。

藏药雪莲原植物水母雪莲及其混淆种类的ITS序列比较和分子鉴定

目的 比较藏药“雪莲”原植物水母雪莲及其混淆种类的 ITS序列 ,为分子序列鉴定提供参照系统。方法 利用 PCR扩增和 ABI377自动测序。结果 水母雪莲不同居群间的序列相同 ,与其混淆种类之间存在一定的分子序列差异。结论 ITS序列可正确鉴定水母雪莲与其混淆种类。

水母雪莲总黄酮和水母雪莲细胞培养物总黄酮对致炎大鼠血清中炎性因子的影响

目的:通过观察水母雪莲总黄酮、水母雪莲细胞培养物总黄酮对致炎大鼠血清中炎性因子的影响,探讨其抗炎机理。方法:采用角叉菜胶致足肿胀法造成大鼠炎症模型,观察水母雪莲细胞培养物总黄酮(C)和水母雪莲总黄酮(W)对致炎大鼠血清中炎症介质和细胞因子的影响。其中IL-1β用125I标记RIA试剂盒,PGE2含量用3H标记RIA试剂盒测定;NO含量用Griess法测定。结果:水母雪莲总黄酮、水母雪莲细胞培养物总黄酮各剂量组与模型组相比均可明显抑制IL-1β、NO、PGE2的分泌作用,P<0.01或P<0.05,二者组间无显著差异。结论:水母雪莲总黄酮、水母雪莲细胞培养物总黄酮对IL-1β、NO、PGE2的分泌均有抑制作用,二者无显著性差异,其抗炎作用的机理可能与此有关。

喂饲前体提高悬浮培养水母雪莲细胞的黄酮产量

为提高水母雪莲细胞悬浮培养的生物量及次级代谢产物黄酮的含量,在培养基中喂饲肉桂酸、乙酸钠和苯丙氨酸等三种黄酮生物合成前体,考察了它们对水母雪莲细胞TUIP-8悬浮培养的影响。在（17±1）℃环境中悬浮培养TUIP-8水母雪莲细胞,喂饲这三种前体均能显著促进雪莲黄酮的生物合成,并且对细胞的生长抑制效应较小。在接种时喂饲前体,低浓度添加肉桂酸（7.14mg/L）、乙酸钠（3.57mg/L）和苯丙氨酸（3.57mg/L）更有利于提高黄酮产量。培养后期喂饲前体的效果要好于接种时喂饲,其中17.85mg/L的乙酸钠对黄酮合成的促进作用最强,可使黄酮含量从7.8%提高至12.4%,黄酮产量可提高63%。在（25±1）℃环境中悬浮培养TUIP-8水母雪莲细胞,喂饲前体促进雪莲黄酮生物合成的效果不明显,与对照相比黄酮产量只提高5%-10%。反应器培养的雪莲细胞总黄酮含量可下降至8.5%,但在培养后期使用含有28mg/L乙酸钠、60mg/L苯丙氨酸的改进MS培养基,雪莲细胞的黄酮含量可恢复至11%,细胞密度可达到21g（干重）/L。在悬浮培养水母雪莲细胞过程中添加乙酸钠和苯丙氨酸等前体物质可以促进雪莲黄酮的合成。

雪莲对力竭性游泳小鼠行为和免疫功能的影响

目的 探讨雪莲对力竭性游泳小鼠行为和免疫功能的影响。方法 将小鼠进行力竭性游泳 ,以开场试验检测自主性行为、MTT法测定淋巴细胞转化和溶血空斑法测定抗体形成。结果 力竭性游泳对ConA诱导下的淋巴细胞增殖和抗体形成细胞数量有显著的抑制作用 ,力竭性游泳后小鼠活动时间、活动总路程和中区逗留时间均缩短。雪莲可显著对抗力竭性游泳引起的上述改变。结论 雪莲对力竭性游泳小鼠的疲劳现象、抑郁性行为和恐惧行为有改善作用 ,可能与其免疫调节功能有关。

水母雪莲两种再生系统的建立

Two kinds of regeneration system on \%Saussurea medusa \%Maxim. have been established. The shoots can be induced from cotyledons, leaf segments and somatic embryos at 25℃.The regeneration system by organic have advantages such as shorter period, higher efficiency, better synchronism and bigger average number of shoot than the others. The content of total flavonoids in shoots is 4 %, which is 3-4 times of it in wild type.

两种藏药雪莲花的元素测定

本文利用原子吸收分光光度法(AAS)和高频电感耦合等离子体发射光谱法(ICP AES)测定了苞叶雪莲和水母雪兔子两种不同的藏药雪莲花中的K、Na、Ca、Mg、Fe、Mn、Cu、Zn、Cr等9种生命无机元素和Pb、Cd等有害元素的含量,结果表明苞叶雪莲中K、Zn、Cu含量较高,水母雪兔子中Ca、Mn、Fe、含量较高,两者中Pb、Cd含量都极低,为进一步研究藏药雪莲的利用提供了重要的依据.

高效液相色谱法测定水母雪莲中东莨菪内酯、伞形花内酯的含量

用高效液相色谱法测定水母雪莲中东莨菪内酯、伞形花内酯的含量。色谱柱采用MerckLichrospher100RP-18e(250mm×4.0mm,5μm);流动相采用甲醇-四氢呋喃水溶液;检测波长为346nm。东莨菪内酯平均回收率为100.07%,RSD为1.42%;伞形花内酯平均回收率为99.41%,RSD为2.06%。本法简单、快速、准确,可用于水母雪莲的质量控制。

雪莲对大鼠耐缺氧能力、红细胞数及血红蛋白的影响

[目的 ]观察雪莲对实验大鼠耐缺氧能力和红细胞数及血红蛋白含量的影响。 [方法 ]Wistar雄性大鼠 80只 ,随机分成 8组 ,每组 10只 ,其中 4组分别用蒸馏水 (对照组 )和雪莲 160、3 2 5、65 0mg/ (kg·d)连续灌胃 10d ,测定大鼠密闭性缺氧存活时间 ;另外 4组经蒸馏水 (对照组 )和雪莲 80、160 3 2 0mg/ (kg·d) ,连续灌胃 10d ,分别测定大鼠外周血中红细胞数及血红蛋白含量。 [结果 ] 3 2 5及 65 0mg/ (kg·d)剂量组与对照组比较 ,缺氧存活时间均延长 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;160及 3 2 0mg/ (kg·d)剂量组与对照组比较 ,红细胞数均增多 (P <0 .0 1) ;各剂量组血红蛋白含量均较对照组增加 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。 [结论

水母雪莲化学成分的研究(Ⅱ)

前文已报道从水母雪莲(Saussurea Medusa Maxim)中分得4种黄酮甙,本文报道另外6种化合物的分离和鉴定。 1 化合物Ⅰ—Ⅳ物化性质及分离鉴定 1.1 化合物Ⅰ 黄色结晶,m.p.:249～251℃,水解所得甙元鉴定为木樨草素,纸层析检出鼠李糖和葡萄糖。MS(FAB):m/z 595(M^++1),287(M^++H-葡萄糖基-鼠李糖)。化合物I与木樨草素的^(13)C NMR比较,C_6、C_8、C_(10)分别向低场位移1.1、1.0、1.8 ppm,而C。

藏雪莲水母雪兔子中矿质元素的测定与分析

经HNO3/H2O2湿法微波消解制样,利用全谱直读电感耦合等离子原子发射光谱法(ICP-OES),分析测定了青藏高原地区产藏雪莲水母雪兔子中的矿质元素。结果显示,藏雪莲水母雪兔子中含有K、Ca、P、Mg、Al、S、Fe、Si、Na、Mn、Ti、Sr、Ba、B、Zn、Cu、Cr等17种矿质元素,定量分析结果相对标准偏差RSD值在0.60%～7.25%之间。与普通食物相比较,藏雪莲水母雪兔子中人体必需元素Ca、Mg、Fe、Mn的含量非常丰富,分别为1724.4 mg.(100 g)-1、386.5mg.(100 g)-1、165.5 mg.(100 g)-1、8.54 mg.(100 g)-1。分析结果可为藏雪莲水母雪兔子的相关研究提供参考。

雪莲对力竭性游泳小鼠肝肾保护作用的研究

目的探讨雪莲对力竭性游泳小鼠肝、肾的保护作用。方法将雄性BALB/C小鼠随机分成4组:安静对照组、安静雪莲组、运动对照组和运动雪莲组。分别用蒸馏水和50%雪莲煎剂连续灌胃10 d,每日清晨1次。两个运动组进行一次性力竭性游泳(约4 h),所有小鼠采集血清测丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、血氨(Ammo)、尿酸(UA)、肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)。结果运动对照组小鼠血清诸项生化指标明显升高,与安静对照组比较差异显著(P<0.01);运动雪莲组也有升高,与安静对照组比较差异显著(P<0.01),但与运动对照组比较下降明显,也存在显著差异(P<0.01)。结论雪莲对力竭性游泳过程中造成的小鼠肝、肾损伤有一定的保护作用。

雪莲对核辐射损伤作用的研究

研究了青海产雪莲对核辐射损伤小鼠免疫功能恢复的影响，结果表明：连续口服50％雪莲水煎剂20d，核辐射损伤小鼠的T，B淋巴细胞、巨噬细胞的功能和免疫细胞产生细胞因子的能力恢复明显，与对照组比较具有显著性差异，提示中药雪莲具有促进核辐射损伤修复的作用，为扩大该药的临床应用提供了科学依据。

水母雪莲对小鼠抗疲劳和抗氧化作用的实验研究

目的:通过观察青海产水母雪莲对力竭运动小鼠血液和组织相关抗疲劳指标的影响,探讨其抗疲劳和抗氧化作用。方法:将雄性BALB/C小鼠随机分为安静对照组,运动对照组,水母雪莲低、中、高剂量组,每组12只。水母雪莲组分别给予不同剂量(0.27、0.54及1.08 g.kg-1.d-1)的雪莲灌胃28 d后进行游泳实验,即将负重(负重量为自身体重的5%)小鼠放入游泳箱中,记录负重游泳时间并测定小鼠血液中的乳酸脱氢酶(LDH)、尿素(BUN)、血红蛋白(Hb)及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果:水母雪莲低、中、高剂量组与运动对照组相比,负重游泳时间显著延长(P<0.05),游泳后血液中Hb、肾组织中SOD含量明显增高(P<0.05,P<0.01),而血液中LDH、BUN和肾组织中MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。水母雪莲中、高剂量组与低剂量组比较,各项指标差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:水母雪莲具有增强小鼠运动耐力、抗疲劳和抗氧化的作用。

水母雪莲花中总黄酮的提取工艺及含量测定研究

本文采用水提法、有机溶剂提取法、超声波提取法提取水母雪莲花中黄酮化合物.以芦丁为对照品,对其进行络合显色,用紫外及可分光光度法测定水母雪莲粗提物中总黄酮的含量,回归方程为A=1.20932C-0.07937,r=0.9973.3种提取方法相比,超声波提取法提取总黄酮的含量高,更容易实现产业化生产.

水母雪莲中总黄酮及多糖的提取

目的从水母雪莲花中提取总黄酮及多糖。方法选取水母雪莲花1.2kg,用80%乙醇回流后得到的混合液,用石油醚去除脂溶性色素后得到乙酸乙酯萃取部分,经聚酰胺色谱柱分离富集得到总黄酮。药渣继用蒸馏水提取,醇沉后得到粗多糖,采用Sevag法除蛋白后得到灰白色的多糖。结果从水母雪莲花中得到总黄酮5.0g,多糖80.0g。结论本研究的水母雪莲花中总黄酮及多糖提取方法简便实用、可操作性强,适用于实验室大量制备。