拉萨裂腹鱼胚胎适宜孵化水温研究

为探索拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)胚胎适宜孵化水温,提高胚胎受精率和孵化率,降低初孵仔鱼畸形率,设置5℃、9℃、12℃、14℃、16℃、18℃、20℃、22℃共8个温度梯度进行拉萨裂腹鱼鱼卵孵化实验,统计各温度下的胚胎发育速度、鱼卵受精率和孵化率、初孵仔鱼畸形率及形体指标。结果显示,拉萨裂腹鱼胚胎卵裂期发育最快,到囊胚期、原肠期、器官分化期及出膜期,每个发育时期积累时间逐渐增长;随温度的升高,胚胎发育时间缩短,发育速度加快。各温度条件下,胚胎发育时期与孵化时间均呈幂函数关系,孵化积温随温度升高呈现逐渐降低的趋势。水温9~18℃的鱼卵受精率较高,均超过90%;水温12~16℃的孵化率较高,均超过95%;水温9~16℃的鱼苗畸形率较低,均低于4%。初孵仔鱼全长与孵化温度呈二次多项式函数关系;不同水温的初孵仔鱼体高没有显著性差异,但卵黄囊体积先升高、后降低、再升高。研究表明,适当提高孵化水温能缩短胚胎孵化周期,但水温过高会影响胚胎孵化率,增加初孵仔鱼畸形率,影响仔鱼对营养物质的吸收利用以及器官发育分化。综合考虑胚胎孵化周期、孵化率、初孵仔鱼畸形率及形体指标,拉萨裂腹鱼胚胎适宜孵化水温为12~16℃。

拉萨裂腹鱼人工繁殖初探

为探索拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)人工规模化繁殖技术,于2019年4月获得4批拉萨裂腹鱼亲本,鱼卵能自然流出的直接进行人工繁殖,不能自然流出的采用DOM+LHRH-A2进行人工催产,统计催产率、产卵量、受精率和孵化率。结果显示:自然产卵亲本体重(1643±395)g,体长(51.64±3.08)cm,60组,共计产卵77.58万粒,受精率(85.10±11.13)%,孵化率(85.75±20.89)%。人工催产雌鱼体重(1574±375)g,体长(50.79±3.63)cm,催产率90.36%。雌鱼总产卵量93.29万粒,受精率(79.07±16.14)%,孵化率(87.86±24.80)%,雌鱼催产效应时间72~96 h。随着人工催产时间增加,雄鱼精液量及4℃下有效保存时间均呈先升高后降低趋势,且在第2天精液量最多,4℃下有效保存时间最长,催产第3天后,精液量和有效保存时间均显著降低。结果表明,采用DOM和LHRH-A2组合对拉萨裂腹鱼进行人工催产,可获得较高的催产率、受精率和孵化率;自然成熟鱼卵受精率较人工催产受精率高,产卵量较人工催产低;拉萨裂腹鱼雄鱼最佳催产效应时间为2 d。

3种淡水鱼肌肉脂质的组成及营养评价

以拉萨河拉萨裸裂尻鱼(Schizopygopsis younghusbandi)、拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)、双须叶须鱼Ptychobarbus dipogon)为材料,研究了其肌肉中脂质的组成和含量。结果显示:10种含量最丰富的脂肪酸分别是饱和脂肪酸16∶0和18∶0;单不饱和和脂肪酸16∶1n-9、18∶1n-9和18∶1n-7;n-3型多不饱和脂肪酸20∶5n-3,22∶5n-3和22∶6n-3和n-6型多不饱和脂肪酸18∶2n-6和20∶4n-6。结果表明拉萨河鱼类的脂肪酸模型跟深海鱼类相似,而且n-3型多不饱和脂肪酸的含量相对较高。

拉萨裂腹鱼的胚胎及仔稚鱼发育特征

为探明拉萨裂腹鱼Schizothorax waltoni Regan的早期发育阶段特征和规律,采用显微观察法,对其胚胎及仔鱼发育各时期的形态特征和发育特点进行了研究。结果表明:拉萨裂腹鱼受精卵呈圆形、黄色,卵径为(2.53±0.10)mm;拉萨裂腹鱼胚胎发育水温不宜超过17℃,在(13±1)℃水温下,拉萨裂腹鱼胚胎发育历时225 h 10 min,积温为2838.79 h·℃,根据发育时胚胎的外部形态特征,将胚胎发育的过程划分为受精卵期、胚盘期、卵裂期、囊胚期、原肠期、神经胚期、器官分化期和出膜期8个阶段,33个时期;出膜仔鱼全长为(10.71±0.28)mm,出膜后11 d,仔鱼的鳃、口、胸鳍、尾鳍、鳔、肠道等功能器官先后形成,出膜23 d后卵黄囊消失,全长为(18.35±0.65)mm,出膜70 d时各鳍基本长成,体型和体色接近成鱼,进入幼鱼阶段。研究表明,拉萨裂腹鱼的早期发育特征与其生存的环境具有一定的适应性。

不同饵料对3种西藏鱼类仔鱼生长及存活的影响

研究了卤虫无节幼体、专用仔鱼料、鳗鱼仔鱼料等3种不同饵料对西藏尖裸鲤(Oxygymnocypris stewartii)、异齿裂腹鱼(Schizothorax o'connori Lloyd)、拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni Regan)等3种鱼类仔鱼生长和存活的影响。实验尖裸鲤、异齿裂腹鱼、拉萨裂腹鱼仔鱼的初始全长分别为(13.29±0.52)mm、(12.29±0.44)mm、(15.81±0.50)mm,实验周期分别为25 d、25 d、15 d。结果表明:与其他饵料组相比,投喂专用仔鱼料组,异齿裂腹鱼仔鱼和拉萨裂腹鱼仔鱼的平均全长、全长增加倍数以及存活率均高于其他各组,并有显著差异;尖裸鲤仔鱼的平均全长和全长增长倍数也高于其他各组,但存活率较投喂卤虫无节幼体低,并有显著差异。

雅鲁藏布江拉萨裂腹鱼、异齿裂腹鱼及其自然杂交种的形态与COI基因条形码分析

2015年5月,在西藏雅鲁藏布江中游的桑日、朗县段水域开展鱼类调查,发现了1种疑似为拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)和异齿裂腹鱼(Schizothorax o’connori)的自然杂交种群体。形态学研究显示,该种的吻、口部、下颌、须等头部上的形态特征居于拉萨裂腹鱼和异齿裂腹鱼之间,并明显区别于双亲,且群体中个体的头部形态稳定一致,均具有典型的中间型特征,个体间没有明显差异。基于线粒体COI基因条形码分析显示,在杂交种群体共15个样本中,有4个与拉萨裂腹鱼为同源,其余11个与异齿裂腹鱼为同源,各自间的亲缘关系很近,即杂交种群体中既有属于拉萨裂腹鱼遗传基因的个体,也有属于异齿裂腹的遗传基因的个体。综合以上研究表明,拉萨裂腹鱼和异齿裂腹鱼在雅鲁藏布江中游的桑日等自然水域中能够自由杂交而产生后代,且两者都可以互为父母本,但以异齿裂腹鱼为母本产生的杂交种在群体中占多数,推测特殊的生态环境可能促使拉萨裂腹鱼和异齿裂腹鱼在自然水域中容易杂交。

可见植入荧光标记和微金属线码标记标志拉萨裂腹鱼的研究

[目的]研究不同标记方法对拉萨裂腹鱼的标记效果,为其增殖放流与效果评估提供技术支撑。[方法]分别采用可见植入荧光标记（VIE）、微金属线码标记（CWT）和空白对照处理对拉萨裂腹鱼幼鱼（5~7 cm）进行为期40 d的标志试验,研究不同标记方法对拉萨裂腹鱼的标记效果。[结果]VIE组试验鱼的存活率明显高于CWT组和对照组。VIE组和CWT组试验鱼的标志保持率分别为100%和98%。VIE和CWT标记对试验鱼生长均没有显著影响。[结论]VIE标记是拉萨裂腹鱼幼鱼较适宜的短期标志方式。

拉萨裂腹鱼3种同工酶的电泳分析

为了了解拉萨裂腹鱼的生化遗传特性,丰富拉萨裂腹鱼种质资源研究的内容。借助聚丙烯胺凝胶对拉萨裂腹鱼5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和血清)中的乳酸脱氢酶(LDH)、5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)苹果酸脱氢酶(MDH)以及肝脏醇脱氢酶(ADH)进行了电泳分析。研究结果表明:所测样本鱼心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和血清中的LDH酶带数分别为:6~10条,8~10条,4~7条,0~7条和1~7条,LDH-C基因只在肝脏中表达;心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中MDH酶带数分别为6~7条,2~6条,5~7条,5条和3~5条;肝脏ADH酶带数为3条。拉萨裂腹鱼的LDH和MDH同工酶系统具有组织特异性和个体差异性。组织特异性主要体现在酶带数目和表达活性程度不同两方面,与各组织执行生理功能密切相关。拉萨裂腹鱼同工酶个体差异性可能是其漫长的进化过程中为了能适应特殊生境的需要。

两种不同模式人工驯养野生拉萨裂腹鱼试验效果比较

试验采用静水和流水两种模式,并用不同面积遮光处理,于2014年7月至12月对拉萨裂腹鱼为期140天人工驯养试验效果比较。结果表明:两种不同模式驯养野生拉萨裂腹鱼对死亡率和转食率差异性显著,其中静水模式驯养拉萨裂腹鱼,不同遮光面积处理对死亡率和转食率差异不显著,但二者均与静水模式对照组差异显著;流水模式条件下,不同遮光面积处理对死亡率和转食率差异不显著,与对照组死亡率差异也不显著,但与对照组转食率差异显著。由此可知,在6㎡(3m×2m)水泥池,采用流水模式遮光面积(3㎡)处理驯养拉萨裂腹鱼效果相对较好。

不同规格拉萨裂腹鱼温度耐受性研究

实验旨在探讨三种规格拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)的温度耐受能力。通过每4h升高或者降低1℃,其中升温或者降温1h,平衡3h,直到试验鱼全部死亡或水温降至0。结果表明:大规格[(100.93±13.12)g、(19.71±1.04)cm]、中规格[(15.11±5.03)g、(10.05±1.19)cm]和小规格[(1.37±0.32)g、(4.51±0.35)cm]极限最高温度分别是30℃、30℃和33℃;极限最低温度均为0,均能在冰水混合的水中生存;温度耐受幅分别是30℃、30℃和33℃;在不同温度条件下拉萨裂腹鱼呼吸频率不同,且不同规格拉萨裂腹鱼间呼吸频率存在着显著差异(P<0.05)。因此,在高海拔和温度变化幅度较大的区域均适合拉萨裂腹鱼规模化养殖培育,但在冬季人工养殖过程中,由于小规格拉萨裂腹鱼耐受能力差,应移入温室大棚中养殖,从而保证较高成活率和正常生长。

拉萨裂腹鱼鱼卵振动敏感性及其适宜孵化模式

将同一批繁殖的3尾拉萨裂腹鱼受精卵平分为3份,分别在流水的平列槽、立式孵化器和圆柱形孵化器中孵化,比较不同孵化容器的孵化效果。另一尾鱼的受精卵于平列槽中孵化,用水浴恒温振荡器振荡5min,频率分别为0、50、100、150、200、250r/min(换算为水流速率分别为0、0.157、0.314、0.471、0.628、0.785m/s),统计死卵数,探索拉萨裂腹鱼胚胎对振动的敏感性。试验结果表明,平列槽孵化率最高,受精率为91.23%、64.26%、45.66%的受精卵孵化率分别为81.74%、40.30%、6.08%;其次为立式孵化器,3种受精率的受精卵孵化率分别为32.77%、2.59%、0;圆柱形孵化器孵化率最低,3种受精率的受精卵孵化率分别为5.42%、0、0。流速为0时,受精卵死亡率最低为(0.22±0.15)%,与流速为0.157~0.471m/s组差异不显著。流速为0.157~0.628m/s组受精卵死亡率组间差异不显著;流速0.785m/s组死亡率最高,显著高于其他试验组。0~0.471m/s条件下,原肠晚期死亡率最高[(10.00±5.61)%],其次为多细胞期[(5.83±2.85)%]。0.157~0.628 m/s条件下64细胞期死亡率最高[(26.67±23.45)%],与原肠晚期、多细胞期差异不显著。0.785m/s条件下心脏原基及心脏搏动期死亡率最低(0),其余各发育时期均较高。拉萨裂腹鱼不同发育时期受精卵对水流速率有不同程度的敏感性,建议采用流速较小的平列槽对其受精卵进行孵化。

雅鲁藏布江日喀则段野生拉萨裂腹鱼繁殖季节研究

本实验旨在雅鲁藏布江日喀则段野生拉萨裂腹鱼繁殖时间,为地区禁渔期提供依据。每月(4、5月上旬、中旬、下旬各采样1次)从雅鲁藏布江日喀则段捕获性成熟雌雄拉萨裂腹鱼各30尾;解剖,取性腺,统计GSI,统计个月份Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ期性腺比例。结果表明:拉萨裂腹鱼雌鱼的Ⅳ期性腺个体在3-5月中旬所占比例较高,其中以4月中旬最高;Ⅴ期性腺集中在4月下旬-5月下旬,5月下旬占比最高;Ⅵ期集中在6-9月。雄鱼Ⅳ期性腺集中在4月上旬-5月上旬,Ⅴ期性腺集中在4月下旬-5月下旬,Ⅵ期集中在6-7月。雌鱼GSI在1-5月维持较高水平,在4月下旬到5月下旬下降最快。雄鱼GSI以1-4月的水平最高,5月中旬-7月中旬GSI下降最快。因此:雅鲁藏布江日喀则段拉萨裂腹鱼的繁殖时间从4月上旬持续到5月下旬,其中4月下旬-5月下旬为高峰期。

不同开口饲料及投喂频率对拉萨裂腹鱼仔鱼存活和生长的影响

为探究不同开口饲料及不同投喂频率对拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)仔鱼存活和生长的影响,在水温11℃~12℃,溶氧6.5~7.8 mg/L条件下,选择平均全长14.45 mm仔鱼,设定螺旋藻粉、冰冻轮虫、斑点叉尾鮰饲料、微粒子饲料、草鱼饲料和丰年虫6种开口饲料投喂,再以微粒子饲料投喂,设定6种投喂频率,分别为每2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、24 h投喂一次,试验时间42 d。结果显示:冰冻轮虫组存活率显著最低,微粒子饲料组显著最高(P<0.05);投喂频率2 h组存活率显著最低,24 h组显著最高(P<0.05)。微粒子饲料组的全长生长速度最高,与斑点叉尾鮰饲料组和草鱼饲料组差异不显著(P>0.05),但显著高于其他各组(P<0.05);投喂频率12 h组和24 h组生长速度显著高于其他各组(P<0.05),该两组间无显著差异,其他各组间无显著差异(P>0.05)。综合存活率和生长情况考虑,建议在拉萨裂腹鱼仔鱼早期规模化养殖过程中选择微粒子开口饲料,投喂频率为24 h投喂1次效果较好。

拉萨裂腹鱼在藏木和加查鱼道基于基因交流的过坝需求及其受到的遗传选择

为了解拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)在藏木和加查鱼道基于基因交流的过坝需求及其受到的遗传选择,采用线粒体Cyt b基因序列分析来自藏木水电站坝址上游(ZMBS)、藏木鱼道(ZMYD)、藏木水电站坝址下游(ZMBX)、加查鱼道(JCYD)和加查水电站坝址下游(JCBX)5个群体共220尾拉萨裂腹鱼的遗传多样性及遗传结构。结果表明:(1)藏木水电站和加查水电站坝址上游与下游拉萨裂腹鱼群体(ZMBS、ZMBX和JCBX)遗传多样性水平相近(H_(d(ZMBS))=0.868,P_(i(ZMBS))=0.00416;H_(d(ZMBX))=0.825,P_(i(ZMBX))=0.00388;H_(d(JCBX))=0.833,P_(i(JCBX))=0.00370),两两群体间基因交流频繁(25.23<|N_(m)|<81.33),未发生遗传分化(-0.0202<F_(ST)<0.0061;P>0.05),远交风险较低,具有基于基因交流的过坝需求,应被列为过鱼对象;(2)Network网络结构图和系统发育树结果显示拉萨裂腹鱼分化成3个Clade,存在同域分化现象,但未达到种的分化水平,可能是因为经历“昆仑-黄河运动”或更新世冰期避难所后的二次接触而形成;(3)单倍型和Clade的分布频率结果显示藏木鱼道和加查鱼道对拉萨裂腹鱼不同单倍型和不同Clade存在遗传选择压力。研究可为复核过鱼对象选择的合理性和鱼道精细化运行管理提供数据支撑和参考依据。

拉萨裂腹鱼仔、稚鱼的异速生长模式

采用实验生态学的方法对拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni Regan)0~90日龄的异速生长模式进行研究。结果显示:拉萨裂腹鱼仔、稚鱼全长由慢速生长到快速生长的转折点为28日龄;其多数外部器官均具有异速生长特点,头部和尾部的生长快于躯干部,头长、肛前长、肛后长分别在24~25日龄、36~37日龄、37~38日龄出现生长拐点,头高和体高分别在40~41日龄、49~50日龄出现生长拐点;眼径在18~19日龄较早出现生长拐点,促使眼睛充分发育,以提高早期仔鱼在开口期摄食外源食物的能力;吻长在42~43日龄出现生长拐点,促进了口的充分发育,以适应不同阶段的饵料环境;胸鳍、背鳍、臀鳍、腹鳍和尾鳍分别在18~19日龄、39~40日龄、43~44日龄、46~47日龄、37~38日龄出现生长拐点,其中臀鳍和腹鳍长在拐点前后相对全长均呈现正异速生长,但是拐点后生长指数明显降低,各鳍在仔鱼早期的快速生长使拉萨裂腹鱼仔鱼的游泳能力得到大幅提高。拉萨裂腹鱼仔、稚鱼的异速生长模式,保证了各重要功能器官的充分发育,有效地保障了其开始摄取外源性营养后的生存能力,同时对早期野生资源保护和苗种生产有重要的指导意义。