半枝莲提取物对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响及其抑瘤作用

目的探讨中药半枝莲提取物(ESB)的抗肝癌作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法将接种H22肝癌细胞的小鼠分为模型组、ESB高、中、低剂量组(12、6、3g/kg)、5-氟尿嘧啶组(5-Fu组),另设正常对照组,连续给药10d。观察小鼠瘤重、体质量、胸腺指数和脾指数;并检测各组淋巴细胞增殖活性、NK细胞活性及脾细胞IL-2分泌量。结果ESB中、高剂量可明显抑制荷瘤小鼠移植瘤的生长,抑瘤率分别为28.68%、36.98%,而且能明显增加小鼠胸腺指数和脾指数(P<0.01),而5-Fu组胸腺指数和脾指数明显降低。模型组荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活性、NK细胞活性及分泌IL-2能力均明显低于正常对照组(P<0.05)。与模型组比较,5-Fu组荷瘤小鼠的NK细胞活性和脾细胞IL-2分泌量进一步降低(P<0.05)。而ESB高剂量组三者均得到明显改善。ESB中剂量治疗使荷瘤小鼠的NK细胞活性增强,与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论ESB可明显抑制H22移植瘤的生长,改善荷瘤小鼠的免疫功能。

HPLC／ESI-MS法鉴定半枝莲乙酸乙酯组分中黄酮苷元类化合物

利用正离子模式电喷雾质谱研究了包括正黄酮、异黄酮、二氢黄酮、异二氢黄酮和黄酮醇在内的5个黄酮亚类苷元的质谱断裂碎片,并得到了能够区别鉴定这5类黄酮苷元的特征碎片离子。其中,2个CO的连续丢失可以看作异黄酮的特征断裂,[0,4B-H2O+H]+是二氢黄酮的特征碎片离子,黄酮醇和异二氢黄酮则主要发生0,2键和2,3键的断裂,分别形成特征的0,2A+和2,3B+碎片离子。在此基础上,利用高效液相色谱与电喷雾质谱联用技术对半枝莲乙酸乙酯组分中的化合物进行研究,确定了异红花素(isocarthamidin)、印黄芩素(scutellarin)、木樨草素(luteolin)、柚皮素(naringenin)、4’-羟基汉黄芩素(4-’hydroxy-wogonin)和芹菜素(apigenin)6个黄酮苷元,并结合紫外光谱信息和质谱碎片信息,对另外6个黄酮苷元类化合物进行初步的结构推断。

半枝莲提取物诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及对凋亡相关基因表达的影响

目的:探讨半枝莲提取物(Scutellaria barbataextract,SBE)对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响。方法:体外培养肺癌SPC-A-1细胞,以2.5、5、10 mg/L SBE处理SPC-A-1细胞48h,并以2.5 mg/L顺铂(DDP)作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率,TUNEL法检测凋亡率,半定量RT-PCR检测survivin和caspase-3 mRNA表达。结果:与正常对照组相比,SBE各组细胞抑制率显著上升(P<0.001),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),Caspase-3 mRNA表达显著上升(P<0.05或P<0.01),Survivin mRNA表达明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:SBE具有诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡的作用,其分子机制可能与上调caspase-3及下调survivin基因表达有关。

半枝莲的化学成分研究(Ⅰ)

目的研究半枝莲(Scutellaria barbata D.Don)的化学成分。方法从半枝莲全草的乙醇提取液中分离得到9个化合物,利用理化性质和波谱学分析,鉴定它们的化学结构。结果分离鉴定了9个化合物,分别是6-羟基香豆素(1)、香草酸(2)、异香草酸(3)、4′-羟基汉黄芩素(4)、6-甲氧基柚皮素(5)、芹菜素(6)、柚皮素(7)、木犀草素(8)、异红花素(9)。结论化合物1为首次从该属植物中分得的已知化合物,化合物2、3为首次从该植物中分得的已知化合物。

半枝莲的化学成分

目的对唇形科黄芩属植物半枝莲(Scutellaria barbataD.Don)的化学成分进行分离、鉴定。方法采用反复硅胶柱色谱、制备薄层色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱和重结晶等多种分离方法对半枝莲的乙醇提取物进行分离。利用理化性质和波谱学分析鉴定了所得化合物的化学结构。结果分离鉴定了7个化合物,分别是:大黄素甲醚(physcion,1)、d-丁香脂素(d-syringaresinol,2)、5,4′-二羟基-6,7,3′,5′-四甲氧基黄酮(5,4-′dihydroxy-6,7,3′,5-′tetramethoxyflavone,3)、4′-羟基汉黄芩素(4-′hydroxywogonin,4)、6-甲氧基柚皮素(6-methoxynaringenin,5)、芹菜素(apigenin,6)、柚皮素(naringenin,7)。结论化合物1和2为首次从该属植物中分得的已知化合物。

大孔树脂分离纯化半枝莲总黄酮的研究

目的研究不同型号大孔树脂纯化半枝莲总黄酮的工艺条件及参数。方法以静态饱和吸附量、洗脱量、静态洗脱率为考察指标,比较了5种大孔树脂,并对AB-8树脂的动态比上柱量、比吸附量、比洗脱量进行了考察,以总黄酮转移率和纯度为指标对树脂吸附工艺条件进行了筛选。结果所比较的5种树脂中,AB-8型树脂具有最佳的吸附及洗脱参数,其最佳工艺是用浓度为3.12mg·mL-1,pH=2.0的上样液,以3倍柱体积去离子水,12倍柱体积70%乙醇依次洗脱,总黄酮转移率为80%左右,其纯度为60%左右。结论AB-8树脂综合性能较好,适合于半枝莲中总黄酮的纯化。

半枝莲多糖的提取纯化及抗氧化活性研究

目的研究半枝莲多糖的分离纯化及抗氧化作用。方法采用正交试验L9(34)对半枝莲多糖提取工艺进行优化,并利用DEAE-Cellulose-52和Sepharose 4B柱色谱进一步纯化多糖组分;分光光度法测定半枝莲多糖对小鼠红细胞溶血、小鼠血清、肝组织中的超氧化物岐化酶(SOD)活力以及过氧化产物丙二醛(MDA)生成的影响。结果半枝莲多糖提取工艺的最佳条件为温度70℃,提取6 h,料水比1∶30,温度是提取多糖的关键影响因素。抗氧化活性实验表明半枝莲多糖的两个组分SBPW、SBPS在一定浓度范围内均能降低化学法诱导的红细胞溶血和肝组织过氧化物损伤;能剂量依赖性提高小鼠血清、肝组织中的SOD活力,降低小鼠血清、肝组织中MDA的水平。结论SBPW和SBPS具有较好的抗氧化作用。

半枝莲挥发性化学成分分析

通过分析半枝莲挥发性化学成分,为半枝莲的开发利用提供实验依据。采用同时蒸馏-萃取法提取半枝莲挥发性化学成分,用气相色谱法分离,质谱法鉴定其结构。结果表明,半枝莲挥发油的含量为1.84%,鉴定出35种化学成分,其中呋喃甲醛、麝香草酚和十六烷酸含量较高。

白花蛇舌草、半枝莲及其药对抗肿瘤活性的研究进展

综述白花蛇舌草、半枝莲及其药对的抗肿瘤活性,探讨其抗肿瘤的作用机制,总结近7~8年的文献,阐明二者在细胞凋亡、降低端粒酶活性、增强免疫等方面的作用。

药用植物半枝莲的离体快繁

以茎尖为外植体进行了离体快繁研究。利用6-BA×IBA和6-BA×NAA两种激素组合诱导丛生芽,6-BA×IBA激素组合的最佳增殖培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L,增殖系数可达6.5;6-BA×NAA激素组合的最佳增殖培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0mg/L,增殖系数可达6.1;两种组合无显著性差异。在MS基本培养基上即可生根且长势良好,生根率为100%;诱导丛生芽试验中6-BA浓度不能超过0.5 mg/L,否则会有愈伤组织出现。

半枝莲多糖对HepA荷瘤小鼠抑癌基因表达的影响

目的:探明半枝莲多糖对HepA瘤组织Rb、P16基因表达的影响。方法:运用SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中Rb、P16基因蛋白的表达量。结果:半枝莲多糖组、猪苓多糖组中Rb、P16基因蛋白的表达量均显著高于荷瘤组(P<0.01),半枝莲多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:半枝莲多糖可通过升高抑癌基因Rb、P16的蛋白表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

反相高效液相色谱法测定半枝莲中原儿茶酸的含量

目的建立半枝莲药材中原儿茶酸的含量测定方法。方法样品用30%的乙醇回流提取,提取液滤过,以反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定。用DiamonsilTMC18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-0.05%磷酸为流动相,流速为1.0 ml·min^1,检测波长为258 nm。结果原儿茶酸的保留时间约为7 min,且与其它峰的分离度大于1.5。原儿茶酸的线性范围为0.018-0.184μg（r=0.999 8）,最低检测限为3 ng,平均回收率和RSD分别为99.7%和0.27%。结论该方法简便快速,结果准确可靠,可为半枝莲药材的质量评价提供有效手段。

半枝莲多糖对荷瘤小鼠T细胞免疫功能的影响

为研究半枝莲多糖对小鼠免疫功能的影响,探讨其可能的抗肿瘤作用机制,分别以50、100、200mg/kg的剂量对荷瘤小鼠进行肌肉注射,采用酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)染色法检测T淋巴细胞含量,利用流式细胞术检测T淋巴细胞亚群变化及表面蛋白CD28的表达,分别用IL-2、IFN-γ定量酶联免疫检测试剂盒测定IL-2、IFN-γ含量。结果显示,与对照组相比,半枝莲多糖各剂量组外周血T淋巴细胞总数均升高,中、高剂量组T淋巴细胞含量分别显著升高21.75%、26.44%;外周血T淋巴细胞亚群中的CD4+T细胞、CD8+T淋巴细胞均提高,CD4+/CD8+值增加,中、高剂量组CD4+T淋巴细胞含量分别显著提高6.53、4.92个百分点;各剂量组CD8+CD28+T淋巴细胞含量均提高,中、高剂量组分别极显著提高8.24、7.32个百分点,CD8+CD28-T淋巴细胞含量均低于空白对照组;各剂量组外周血血清中IL-2和IFN-γ的含量均提高,中剂量组分别提高100.30%、376.95%。可见,半枝莲多糖能够提高T细胞含量,提高CD4+/CD8+值,促进外周血血清中IL-2和IFN-γ的分泌,从而提高机体的免疫功能使其趋于稳态,发挥抗肿瘤作用。

半枝莲多糖SPS_4组分的纯化性质及分析

半枝莲经热水提取,除蛋白质,乙醇沉淀,DEAE-纤维素及Sephadex G-150柱层析分离得到一种白色粉状多糖SPS_4。经琼脂糖电泳、玻璃纤维纸电泳及醋酸纤维素薄膜,凝胶柱层析证明SPS_4为均一性多糖。经进行完全酸水解后纸层析及气相层析分析确定糖基的组成及摩尔组成比为鼠李糖:岩藻糖:阿拉伯糖:木糖:甘露糖:葡萄糖:牛乳糖=0.22:0.26:1.0:0.09:0.51:1.82:2.09。平均分子量为10000。体外实验表明,多糖SPS_4对S-180肉瘤细胞及腹水肝癌细胞均有一定的抑制作用。

半枝莲多糖的抗肿瘤作用及其调节免疫的实验研究

目的:研究半枝莲多糖抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法:采用移植性H22肝癌小鼠,随机分为阴性对照组、半枝莲多糖组、猪苓多糖组。连续给药10d后,测定其抑瘤率、胸腺指数和脾指数,ELISA法测定小鼠血清IL-2的含量;小鼠碳粒廓清法测定单核吞噬细胞功能,进行组间比较。结果:半枝莲多糖可明显抑制小鼠HepA瘤,抑瘤率可达34.35%,并且能够提高荷瘤小鼠免疫器官重量、血清IL-2的活性及增强单核吞噬细胞功能。结论:半枝莲多糖有明显抗肿瘤作用,其机制可能是通过提高机体免疫功能实现的。

SBPS对荷瘤小鼠癌基因表达的影响

目的:为探明半枝莲多糖对HepA瘤组织N-ras、c-myc基因表达的影响。方法:运用原位杂交法、SP免疫组化染色技术及多媒体彩色病理图文分析系统测定HepA瘤细胞中N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达量。结果:半枝莲多糖组、猪苓多糖组中N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达量均显著低于荷瘤组(P<0.01),半枝莲多糖组与猪苓多糖组无显著性差异。结论:半枝莲多糖可通过降低N-ras、C-myc mRNA及蛋白的表达,而抑制HepA瘤细胞的增殖。

探讨半枝莲醇提物对小鼠细胞色素P450酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响

目的探讨半枝莲醇提物对小鼠细胞色素P450酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响。方法于2017年2月将40只雄性SD小鼠随机分为4组,分别为对照组(10只)和试验组(30只)。试验组每天按照1 g/kg、5 g/kg、10 g/kg的用药量给所有小鼠进行灌胃,持续给药5 d。对照组予以等量生理盐水,第6天采用颈椎脱臼法处死小鼠,收集肝脏组织供后续研究,检测肝脏组织中细胞色素P450以及谷胱甘肽S-转移酶活性。结果与对照组相比,试验组低剂量组细胞色素P450含量和活性不存在差异(P>0.05),而中剂量组和高剂量组小鼠细胞色素P450含量和活性出现显著下降趋势(P<0.05)。与对照组相比,试验组小鼠谷胱甘肽S-转移酶活性没有出现显著差异(P>0.05),但中剂量组和高剂量组活性出现下降趋势。结论半枝莲醇提物对小鼠细胞色素P450酶和谷胱甘肽S-转移酶的活性有一定的抑制作用,且抑制作用随着浓度增长而不断增大,即半枝莲醇提物浓度越高,对小鼠细胞色素P450酶和谷胱甘肽S-转移酶活性抑制程度越高。

半枝莲中小分子成分及药用价值综述

本文综述了半支莲中的小分子成分研究现状,将半支莲中的小分子成分按照结构类型进行总结,并阐述了半支莲的主要的药理作用,为进一步对半支莲进行新药研究和开发工作提供了依据。

响应面试验优化超声波辅助提取半枝莲黄酮工艺

采用超声波法辅助提取半枝莲黄酮,以超声波功率、超声温度、提取时间、乙醇浓度为因素,考察各个因素对半枝莲黄酮提取率的影响。结果表明,最佳提取工艺参数为超声波功率400W、超声温度57℃、提取时间49 min、乙醇浓度72%,在此工艺参数下做3次平行试验,半枝莲黄酮提取率为96.25%。方差分析结果表明,影响半枝莲黄酮提取率大小因素依次为超声温度>超声波功率>提取时间>乙醇浓度。

基于斑马鱼生物模型的黄芩靶向降糖作用评价

黄芩属多年生草本植物,作为一种中药始载于《神农本草经》,是治疗感冒、流感、发烧等的常用药物。本研究以斑马鱼(5 days post fertilization)为对象,研究了不同浓度不同孵育时间对斑马鱼耐受性的影响,并在此基础上系统研究评价不同浓度黄芩对高糖诱导型(过食)和胰岛损伤型(糖尿病)斑马鱼的靶向作用功效。结果发现,斑马鱼对高浓度的黄芩具有不耐受性,孵育48 h 时的LC;为4621.832 μg/mL,95%可信范围为4031.335 ~ 5376.152μg/mL,按10% ~ 25% LC;剂量浓度推荐可用于靶向功效评价的适宜剂量浓度为462.18 ~ 1155.46 μg/mL。在10 mg/mL 葡萄糖诱导斑马鱼模型中,200 μg/mL、400 μg/mL和800 μg/mL 黄芩处理斑马鱼葡萄糖值分别降低28.32%(p > 0.05)、27.11%(p < 0.05)和35.37%(p < 0.05);在10 mg/mL 葡萄糖和0.025 mM 四氧嘧啶诱导的糖尿病斑马鱼模型中,200 μg/mL、400 μg/mL和800 μg/mL 黄芩处理组斑马鱼葡萄糖值分别降低了7.37%、8.36%和8.31%,但差异均不显著(p > 0.05)。试验表明黄芩对过饮过食与胰岛损伤型患者均具有降糖作用,其作为我国传统中药材在功能食品上具有广阔的应用前景,其叶作为保健茶饮等开发利用具有潜在价值。