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聚丙烯酰胺凝胶Sephacryl在多糖分离纯化中的应用进展
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作者 王雨 孙延平 +2 位作者 乔威杰 杨炳友 匡海学 《化学工程师》 CAS 2023年第1期63-66,共4页
探索生物活性多糖的构效关系已成为越来越多的研究学者关注的热点,如何有效分离纯化出不同分子量段的活性多糖成为多糖研究领域的一大挑战。凝胶柱层析法中的聚丙烯酰胺凝胶Sephacryl具有分离范围广,化学稳定性高,机械性能好3大优点。... 探索生物活性多糖的构效关系已成为越来越多的研究学者关注的热点,如何有效分离纯化出不同分子量段的活性多糖成为多糖研究领域的一大挑战。凝胶柱层析法中的聚丙烯酰胺凝胶Sephacryl具有分离范围广,化学稳定性高,机械性能好3大优点。本文系统综述了Sephacryl凝胶性质特点、使用方法、Sephacryl凝胶在活性多糖分离纯化中的应用等内容,旨在为学者分离纯化活性多糖提供借鉴。 展开更多
关键词 sephacryl 多糖 分离纯化 进展
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层析介质Capto Core400和Sephacryl S-1000纯化乙型肝炎病毒核心蛋白病毒样颗粒效果的比较 被引量:2
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作者 郎艺洁 王云龙 +5 位作者 李玉林 王继创 王旭东 王晓军 周丽 钱鹏 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期818-821,共4页
目的比较层析介质Capto Core400和Sephacryl S-1000纯化乙型肝炎病毒核心蛋白(hepatitis B virus core protein,HBc)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的效果。方法采用两种层析介质纯化相同3批HBc VLPs蛋白粗提液,BCA法检测纯化... 目的比较层析介质Capto Core400和Sephacryl S-1000纯化乙型肝炎病毒核心蛋白(hepatitis B virus core protein,HBc)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的效果。方法采用两种层析介质纯化相同3批HBc VLPs蛋白粗提液,BCA法检测纯化样品的蛋白浓度,计算蛋白回收率;体积排阻色谱法检测纯度;马尔文粒径仪检测HBc VLPs粒径;透射电子显微镜观察HBc VLPs形态。结果层析介质Sephacryl S-1000和Capto Core400纯化HBc VLPs的蛋白回收率分别为75.5%和70.5%,蛋白纯度分别为87%和99%,粒径大小均为(30±4)nm,均一性良好;与Sephacryl S-1000比较,经Capto Core400纯化的HBc VLPs分布更均匀。结论Capto Core400纯化HBc VLPs的纯度及颗粒分布均匀性更佳,且该层析介质装量小,纯化时间短,更适用于HBc VLPs的规模化生产。 展开更多
关键词 Capto Core400 sephacryl S-1000 乙型肝炎病毒核心蛋白 病毒样颗粒
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用SephacrylS-1000柱层析大量纯化质粒DNA 被引量:1
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作者 刘柏林 方军 +1 位作者 张让 刘菽秋 《遗传与疾病》 CSCD 北大核心 1990年第4期221-223,256+260,共3页
作者介绍一种用Sephacryls-1000凝胶柱层析纯化质粒DNA的简便、有效方法。该实验程序中既不用RNA酶处理,也不需氯化铯-溴乙锭(CsCl-EB)密度梯度离心。回收的质粒DNA中无RNA和染色体DNA污染,绝大部分是共价闭环DNA(ccc DNA),只含少量开环... 作者介绍一种用Sephacryls-1000凝胶柱层析纯化质粒DNA的简便、有效方法。该实验程序中既不用RNA酶处理,也不需氯化铯-溴乙锭(CsCl-EB)密度梯度离心。回收的质粒DNA中无RNA和染色体DNA污染,绝大部分是共价闭环DNA(ccc DNA),只含少量开环DNA(oc DNA),没有线型DNA。并保持其正常的生物活性和分子结构。 展开更多
关键词 质粒DNA Sephacry 凝胶柱层析
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巨噬细胞源性神经营养因子的纯化和鉴定 被引量:4
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作者 李松林 郭畹华 顾熊飞 《实验生物学报》 CSCD 1998年第2期137-145,共9页
应用Sephacryl S-100-HR凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)和反相高效液相色谱(R-HPLC)分析,从巨噬细胞条件培养基中纯化了巨噬细胞源性神经营养因子(MΦDNF)。该因子在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现一条单一蛋白带,其分子量为60.5kD,等电点... 应用Sephacryl S-100-HR凝胶层析、高效液相色谱(HPLC)和反相高效液相色谱(R-HPLC)分析,从巨噬细胞条件培养基中纯化了巨噬细胞源性神经营养因子(MΦDNF)。该因子在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈现一条单一蛋白带,其分子量为60.5kD,等电点约5.1。其氨基酸组成含有较高比例的天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸和赖氨酸。纯化的MΦDNF能支持体外培养的小脑皮质神经元的存活,增强其活性及促进神经元突起的生长。其最大效应浓度为500—1000ng/ml。 展开更多
关键词 巨噬细胞源性 神经营养因子 纯化 鉴定
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Isolation of lignosulfonate with low polydispersity index 被引量:1
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作者 Xin Ping Ouyang Pan Zhang +3 位作者 Chun Mei Tan Yong Hong Deng Dong Jie Yang Xue Qing Qiu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2010年第12期1479-1481,共3页
Lignosulfonate with low polydispersity index of 1.178-1.210 was isolated by gel column chromatography of Sephacryl S-100 eluted with 0.2 mol/L of NaNO3 aqueous solution,whereas nearly monodisperse ligosulfonate fracti... Lignosulfonate with low polydispersity index of 1.178-1.210 was isolated by gel column chromatography of Sephacryl S-100 eluted with 0.2 mol/L of NaNO3 aqueous solution,whereas nearly monodisperse ligosulfonate fraction with polydispersity of 1.0(57 can be obtained after chromatographic separation twice.This method provides an available approach to investigate the structure and characteristics of lignosulfonate. 展开更多
关键词 LIGNOSULFONATE sephacryl Chromatographic separation
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过碘酸盐氧化法制备固相载体除抗非目的蛋白抗体
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作者 刘相国 杨恭 邱并生 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期73-75,共3页
Sephacryl凝胶经过碘酸盐氧化将产生醛基 ,非目的蛋白通过氨基与醛基反应结合到凝胶上制备固相载体。装柱后 ,抗体经过长时间循环上样 ,抗非目的蛋白的抗体被吸收 ,抗体得到了纯化。用经本法处理过的抗体做免疫印迹 。
关键词 Sephacry1凝胶 抗体 免疫印迹 过碘酸盐氧化法 固相载体 抗血清
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人胶质瘤细胞SWO-38神经营养活性物的初步分离
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作者 廖异平 郭畹华 顾熊飞 《宁波大学学报(理工版)》 CAS 2000年第2期96-101,共6页
制备了人胶质瘤细胞SWO-38条件培养基(SWO-38 CM),经超滤浓缩,截留分子量大于 10 kD的 SWO-38 CM,并运用快速自动比色微量分析法检测其对体外培养的 SD大鼠小脑皮质神经元的作用.结果表明,分子量大... 制备了人胶质瘤细胞SWO-38条件培养基(SWO-38 CM),经超滤浓缩,截留分子量大于 10 kD的 SWO-38 CM,并运用快速自动比色微量分析法检测其对体外培养的 SD大鼠小脑皮质神经元的作用.结果表明,分子量大于 10 kD的 SWO-38 CM对神经元的作用,与对照组比较有明显的神经营养活性.分子量大于 10 kD的 SWO-38 CM经 SephacrylS-200-HR凝胶层析并结合生物活性鉴定,获得了具有神经营养活性的第Ⅱ峰洗脱液. 展开更多
关键词 神经营养活性 人胶质瘤细胞 SWO-38条件培养基
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吗啡备用根大鼠脊髓组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定 被引量:4
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作者 李春燕 曾园山 +1 位作者 顾熊飞 陈穗君 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期144-150,共7页
目的 分离纯化吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液 ,以期获得某些神经营养活性物质。 方法 应用SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析、高效液相色谱 (HPLC)和组织培养等技术分离和检测神经营养活性物质。 结果 备用根大鼠脊髓组织提取液能够促... 目的 分离纯化吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液 ,以期获得某些神经营养活性物质。 方法 应用SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析、高效液相色谱 (HPLC)和组织培养等技术分离和检测神经营养活性物质。 结果 备用根大鼠脊髓组织提取液能够促进体外培养的鸡胚背根节 (DRG)神经突起的生长 ;吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液也具有同样的作用 ,但备用根大鼠和吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液在促神经突起生长作用方面并没有明显的差异。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液具有明显的神经营养活性作用。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液的SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析Ⅱ峰洗脱液和Ⅳ峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS PAGE分析 ,Ⅱ峰洗脱液呈现 1条分子量约为 6 5kD的蛋白质主带 ,Ⅳ峰洗脱液的蛋白质成分较为复杂。应用HPLC对凝胶层析Ⅳ峰洗脱液作进一步的分离 ,发现HPLCA峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS PAGE显示 ,A峰洗脱液的两条蛋白质主带分子量分别为 30kD和 18kD。 结论 吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液中具有神经营养活性作用的物质可能是分子量约为 6 5kD、30kD和 展开更多
关键词 吗啡 备用根模型 神经营养活性物质 脊髓组织培养 高效液相色谱 动物实验
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人血浆载脂蛋白A-Ⅱ的分离纯化及鉴定 被引量:5
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作者 罗静聪 刘秉文 蓝天鹤 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1990年第2期157-162,共6页
用硫酸右旋糖酐沉淀法和超速离心法从正常人血浆制备高密度脂蛋白(HDL)。脱脂后经制备性等电聚焦和Sephacryl S-200层析分离纯化载脂蛋白A-Ⅱ(apolipoprotein A-Ⅱ,简称apoA-Ⅱ)。经鉴定SDS-PAGE呈一条谱带,其亚基分子量为8700±280... 用硫酸右旋糖酐沉淀法和超速离心法从正常人血浆制备高密度脂蛋白(HDL)。脱脂后经制备性等电聚焦和Sephacryl S-200层析分离纯化载脂蛋白A-Ⅱ(apolipoprotein A-Ⅱ,简称apoA-Ⅱ)。经鉴定SDS-PAGE呈一条谱带,其亚基分子量为8700±280(n=4),等电点为4.80—5.17,氨基酸组成分析不含组氨酸和精氨酸,与抗apoA-Ⅱ血清发生特异免疫反应。 展开更多
关键词 载脂蛋白A-Ⅱ 分离 提纯 鉴定
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凝血因子Ⅷ复合物的纯化 被引量:2
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作者 吕慎诚 徐进 景明 《中国输血杂志》 CAS CSCD 1993年第1期9-11,共3页
本文介绍一种制备高纯度凝血因子Ⅷ(FⅧ)复合物的方法。用新鲜冰冻血浆作为原始材料,收集冷沉淀,溶解后经氢氧化铝[Al(OH)_3]凝胶吸附、甘氨酸沉淀和氯化钠沉淀,得高纯 FⅧ。然后经 Sephacryl S-1000柱层析,收集富含 FⅧ促凝活性(FⅧ∶C... 本文介绍一种制备高纯度凝血因子Ⅷ(FⅧ)复合物的方法。用新鲜冰冻血浆作为原始材料,收集冷沉淀,溶解后经氢氧化铝[Al(OH)_3]凝胶吸附、甘氨酸沉淀和氯化钠沉淀,得高纯 FⅧ。然后经 Sephacryl S-1000柱层析,收集富含 FⅧ促凝活性(FⅧ∶C)及 von Willebrand 因子(vWF)组分,得到进一步纯化的产品。层析后产品总蛋白含量为0.188mg/ml,FⅧ∶C 为15.43IU/ml,FⅧ相关抗原(FⅧR∶Ag)为9.85U/ml,vWF 的 Ristocetin 辅因子活性(FⅧR∶RCof)为24.2U/ml。火箭电泳测定未显示含有纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg)、纤维结合蛋白(Fibronectin,Fn)和IgG 等杂蛋白。 展开更多
关键词 凝血因子Ⅷ 复合物 提纯
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巨噬细胞源性神经营养因子的初步分离
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作者 李松林 郭畹华 顾熊飞 《解剖科学进展》 CAS 1996年第4期363-369,共7页
本文制备了巨噬细胞条件培养基(MφCM),并应用快速自动比色微量分析法检测MφCM对体外培养的生后7dSD大鼠小脑皮质神经元的作用。结果表明,分子量大于10kD的MφCM对神经元(细胞密度1×106/ml)的作用... 本文制备了巨噬细胞条件培养基(MφCM),并应用快速自动比色微量分析法检测MφCM对体外培养的生后7dSD大鼠小脑皮质神经元的作用。结果表明,分子量大于10kD的MφCM对神经元(细胞密度1×106/ml)的作用,与对照组比较有明显的神经营养活性(F<0.05);用盖玻片培养法表明,该组份有促进神经元突起生长的作用。MφCM经SephacrylS-100-HR凝胶层析和生物活性鉴定,获得了具有神经营养活性的第二峰洗脱液。此洗脱液经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,证明MφCM中神经营养活性成份的蛋白质其分子量为31kD-68kD之间。 展开更多
关键词 巨噬细胞源性 神经营养因子 MΦCM 小脑皮质 神经元 细胞培养 Sephacreyl S-100-HR凝肢层析
全文增补中
Isolation and characterization of a new subunit of phycocyanin from Chroomonas placoidea 被引量:7
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作者 Yun Yun Zhang Min Chen Hong Cui 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2011年第10期1229-1232,共4页
A new phycocyanin(PC) fluorescent subunit namedβ_2(18kDa) was isolated and characterized by both SDS-PAGE and isoelectric focusing(IEF) from a species of cryptophytic alga Chroomonas placoidea.PC was separated ... A new phycocyanin(PC) fluorescent subunit namedβ_2(18kDa) was isolated and characterized by both SDS-PAGE and isoelectric focusing(IEF) from a species of cryptophytic alga Chroomonas placoidea.PC was separated and purified by ammonium sulfate sedimentation followed by two steps of Sephadex G-100 chromatography.After denatured in 4 mol/L urea for 48 h,PC was divided into two fractions by passing through a Sephacryl S-100 chromatography column twice.The blue fraction(S-1) containedβsubunits with a maximal absorbance at 595 nm in visible light region.While the green fraction(S-2) enriched inαsubunits showed a characteristic long wavelength absorbance at 680-700 nm region and exhibited a relatively low molecular weight of 9.4(α_1) and 8.5 kDa(α_2).Fraction S-1 also consisted of two different fluorescent subunits with molecular weight of 20.1 kDa(β_1) and 18 kDa (β_2) and differed from each other on isoelectric points of pH 5.7(ft) and 6.0(ft),respectively.Further investigation of peptide sequence will help a lot in elucidating the new subunit ft that was smaller in size and more neutral than the known ft subunit,and may provide an alternative explanation in structure of cryptophytic phycobiliproteins. 展开更多
关键词 Chroomonas placoidea Phycocyanin subunit sephacryl S-100 chromatography SDS-PAGE IEF
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