葡聚糖与 NASI 辐射接枝共聚及与 BSA 的偶合反应

用辐射接枝技术将Ｎ－丙烯酰氧基丁二酰亚胺（ＮＡＳＩ）接枝在ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０上。接枝率随剂量增加而增大，１０ｋＧｙ后趋于平缓，剂量率对接枝率无明显影响。两种接枝物分别与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）进行偶合反应。在０．２ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ＝７．４的磷酸盐缓冲液中３８℃下恒温缓慢搅拌６ｈ可达偶合平衡。每克ＢＳＡ可偶合ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５－ＮＡＳＩ３．０×１０－４ｍｍｏｌ。ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０－ＮＡＳＩ由于Ｇ５０型孔隙度过小，ＢＳＡ无法渗入，偶合反应难以进行。但ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０－ＮＳＡＩ却可与带－ＮＨ２、小分子量的中性红发生偶合反应，偶合摩尔比接近１∶１。

一种云斑天牛气味结合蛋白的分离纯化

为揭示云斑天牛(Batocera lineolata Chevrolat)对气味分子的识别机制,通过荧光结合试验和葡聚糖凝胶G75(Sephadex G75)层析研究了云斑天牛对气味分子的识别情况,并对云斑天牛气味结合蛋白进行了分离纯化。结果表明,云斑天牛气味结合蛋白能与荧光探针N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)产生荧光结合,云斑天牛触角部位的总蛋白提取液中存在pro.Ⅰ-Ⅻ(ProteinⅠ-Ⅻ)12种大分子粗提蛋白,这12种大分子粗提蛋白经Sephadex G75纯化后,得到1种能与荧光探针1-NPN产生荧光结合的纯化蛋白pur-pro.I(purified protein I)。纯化蛋白pur-pro.I分子质量约为15.2 ku,对应为大分子粗提蛋白pro.Ⅻ(ProteinⅫ)。鉴定认为,分离纯化蛋白pur-pro.I是云斑天牛的一种气味结合蛋白。