Sephadex G-25对乳酸链球菌素溶液脱盐的研究

目的研究乳酸链球菌素的凝胶过滤脱盐法。方法比较在Sephadex G-25柱上加样量、加样体积、洗脱流速和高径比对脱盐效果的影响。结果确定了乳酸链球菌素的最佳脱盐工艺为:色谱柱高径比15:1,加样体积为每毫升凝胶0.1mL料液、加样量为每毫升凝胶7×104IU、用pH3.45的醋酸缓冲溶液在0.6mL/min流速下洗脱。在此条件下,乳酸链球菌素的脱盐收率和回收率都在90%以上。结论 Sephadex G-25能有效的将乳酸链球菌素和盐分离。

定量显微荧光测定用Sephadex G-25荧光微球标准的评价

我们用异硫氰酸荧光黄(FITC)染色胺化的Sephadex G-25微球,从而制得Sephadex G-25荧光微球.Sephadex G-25荧光微球的荧光发射与胺化时间、染色时间和FITC的浓度呈较好的线性关系.该荧光微球标准的稳定性较好.我们用它标定了本实验室研制的光学纤维-显微荧光计.其标定结果与用铀玻璃荧光标准标定的结果相同.

葡聚糖凝胶过滤层析分离低聚半乳糖

采用葡聚糖凝胶SephadexG-25柱对低聚半乳糖混合物进行了分离提纯,确定了适宜的洗脱流速和温度。结果表明,操作温度70℃,洗脱流速20mL/h,凝胶柱90cm×1cm,当进料量由1mL增至10mL,低聚半乳糖(GOS,三糖及三糖以上的低聚糖组分)的产量提高了4.62倍,整个洗脱过程只需4.1h,可以有效地去除葡萄糖,得到纯度为85.03%的含少量乳糖的GOS混合物。此混合物经过二次上柱后,分离效果明显优于一次上柱,得到的GOS质量分数达89.39%。

椰子球蛋白多肽-亚铁螯合物的制备工艺

为提高椰子加工副产物的利用,对椰子球蛋白进行限制性水解制备多肽,并采用Sephadex G-25凝胶柱层析对多肽进行纯化,然后以椰子球蛋白多肽为原料与亚铁离子反应制备肽-亚铁离子螯合物。重点分析水解度、温度等因素对椰子球蛋白多肽亚铁离子络合能力的影响,并优化制备工艺。结果表明,用碱性蛋白酶结合风味蛋白酶制备的多肽的水解度最高(14.71%),产物的亚铁离子螯合能力也最高(24.66%);Sephadex G-25凝胶柱层析中分离出3个多肽组分,其中组分C的络合能力最高(28.67%);椰子球蛋白多肽C螯合亚铁离子最佳条件是多肽浓度1 mg/mL、40℃、pH 7.0、亚铁离子浓度0.5 mg/mL、时间0.5 h,此时螯合率为30.67%。荧光光谱、红外光谱等分析表明,椰子球蛋白多肽通过氨基、羧基和亚甲基与亚铁离子配位而形成螯合物。研究结果表明,用椰子球蛋白多肽为原料制备肽-亚铁螯合物切实可行,该螯合物可以应用于功能食品中来改善铁营养缺乏。

固定甘氨酸用于吸附水中金属离子的研究

采用环氧氯丙烷法将惰性载体Sephadex G-25活化,使其与甘氨酸偶联从而得到固定羧基的离子交换吸附剂。对该吸附剂吸附金属离子性能的研究表明,在pH 9.0时,吸附剂对Ca2+等金属离子有很强的吸附,且对Fe2+、Fe3+、Mn2+的吸附力比对Ca2+和Mg2+的吸附力要强。16g(湿重)吸附剂对金属离子的饱和吸附量分别为:Ca2+16.99mg,Mg2+6.86mg,Fe2+10.06mg,Fe3+4.93mg,Mn2+11.51mg。同时,该吸附剂具有稳定性好、能重复使用且制备成本低等特点,在污水处理、金属离子回收等方面有很好的应用前景。

鸡胚多肽分子量分布研究比较

采用Sephadex G-25层析、SDS-PAGE电泳等分析方法对鸡胚多肽水解产物的分子量分布进行分析,结果表明,蛋白酶所得到的水解产物肽分子是连续分布的,不同的酶酶解液所得的多肽分子量分布不同。TR-菠萝复合酶酶解液中酶解得到较多低于MW30000不同分子量的低分子小肽,因此选择其作为酶解鸡胚蛋白的最佳作用酶。

条斑紫菜藻红、藻蓝蛋白逐级放大的纯化工艺

采用"破碎-盐析-层析"的方法纯化条斑紫菜藻胆蛋白,并在提取规模上逐步放大。首先在综合比较凝胶层析去盐效率后,从Sephadex G-25、G-100、S-300和CL-6B中选择G-25作为实验流程中的去盐填料,其次将提取流程的初试原料条斑紫菜量逐步放大,选取了1g、20g和400g三个量,结果表明随着初试紫菜量逐步放大,最终所得藻胆蛋白中吸收光谱纯度>3.2的蛋白产率依次提高,其中400g冻干紫菜的藻红蛋白产率为0.323%,藻蓝蛋白产率为0.148%。由此认为该实验工艺流程具有规模放大的潜力,这为高纯度藻胆蛋白的规模生产提供了一条可行的方案。

大豆蛋白小分子肽的制备及其分离纯化

以大豆分离蛋白为原料,利用Alcalase和Flavourzyme双酶进行水解,将水解度由单酶的14.72%提高至29.30%。水解所得粗品肽经SephadexG-25凝胶层析柱分离纯化,根据标准曲线的回归方程,得到分子量大致分别为大于5000Da和1180Da、580Da的三个级分,其中第二个级分为主要成分。

小麦谷朊蛋白ACE抑制肽分离纯化研究

为了探讨和研究小麦谷朊蛋白ACE抑制肽分离提纯方法、技术参数及分离效果,首先采用超滤、纳滤膜技术将谷朊蛋白水解液按照相对分子质量的不同进行分离纯化,采用高效液相色谱法和SHR大鼠实验检ACE抑制抑制效果,并对高抑制活性的组分采用凝胶排阻色谱(Sephadex G-25)进一步分离纯化。结果显示膜过滤和凝胶排阻色谱(Sephadex G-25)能够有效分离和纯化谷朊蛋白抑制肽,IC50由0.125mg/mL降低到0.106mg/mL。一次性灌胃SHR大鼠一星期后动脉血压降低(8.86±2.23)mmHg,证明谷朊蛋白抑制肽经过分离纯化后具有良好的降血压效果。