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大鼠冠状动脉粥样硬化钙化组织与c-kit^(+)和sca-1^(+)细胞的关系研究
1
作者 孙攀文 郭永龙 +2 位作者 贾阳阳 孙昌业 郭志坤 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第4期453-458,共6页
目的探讨大鼠冠状动脉粥样硬化钙化区域sca-1、c-kit的表达变化,为进一步研究冠状动脉粥样硬化机制奠定细胞学基础。方法30只健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组(n=8)和动脉粥样硬化钙化模型组(n=22)。采用丙基硫氧嘧啶灌胃、高脂高胆... 目的探讨大鼠冠状动脉粥样硬化钙化区域sca-1、c-kit的表达变化,为进一步研究冠状动脉粥样硬化机制奠定细胞学基础。方法30只健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组(n=8)和动脉粥样硬化钙化模型组(n=22)。采用丙基硫氧嘧啶灌胃、高脂高胆固醇饲料喂养和维生素D3腹腔注射方法制备模型。模型制备成功后,通过免疫组织化学和免疫荧光技术观察sca-1、c-kit在模型组与正常组的大鼠冠状动脉组织中的表达变化。利用免疫荧光双标技术证明sca-1与α-SMA的共定位表达。利用western blotting技术检测模型组与正常组的冠状动脉组织c-kit、sca-1蛋白的表达差异。结果造模12周,大鼠冠状动脉管壁明显增厚,内膜明显增生,平滑肌纤维排列显著紊乱,坏死物质沉积、脂质沉积和钙结节沉淀。免疫组化和免疫荧光结果显示sca-1+细胞和c-kit^(+)细胞在动脉粥样硬化钙化区域的冠状动脉内膜、中膜、外膜中数量明显高于正常对照。病变区域的部分细胞存在sca-1与α-SMA的共表达。Western blotting结果显示动脉粥样硬化和钙化区域的c-kit、sca-1蛋白的表达量高于正常对照组。结论sca-1+细胞和c-kit^(+)细胞有向冠状动脉粥样硬化钙化区域迁移的倾向,其机制尚需研究。 展开更多
关键词 sca-1 C-KIT 动脉粥样硬化钙化 免疫组织化学 大鼠心脏
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Sca-1^+造血干/祖细胞重建致死剂量辐射小鼠造血功能的作用 被引量:10
2
作者 周玥 杨斌 +1 位作者 姚欣 王亚平 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第32期6015-6019,共5页
背景:近年来,造血干细胞移植在国内外已广泛开展,移植的造血干细胞能否有效重建造血成为造血干细胞移植领域的研究热点问题之一。目的:观察Sca-1+造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,Sca-1+HSC/HPC)对造血衰竭小鼠造血... 背景:近年来,造血干细胞移植在国内外已广泛开展,移植的造血干细胞能否有效重建造血成为造血干细胞移植领域的研究热点问题之一。目的:观察Sca-1+造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cell,Sca-1+HSC/HPC)对造血衰竭小鼠造血功能重建的作用。方法:雌性C57BL/6受体鼠给予致死剂量60Coγ射线照射后分2组,对照组:输注无菌PBS;移植组:移植免疫磁性分选法分离纯化的同系雄性C57BL/6小鼠Sca-1+HSC/HPC;检测受体鼠生存时间;外周血白细胞、红细胞比容、血小板的变化;脾湿质量及脾集落数;PCR检测Y染色体(Sry基因)表达确定受体小鼠重建造血的细胞来源。结果与结论:移植组受体鼠30d存活率、白细胞、红细胞比容、血小板、脾湿质量及脾集落数均明显高于对照组(P<0.05);Y染色体PCR分析,证实雌性受体小鼠重建造血的细胞来源于雄性供体。提示Sca-1+HSC/HPC移植后能重建造血衰竭小鼠造血功能。 展开更多
关键词 造血功能 sca-1+造血干/祖细胞 分离纯化 重建造血 小鼠
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金复康口服液抑制Lewis肺癌Sca-1^+干细胞亚群增殖的研究 被引量:15
3
作者 徐蔚杰 李春杰 +2 位作者 刘嘉湘 田建辉 李和根 《上海中医药杂志》 2015年第1期69-71,86,共4页
目的观察金复康口服液抑制肺癌干细胞增殖和成瘤性作用及其对耐药相关蛋白表达的影响。方法采用免疫磁珠法分选Lewis肺癌Sca-1+细胞,体外采用金复康含药血清进行干预,综合应用流式细胞术、免疫组化、免疫印迹法、RT-PCR等实验技术观察... 目的观察金复康口服液抑制肺癌干细胞增殖和成瘤性作用及其对耐药相关蛋白表达的影响。方法采用免疫磁珠法分选Lewis肺癌Sca-1+细胞,体外采用金复康含药血清进行干预,综合应用流式细胞术、免疫组化、免疫印迹法、RT-PCR等实验技术观察金复康口服液抑制Sca-1+干细胞亚群增殖的作用,以及逆转肺癌干细胞耐药性基因ABCG2和蛋白表达的作用。结果体外研究发现,金复康口服液可时间依赖性地抑制肺癌Sca-1+干细胞在体外的增殖(P<0.05);诱导肺癌Sca-1+干细胞发生凋亡;金复康口服液单独应用或者与化疗联合均可有效下调ABCG2基因的转录和蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论金复康口服液可显著抑制Lewis肺癌Sca-1+干细胞亚群增殖,其机制可能和抑制耐药相关蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 金复康口服液 肺癌sca-1^+干细胞 多耐药基因ABCG2
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胚胎小鼠肝脏Sca-1^+细胞横向分化的研究 被引量:3
4
作者 廖继东 张洹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1635-1639,共5页
目的 :研究和探索胚胎小鼠肝脏细胞的横向分化潜能。方法 :将 2× 10 3 C5 7BL/6j雄性胚胎小鼠的肝脏Sca- 1+ 细胞从尾静脉注射到受致死性γ射线 (10Gy ,60 Co)全身照射的同种成年雌性小鼠体内 ;于移植后 2个月 ,用荧光原位杂交和... 目的 :研究和探索胚胎小鼠肝脏细胞的横向分化潜能。方法 :将 2× 10 3 C5 7BL/6j雄性胚胎小鼠的肝脏Sca- 1+ 细胞从尾静脉注射到受致死性γ射线 (10Gy ,60 Co)全身照射的同种成年雌性小鼠体内 ;于移植后 2个月 ,用荧光原位杂交和免疫组织化学技术 ,检测雄性胚胎小鼠肝脏Sca - 1+ 细胞在雌性受体小鼠肾脏和脑组织内的分化情况。结果 :在雌性受体小鼠的肾脏和脑组织内 ,分别检测到Y染色体阳性的供体来源的肾小管上皮组织细胞样和神经组织细胞样的细胞 ,其细胞表型分别为RCA+ /CD-45F-4/ 80 和NueN+ /CD-45F-4/ 80 。结论 :胚胎小鼠肝脏Sca - 1+细胞具有向肾脏和脑组织细胞横向分化的能力。 展开更多
关键词 胎肝 sca-1^+ 细胞 分化
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胎肝Sca-1^+细胞在体外向神经元分化研究(英文) 被引量:3
5
作者 刘革修 张洹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期1178-1181,T002,共5页
目的 :观察胚胎肝Sca - 1+细胞能否在体外向神经组织细胞分化。方法 :免疫磁珠法分离孕 14 5dC5 7BL/6J小鼠的胚胎肝的Sca - 1+细胞 ,以DMEM/F12 + 10 %胎牛血清培养液培养 ,当细胞融合达 80 % ,按 1∶3比例传代。第 5代细胞用BME和RA... 目的 :观察胚胎肝Sca - 1+细胞能否在体外向神经组织细胞分化。方法 :免疫磁珠法分离孕 14 5dC5 7BL/6J小鼠的胚胎肝的Sca - 1+细胞 ,以DMEM/F12 + 10 %胎牛血清培养液培养 ,当细胞融合达 80 % ,按 1∶3比例传代。第 5代细胞用BME和RA先后诱导 2 4h ,再用无血清培养基培养 5h至 5d。免疫细胞化学检测细胞特点。结果 :胚胎肝Sca - 1+细胞经诱导后表现神经元形态 ,并表达神经元特异蛋白如神经元特异性核蛋白 (NeuN)、神经丝蛋白M、神经元特异性微管蛋白 1(TuJ- 1) ,但是无微管相关蛋白Tau、MAP - 2和星形胶质细胞特异酸性蛋白 (GFAP)表达。结论 :胚胎肝Sca- 1+细胞 (主要为造血干细胞 )具有可塑性 ,在体外能分化为早期未成熟的神经元样细胞。 展开更多
关键词 胎儿肝脏 神经元 小鼠 sca-1^+细胞
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胎肝Sca-1^+细胞移植造血重建 被引量:2
6
作者 刘革修 张洹 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2002年第6期1-6,共6页
 目的:观察胚胎肝Sca-1+细胞能否重建造血。方法:免疫磁珠法分离孕14 5dC57BL/6J小鼠的雄性胚胎肝的Sac-1+细胞,经尾静脉注射(细胞数为2 0×103/只)移植到致死剂量(10 0Gy)放射线照射的8~10周C57BL/6J雌性小鼠;sry基因PCR方法检...  目的:观察胚胎肝Sca-1+细胞能否重建造血。方法:免疫磁珠法分离孕14 5dC57BL/6J小鼠的雄性胚胎肝的Sac-1+细胞,经尾静脉注射(细胞数为2 0×103/只)移植到致死剂量(10 0Gy)放射线照射的8~10周C57BL/6J雌性小鼠;sry基因PCR方法检测受体小鼠外周血中供体来源的血细胞。结果:移植胚胎肝Sca-1+细胞的实验组小鼠外周血各种血细胞数在5d后开始下降,在10d后开始上升,20d恢复至正常,均存活6个月以上;而未移植Sca-1+造血干细胞的对照组小鼠20d内全部死亡。多聚酶链式反应(PCR)显示实验组小鼠外周血细胞sry基因检测阳性,未移植对照组小鼠外周血细胞sry基因检测均为阴性;随着移植时间的延长,移植小鼠外周血细胞sry基因的PCR扩增物量增加,说明雄性胚胎供体来源的细胞在增加,反映造血重建情况。结论:胚胎肝Sca-1+细胞能重建致死剂量放射线照射的小鼠造血功能。 展开更多
关键词 胚胎肝 sca-1^+细胞 造血干细胞 造血重建 小鼠
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小鼠胎肝Sca-1^+细胞分化为心肌细胞的研究 被引量:1
7
作者 姜铧 张洹 廖继东 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期371-375,共5页
目的:探讨小鼠胎肝组织中干细胞抗原1阳性的细胞(Sca 1+细胞)向心肌细胞分化的潜能。方法:取妊娠14.5 d的小鼠胎肝,制作细胞悬液,用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca 1+细胞,PCR鉴别Y染色体性别决定区域(Sry)基因序列;将2×103 ... 目的:探讨小鼠胎肝组织中干细胞抗原1阳性的细胞(Sca 1+细胞)向心肌细胞分化的潜能。方法:取妊娠14.5 d的小鼠胎肝,制作细胞悬液,用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca 1+细胞,PCR鉴别Y染色体性别决定区域(Sry)基因序列;将2×103 个雄性小鼠Sca 1+细胞输注给经致死剂量60Co(10 Gy)全身照射的雌性小鼠体内,于移植后2个月,处死受体小鼠,取心肌组织固定、制片,免疫组织化学染色和荧光原位杂交检测雌性受体小鼠心肌组织内供体小鼠胎肝Sca 1+细胞向心肌细胞分化的情况。结果:在受体小鼠心肌组织内发现存在Y染色体阳性的供体来源的细胞,呈现心肌组织的部分特征,表型为Desmin+/Flt 1-/CD45-/F-4/80。结论:小鼠胎肝Sca 1+细胞(其中绝大部分是造血干细胞)具有向心肌组织细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 胎肝 sca-1^+细胞 细胞分化 心肌组织
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小鼠胎肝Sca-1^+细胞分化为骨骼肌细胞 被引量:1
8
作者 姜铧 张洹 廖继东 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2004年第6期672-676,共5页
探讨小鼠胚胎肝组织中干细胞抗原 1阳性的细胞 (Sca 1+ 细胞 )向骨骼肌细胞分化的潜能。取 14 5d的小鼠胎肝 ,制作细胞悬液 ;用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca 1+ 细胞 ;用PCR鉴别Y染色体性别决定区域 (SRY)基因序列 ;将 2× ... 探讨小鼠胚胎肝组织中干细胞抗原 1阳性的细胞 (Sca 1+ 细胞 )向骨骼肌细胞分化的潜能。取 14 5d的小鼠胎肝 ,制作细胞悬液 ;用单克隆免疫磁珠细胞分离技术分离Sca 1+ 细胞 ;用PCR鉴别Y染色体性别决定区域 (SRY)基因序列 ;将 2× 10 3 个雄性小鼠Sca 1+ 细胞输注给经致死剂量 (10Gy) 60 钴全身照射的雌性小鼠体内 ;于移植后 2个月 ,处死受体小鼠 ,取骨骼肌组织固定、制片 ;用免疫组织化学染色和荧光原位杂交检测雌性受体小鼠骨骼肌组织内供体小鼠胎肝Sca 1+ 细胞向骨骼肌细胞分化情况。结果在骨骼肌组织内发现存在Y染色体阳性的供体来源的细胞 ,同时呈现骨骼肌组织的部分特征 ,表型为Dystrophin+ /Flt 1-/CD4 5 -F4 / 80 -。提示小鼠胎肝Sca 1+ 细胞 (其中绝大部分是造血干细胞 )具有向骨骼肌组织细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 sca-1^+细胞 胎肝 骨骼肌组织 小鼠 骨骼肌细胞 分化 阳性 Y染色体 雌性 性别决定
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胎肝来源Sca-1^+细胞在体内分化为神经细胞研究 被引量:1
9
作者 刘革修 张洹 +1 位作者 刘革修 张洹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期354-358,共5页
目的:为了了解胎肝干细胞是否具有向神经组织细胞分化的潜能。方法:PCR检测sry基因分析孕14.5d胚胎鼠性别;采用免疫磁珠法分离雄性胎鼠肝的Sca-1^+细胞,尾静脉注射Sca-1^+细胞(2.0×10~3个/小鼠)到致死剂量放射线照射的雌性小鼠。移... 目的:为了了解胎肝干细胞是否具有向神经组织细胞分化的潜能。方法:PCR检测sry基因分析孕14.5d胚胎鼠性别;采用免疫磁珠法分离雄性胎鼠肝的Sca-1^+细胞,尾静脉注射Sca-1^+细胞(2.0×10~3个/小鼠)到致死剂量放射线照射的雌性小鼠。移植60、120、180 d后采用免疫组化和FISH双染色检测受体小鼠脑组织中供体来源细胞特性。结果:受体雌鼠脑组织内存在大最Y染色体阳性细胞。免疫组化分析显示,部分Y染色体阳性细胞表达神经组织特异标志,如神经元核特异蛋白(NeuN,Neuron-specific nuclei protein)、部分Y染色体阳性细胞表达星形胶质细胞特异标志,如胶质纤维酸性蛋白(GFAP,Glial fibrillary acidic protein)等。结论:移植的胎肝Sca-1^+细胞,含造血干细胞,能分化成神经细胞和星形胶质细胞。 展开更多
关键词 分化 胎肝 神经元 sca-1^+细胞
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Sca-1+心脏干细胞移植治疗缺血性心脏病研究进展与面临挑战 被引量:1
10
作者 马玉龙 李树仁 《中国心血管病研究》 CAS 2015年第11期961-965,共5页
1 引言传统观点认为,心脏属于有丝分裂后期的器官,无再生和自我修复能力,在负荷量增大或疾病代偿时,通过细胞肥大来适应。因此,心脏受损后心肌组织被瘢痕组织替代从而导致心脏收缩功能障碍,引起心功能不全。
关键词 sca-1+心脏干细胞 干细胞 心肌梗死 缺血性心脏病
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胚胎造血干Sca-1^+细胞向肝细胞分化的研究 被引量:1
11
作者 缪辉来 张晟晃 +2 位作者 陈念平 陈明 郑淑华 《广东医学院学报》 2007年第6期605-608,613,共5页
目的探讨胚胎造血干细胞抗原阳性(Sca-1^+)细胞亚群在合适的体外诱导体系下向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞,相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR法检测细胞白蛋白(ALB)、转甲状腺蛋白mRNA水平表达,免... 目的探讨胚胎造血干细胞抗原阳性(Sca-1^+)细胞亚群在合适的体外诱导体系下向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞,相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR法检测细胞白蛋白(ALB)、转甲状腺蛋白mRNA水平表达,免疫组织化学法检测AFP和CK8/18蛋白水平的表达,以及检测细胞糖原染色和尿素合成功能。结果免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞能达到(85.57±1.66)%的纯度(P<0.01),对分离前后细胞活力的影响小(P<0.05)。随着诱导分化时间延长,细胞形态明显向肝细胞变化,AFP表达消失、CK8/18蛋白表达升高,ALB、转甲状腺蛋白mRNA表达升高,且细胞糖原染色和尿素合成功能增强,逐渐向成熟肝细胞转化。结论免疫磁性分离法能够分离出较高纯度的胚胎造血干Sca-1^+细胞,并能够向肝脏细胞分化。 展开更多
关键词 sca-1^+细胞 肝细胞 免疫磁性分离法 鉴定 分化
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组织辐射损伤与胎肝Sca-1阳性细胞的移植后分布
12
作者 廖继东 张洹 姜铧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期577-581,共5页
目的:探讨在同种异体造血重建中组织辐射损伤与胎肝Sca-1+细胞及其子代细胞移植后在不同组织器官分布差异的联系。方法:用快速PCR和免疫磁珠分选技术鉴定并分离14.5 d雄性胚胎小鼠肝脏Sca-1+细胞;将分离的Sca-1+细胞(2×104细胞/只... 目的:探讨在同种异体造血重建中组织辐射损伤与胎肝Sca-1+细胞及其子代细胞移植后在不同组织器官分布差异的联系。方法:用快速PCR和免疫磁珠分选技术鉴定并分离14.5 d雄性胚胎小鼠肝脏Sca-1+细胞;将分离的Sca-1+细胞(2×104细胞/只)通过尾静脉输入到受[Co60]致死剂量(8Gy只/)照射的同系成年雌性小鼠体内,重建受体小鼠的造血功能;在输入细胞6个月后,处死受体小鼠,取出肾、肝、肺、胃和小肠组织固定制片;用Y染色体探针进行荧光原位杂交、荧光显微图像系统观察、摄像和分析。结果:输入2×104细胞/只的雄性胎肝Sca-1+细胞可完全重建经致死剂量照射雌性小鼠的造血功能;造血重建半年后,在受体小鼠的肾、肝、肺、胃和小肠等多个器官组织内可检出含Y染色体的细胞,显微图像计数各器官组织切片中含Y染色体细胞率分别为:肾脏(1.65±0.18)%、肝脏(0.90±0.10)%、肺(1.90±0.60)%、胃(6.10±0.50)%和小肠(7.61±2.30)%。各组织中含Y染色体细胞的检出率呈小肠>胃>肺>肾>肝的趋势,结合资料分析显示与各组织对辐射的敏感性强弱及组织细胞更新率大小基本一致。结论:胎肝Sca-1+细胞向各组织细胞的分化与组织器官受损程度可能存在一定的联系。 展开更多
关键词 胎儿肝 sca-1^+细胞 造血重建 辐射损伤 移植 小鼠
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新生小鼠Sca-1^+心脏干细胞的分离与鉴定
13
作者 韦静 吴成强 桂春 《广西医科大学学报》 CAS 2018年第5期648-651,共4页
目的:分离、纯化新生小鼠干细胞抗原-1(Sca-1)阳性心脏干细胞,观察其特异性标记物。方法 :将新生小鼠的心脏剪碎后用Ⅱ型胶原酶及胰酶反复消化。组织法培养10~14d后结合免疫磁珠进行阳性分选出Sca-1^+心脏干细胞。分选纯化后的细胞通过... 目的:分离、纯化新生小鼠干细胞抗原-1(Sca-1)阳性心脏干细胞,观察其特异性标记物。方法 :将新生小鼠的心脏剪碎后用Ⅱ型胶原酶及胰酶反复消化。组织法培养10~14d后结合免疫磁珠进行阳性分选出Sca-1^+心脏干细胞。分选纯化后的细胞通过流式细胞术和免疫荧光的方法进行Sca-1的鉴定,并通过免疫荧光的方法鉴定心源性转录因子GATA-4和Nkx-2.5的相关蛋白。结果:组织培养和磁珠分选法结合成功分离并纯化了小鼠Sca-1^+心脏干细胞。分选后流式结果显示Sca-1^+心脏干细胞可达(62.8±1.3)%。免疫荧光显示Sca-1、GATA-4及Nkx-2.5均为阳性表达。结论:组织培养结合磁珠分选能成功分离纯化新生小鼠Sca-1^+心脏干细胞,且能稳定培养。细胞表达心源性转录因子相关蛋白GATA-4及Nkx-2.5。 展开更多
关键词 新生小鼠 sca-1+心脏干细胞 干细胞抗原1 磁珠分选 流式细胞术 鉴定
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Sca-1,CD24和Muc1在雌性大鼠乳腺中的分布
14
作者 陈金拳 王加林 +1 位作者 赵亚萍 周玮 《生物医学工程研究》 2008年第3期214-216,共3页
研究Sca-1(stemcell antigen-1,干细胞抗原),CD24和Muc1(Mucin1)在雌性大鼠乳腺中的分布。制备6周、9周、孕15 d、产后3 d SD(Sprague-Dawley)雌性大鼠乳腺标本切片(4μm),运用免疫组化酶标法对乳腺中Sca-1,CD24,Muc1进行单标记;用West... 研究Sca-1(stemcell antigen-1,干细胞抗原),CD24和Muc1(Mucin1)在雌性大鼠乳腺中的分布。制备6周、9周、孕15 d、产后3 d SD(Sprague-Dawley)雌性大鼠乳腺标本切片(4μm),运用免疫组化酶标法对乳腺中Sca-1,CD24,Muc1进行单标记;用Western免疫印迹法检测Sca-1,CD24及Muc1在6周、9周、孕15 d、产后3 d大鼠乳腺中的含量变化。结果表明:Sca-1、CD24、Muc1在6周、9周、孕15 d、产后3 d SD雌性大鼠乳腺中不同部位有不同程度的分布。乳腺祖细胞标记物Sca-1在乳腺静止期的6周、9周分布较多,孕15 d以及产后3 d分布减少,提示一部分细胞转化为成熟的乳腺细胞;乳腺干细胞标记物CD24在乳腺发育的静止期及孕期数量较为稳定;成熟乳腺上皮细胞Muc1在乳腺静止期的6周、9周分布较少,孕期及产后随着乳腺的发育,乳腺上皮细胞的增殖,成熟乳腺上皮细胞逐渐增多。 展开更多
关键词 sca-1 CD24 MUC1 乳腺 干细胞
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小鼠腹白线组织中Sca-1^+成体干细胞的分布 被引量:4
15
作者 郝宇卉 刘志贞 +2 位作者 刘丹 冯玉娟 解军 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2672-2677,共6页
背景:干细胞与经络的关系目前还停留在理论探讨阶段,亟需通过实验进行科学研究。目的:通过实验观察小鼠腹白线脂肪组织Sca-1^+成体干细胞的分布情况,为进一步探讨干细胞与任脉的关系提供实验基础。方法:选取Balb/c小鼠,通过体视显微镜... 背景:干细胞与经络的关系目前还停留在理论探讨阶段,亟需通过实验进行科学研究。目的:通过实验观察小鼠腹白线脂肪组织Sca-1^+成体干细胞的分布情况,为进一步探讨干细胞与任脉的关系提供实验基础。方法:选取Balb/c小鼠,通过体视显微镜、苏木精-伊红染色观察小鼠皮下胸部前正中线任脉循行部位组织形态特点。以任脉在腹部的体表标志——腹白线为研究对象,通过体视显微镜、苏木精-伊红染色、油红O染色、Masson染色观察小鼠腹白线组织形态特点;通过免疫组织化学染色、多层切片观察小鼠腹白线脂肪组织Sca-1^+成体干细胞分布情况。结果与结论:①首次观察到脂肪组织呈条带状分布于小鼠皮下前正中线任脉循行部位;②首次观察到小鼠腹白线由脂肪组织构成;③首次观察到Sca-1^+成体干细胞沿小鼠任脉在腹部的体表标志——腹白线分布;④该实验只对任脉腹白线段Sca-1^+成体干细胞进行了观察,是在一个小范围的尝试,但这一尝试有可能为探讨任脉功能与干细胞功能提供实验基础与思路。 展开更多
关键词 干细胞 成体干细胞 脂肪组织 腹白线 任脉 sca-1+成体干细胞 国家自然科学基金
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成体小鼠心脏Sca-1^+细胞体外分化潜能的实验研究 被引量:3
16
作者 王浩 陈浩 +1 位作者 张海波 周春霞 《中国临床医学》 2016年第5期563-569,共7页
目的:研究成体小鼠心脏Sca-1^+细胞体外诱导分化的潜能。方法:利用免疫磁珠分选法分离成体小鼠心脏Sca-1^+细胞,通过BMP-2/FGF-4,TGF-β1及VEGF165等三种不同的体外诱导方法使其向心脏"三系"分化,并从细胞形态的变化、RT-PCR... 目的:研究成体小鼠心脏Sca-1^+细胞体外诱导分化的潜能。方法:利用免疫磁珠分选法分离成体小鼠心脏Sca-1^+细胞,通过BMP-2/FGF-4,TGF-β1及VEGF165等三种不同的体外诱导方法使其向心脏"三系"分化,并从细胞形态的变化、RT-PCR和免疫荧光染色等方面鉴定其分化潜能。结果:经BMP-2/FGF-4诱导,小鼠心脏Sca-1^+细胞发生形态改变,上调心肌细胞特征基因α-MHC、β-MHC、MLC-2a和MLC-2v的mRNA表达,同时表达心肌特征性蛋白cTNT和cMHC。经TGF-β1诱导,小鼠心脏Sca-1^+细胞亦发生形态改变,上调平滑肌特征基因α-SMA和Calponin的mRNA表达,同时表达平滑肌特征性蛋白SMA、sMHC和Calponin的表达。经VEGF165诱导,小鼠心脏Sca-1^+细胞同样发生了形态改变,上调内皮细胞特征基因CD31、vWF和VE-Cadherin的mRNA表达,同时表达内皮细胞特征性抗原CD31。结论:成体小鼠心脏Sca-1^+细胞在体外多种因素的分别作用下,能向心肌样细胞、平滑肌样细胞和内皮样细胞分化,具有心脏干细胞特性的多向分化潜能。 展开更多
关键词 sca-1 心脏 干细胞 诱导分化
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负载抗sca-1抗体和碱性成纤维细胞生长因子的脱细胞膀胱基质的生物性能研究 被引量:1
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作者 李建奎 梁志清 徐惠成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2176-2181,共6页
目的观察负载抗sca-1抗体(anti-sca-1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)-脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)生物支架的生物学性能,探讨其作为新型盆底修复材料的可能性。方法通过双特异性化... 目的观察负载抗sca-1抗体(anti-sca-1)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)-脱细胞膀胱基质(urinary bladder matrix,UBM)生物支架的生物学性能,探讨其作为新型盆底修复材料的可能性。方法通过双特异性化学交联试剂4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐(sulfosuccinimidyl 4-[N-maleimidomethyl]cyclohexane-1-carboxylate,sulfosmcc)将anti-sca-1和b FGF特异性结合到UBM上,得到anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架。通过扫描电子显微镜观察生物支架表面结构,CCK-8(cell counting kit-8)间接检测体外富集sca-1阳性细胞情况,免疫荧光观察支架诱导小鼠骨髓间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,m MSCs)分化成熟情况。结果扫描电子显微镜显示anti-sca-1和b FGF能特异性的结合到UBM上。anti-sca-1和b FGF组荧光强度明显高于对照组(P<0.05)。anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架富集的sca-1阳性细胞明显较对照组多(P<0.05)。免疫荧光观察结果提示anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架可以促进m MSCs向平滑肌细胞分化。结论 anti-sca-1/b FGF-UBM生物支架显示出了良好的生物性能,既能富集sca-1阳性细胞,又能进一步促进细胞分化成熟。 展开更多
关键词 sca-1抗体 碱性成纤维细胞生长因子 脱细胞膀胱基质 生物支架 生物性能
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乳鼠心脏Sca-1^+干细胞定向分化的诱导研究 被引量:1
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作者 李呈轶 陈思宇 +3 位作者 赵栩进 李锦卉 胡燕玲 左琳 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第8期1029-1036,共8页
目的研究抗坏血酸(ascorbic acid,AA)即维生素C(vitamin C,Vc)、地塞米松(dexamethasone,DXMS)及促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对Sca-1+干细胞分化为心肌细胞的定向诱导作用。方法急性分离并培养C57BL/6J乳鼠心脏来源的Sca-1+干... 目的研究抗坏血酸(ascorbic acid,AA)即维生素C(vitamin C,Vc)、地塞米松(dexamethasone,DXMS)及促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对Sca-1+干细胞分化为心肌细胞的定向诱导作用。方法急性分离并培养C57BL/6J乳鼠心脏来源的Sca-1+干细胞至第3代或第4代,培养基中分别加入抗坏血酸、地塞米松及EPO,以不同的诱导方案促使其分化,分组如下:空白对照组、DMSO对照组、Vc诱导组、DXMS诱导组、EPO诱导组、Vc及DXMS联合诱导组。干细胞在不同诱导剂作用下持续培养3周,期间利用光镜观察细胞形态改变;第3周时进行Nkx2.5和cTnI免疫荧光染色来判断干细胞的分化效率。结果光镜观察显示,Sca-1+干细胞在抗坏血酸、地塞米松及EPO的诱导下,均有不同程度向心肌细胞分化的形态学变化。免疫荧光染色结果显示,分化细胞中的心肌细胞特异性标记物cTnI及Nkx2.5的阳性率均低于50%,其中cTnI阳性率分别为:空白对照组(9.41±1.67)%、DMSO对照组(10.42±3.20)%、Vc诱导组(14.84±1.99)%、DXMS诱导组(10.68±2.27)%、EPO诱导组(8.64±2.98)%、Vc及DXMS联合诱导组(44.27±22.91)%。与空白对照组相比,仅联合诱导组cTnI表达水平明显上调[(9.41±1.67)%vs(44.27±22.91)%,P<0.05],其余各组与空白对照组相比差异均无统计学意义。Nkx2.5在各组的阳性率较低,Vc及DXMS联合诱导组仅为(0.05±0.02)%,其余各组阳性率均低于该水平。结论抗坏血酸、地塞米松及EPO在Sca-1+干细胞分化为心肌细胞的过程中有一定的诱导作用,其中,抗坏血酸和地塞米松联合诱导组可在较高水平上诱导Sca-1+干细胞分化为心肌细胞。 展开更多
关键词 sca-1+干细胞 分化 抗坏血酸 地塞米松 促红细胞生成素
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小鼠c-Kit和Sca-1阳性干细胞的多器官年龄分布特征
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作者 周密 李端端 +5 位作者 吕定超 石山慧 马秀霞 李燕楠 陈思宇 左琳 《医学研究杂志》 2018年第12期50-54,共5页
目的本研究旨在研究c-Kit和Sca-1两种干细胞亚型在小鼠多脏器的年龄分布规律,为后续进行相关组织的干细胞抗损伤研究奠定基础。方法选取C57/BL6雄性成年小鼠(3月龄、6月龄、9月龄),分离其骨髓、肝脏、肾脏、肺及胰腺组织,采用组织块酶... 目的本研究旨在研究c-Kit和Sca-1两种干细胞亚型在小鼠多脏器的年龄分布规律,为后续进行相关组织的干细胞抗损伤研究奠定基础。方法选取C57/BL6雄性成年小鼠(3月龄、6月龄、9月龄),分离其骨髓、肝脏、肾脏、肺及胰腺组织,采用组织块酶解法分选各脏器中直径小于30μm的细胞,用CD45、c-Kit及Sca-1荧光抗体标记细胞,流式细胞仪记录CD45^-c、-Kit^+以及CD45^-Sca^-1^+细胞百分比。结果在小鼠骨髓中,CD45^-c-Kit^+细胞数显著多于CD45^-Sca-1^+(P<0.05);而在肝、肾、肺和胰腺组织中,CD45^-Sca^-1^+的细胞数量远多于CD45^-c-Kit^+干细胞(P <0.05)。除胰腺组织,9月龄CD45^-Sca-1^+的细胞数目较3、6月龄有所升高外,其他组织中干细胞的年龄分布趋势差异不显著(P>0.05)。结论 CD45^-c-Kit^+和CD45^-Sca-1^+两种干细胞亚型在小鼠多脏器中均有存在,尤其是数量上占据优势的CD45^-Sca-1^+干细胞可能在多数器官的发育及修复中发挥重要作用。 展开更多
关键词 干细胞 C-KIT sca-1 分布
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微小膜壳绦虫感染对ICR小鼠小肠LY6A(Sca-1)及IFN-γ、STAT1表达的影响
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作者 赵敬 杨汉蕾 +1 位作者 陈素素 牟荣 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期611-617,共7页
目的探讨微小膜壳绦虫感染ICR小鼠小肠组织中LY6A及IFN-γ、STAT1的表达情况。方法采集微小膜壳绦虫成虫标本并收集虫卵制作悬液。将ICR小鼠随机分为对照组和实验组,实验组以定量1 000个/只虫卵灌胃感染,于感染后第2 d和第8 d按照编号... 目的探讨微小膜壳绦虫感染ICR小鼠小肠组织中LY6A及IFN-γ、STAT1的表达情况。方法采集微小膜壳绦虫成虫标本并收集虫卵制作悬液。将ICR小鼠随机分为对照组和实验组,实验组以定量1 000个/只虫卵灌胃感染,于感染后第2 d和第8 d按照编号处死小鼠获取小肠组织。采用HE染色进行小肠组织病理学观察,RT-PCR技术检测LY6A、IFN-γ和STAT1的mRNA相对表达量,免疫组织化学技术检测小肠中LY6A蛋白阳性细胞的表达,并用PRM技术对LY6A蛋白和STAT1蛋白进行相对丰度定量。结果 HE染色结果显示感染后第8 d在肠腔内发现成虫节片,并且虫体寄生处出现急性炎症反应。RT-PCR检测显示感染第2 d实验组LY6A(t=12.57,P<0.001)和STAT1(t=12.13,P<0.001)的mRNA相对表达量低于对照组,而IFN-γ的mRNA相对表达量高于对照组(t=7.78,P<0.01);感染后第8 d实验组LY6A(t=10.01,P<0.001)和STAT1(t=11.19,P<0.001)的mRNA相对表达量高于对照组;而IFN-γ的mRNA相对表达量低于对照组(t=26.47,P<0.001)。免疫组化结果显示感染后第2 d实验组LY6A阳性细胞百分比高于对照组(t=4.26,P<0.01),感染后第8 d实验组LY6A蛋白阳性细胞百分比高于对照组(t=8.18,P<0.001)。PRM检测结果显示感染后第2 d实验组LY6A蛋白相对表达量低于对照组(t=6.55,P<0.05),实验组STAT1蛋白与对照组相比无统计学差异,感染后第8 d实验组LY6A蛋白(t=4.95,P<0.05)和STAT1(t=2.91,P<0.05)蛋白的相对表达量均高于对照组。结论微小膜壳绦虫感染ICR小鼠小肠后LY6A(Sca-1)的mRNA水平和蛋白水平在幼虫侵入早期呈低表达,成虫期呈高表达;IFN-γ对LY6A的表达不起主导作用,而STAT1可能对LY6A(Sca-1)的表达起诱导作用。 展开更多
关键词 微小膜壳绦虫 LY6A/sca-1 ICR小鼠 IFN-Γ STAT1
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