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Application of Thin Layer Chromatography in Preparation of Drug Containing Serum of Eucalyptus Oil
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作者 Bingyang GUO Yongli YU +2 位作者 Shijuan LUO Xiaoqing YIN Mingzhen XU 《Medicinal Plant》 CAS 2018年第1期19-24,共6页
[Objectives] To explore whether the thin layer chromatography( TLC) can be used to guide the preparation of drug containing serum of eucalyptus oil. [Methods]Eucalyptus oil samples with different dilution ratio were d... [Objectives] To explore whether the thin layer chromatography( TLC) can be used to guide the preparation of drug containing serum of eucalyptus oil. [Methods]Eucalyptus oil samples with different dilution ratio were detected by TLC. Eucalyptus oil was intragastrically administered to mice,serum samples of different eucalyptus oil doses,different intragastric administration methods and different blood sampling times were collected. The above samples were detected by TLC,and the above results were verified by gas chromatography. [Results] TLC can detect concentration difference of eucalyptus oil samples with different dilution ratio. TLC can provide qualitative and semi-quantitative detection of eucalyptus oil in serum. High,medium and low dose of eucalyptus oil in serum had different effects on the growth of MCF-7 cells in the SD rats( P < 0. 05). [Conclusions] TLC can be used to guide the preparation of drug containing serum of eucalyptus oil. 展开更多
关键词 Chinese medicine drug containing serum Eucalyptus oil Thin layer chromatography
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麝香黄芪复方滴丸含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖分化 被引量:1
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作者 陈娜 王燕琳 +3 位作者 孙慧芳 樊飞燕 李东红 张运克 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第19期2960-2966,共7页
背景:骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛用于治疗神经系统疾病,但由于血脑屏障的限制以及干细胞在受损部位存活率、分化率低,导致治疗效果有限。目的:探讨麝香黄芪复方滴丸含药血清对BMSCs增殖、迁... 背景:骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛用于治疗神经系统疾病,但由于血脑屏障的限制以及干细胞在受损部位存活率、分化率低,导致治疗效果有限。目的:探讨麝香黄芪复方滴丸含药血清对BMSCs增殖、迁移和向星形胶质细胞分化的影响。方法:SD雄性大鼠连续灌胃麝香黄芪复方滴丸5 d后进行腹主动脉取血,分离血清备用。采用CCK-8法检测体积分数5%,10%,20%含药血清对BMSCs增殖的影响;划痕实验观察体积分数10%含药血清对BMSCs横向迁移的影响;Transwell小室培养BMSCs,用结晶紫染色和DAPI核染色观察体积分数10%含药血清对BMSCs纵向迁移的影响;用含体积分数10%含药血清的诱导液或与星形胶质细胞共培养观察BMSCs向星形胶质细胞分化情况。结果与结论:①体积分数10%和20%含药血清在第2,3天促进细胞增殖更明显,且两种体积分数无统计学差异;②在划痕30,48 h时,10%含药血清组BMSCs迁移量显著高于对照组;③10%含药血清组BMSCs穿过Transwell小室滤过膜的数量高于对照组;④体积分数10%含药血清可能促进BMSCs向星形胶质细胞方向分化,但分化作用较弱,星形胶质细胞能进一步促进含药血清诱导BMSCs向星形胶质细胞方向分化;⑤结果表明,体积分数10%含药血清能促进BMSCs体外增殖、迁移;与星形胶质细胞共培养可能促进BMSCs向星形胶质细胞方向分化。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 麝香黄芪复方滴丸 含药血清 骨髓间充质干细胞 星形胶质细胞 增殖 迁移 分化
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两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清对其抗炎作用影响差异的研究
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作者 阎政燊 张立石 +4 位作者 高焕 郭琴 宋剑南 高源 柏冬 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 2024年第5期828-835,共8页
目的基于两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清,探讨其抗炎作用差异。方法取雄性SD大鼠按10倍临床剂量给药(桂枝汤汤剂生药1 g/mL),取门静脉血、外周血含药血清,采用快速液相-三重四级杆质谱联用仪(rapid resolution liquid chromatograp... 目的基于两种不同取血部位制备桂枝汤含药血清,探讨其抗炎作用差异。方法取雄性SD大鼠按10倍临床剂量给药(桂枝汤汤剂生药1 g/mL),取门静脉血、外周血含药血清,采用快速液相-三重四级杆质谱联用仪(rapid resolution liquid chromatography-triple quadrupole mass spectrometry,RRLC-QQQ-MS/MS),建立桂枝汤汤剂、含药血清中8种化学成分含量测定方法,并对含量进行测定。取对数生长期小鼠脑微血管内皮细胞(brain-derived endothelial cells.3,bEnd.3)模型,用白细胞介素(interleukin,IL)-1β刺激,建立细胞炎症模型,使用bEnd.3细胞作为正常组。除正常组、模型组外,设置桂枝汤汤剂高、中、低剂量组(分别含5%、2.5%、1.25%桂枝汤汤剂),门静脉含药血清高、中、低剂量组(分别含20%、10%、5%门静脉含药血清)和外周血含药血清高、中、低剂量组(分别含20%、10%、5%外周血含药血清),ELISA法测定细胞外液中的前列腺素(prostaglandin,PG)E_(2)含量。结果含量测定结果显示汤剂中芍药苷、芍药内酯、甘草苷、甘草酸比例相对较高,血清中肉桂酸、6-姜酚含量相对较高,较汤剂中新出现甘草次酸等代谢物。门静脉血清中以上8种化合物含量均高于外周血血清。5%桂枝汤汤剂中甘草酸含量为798.13 ng/mL,20%门静脉含药血清中甘草酸含量为316.22 ng/mL,20%外周血中甘草酸含量为481.17 ng/mL,药物中成分的含量在同一数量级。与模型组比较,将高、中、低剂量桂枝汤汤剂添加到bEnd.3细胞培养体系中,高、中、低剂量桂枝汤组细胞外液中PGE_(2)的水平均明显高于模型组(P<0.05),而门静脉或外周血含药血清组细胞外液中PGE_(2)的水平均明显低于模型组(P<0.05),且门静脉血清的药效作用显著强于相同浓度的外周血血清(P<0.05)。结论桂枝汤汤剂经胃肠道给药后,门静脉含药血清相较外周血含药血清显示出更高的成分含量与抗炎作用。这一发现提示采用门静脉含药血清而非传统的外周血含药血清在中药方剂研究中的重要性。 展开更多
关键词 桂枝汤 门静脉含药血清 外周血含药血清 含量测定 药效实验
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补肾化痰方含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移的实验研究
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作者 宋幸铃 周亚娜 +5 位作者 许海 罗保平 周用 左盼 田晓霞 魏如薇 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2024年第6期526-529,540,共5页
目的:研究补肾化痰方(BHF)对小鼠脏器指数及BHF含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移的影响。方法:将小鼠随机分为对照组、BHF高剂量组、BHF中剂量组、BHF低剂量组,灌胃7 d后,采血制备含药血清,处死后取材测定各组小鼠脏器指数。体外培养H... 目的:研究补肾化痰方(BHF)对小鼠脏器指数及BHF含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移的影响。方法:将小鼠随机分为对照组、BHF高剂量组、BHF中剂量组、BHF低剂量组,灌胃7 d后,采血制备含药血清,处死后取材测定各组小鼠脏器指数。体外培养HepG2肝癌细胞,设置空白组、对照组、BHF高剂量组、BHF中剂量组、BHF低剂量组,每组设3个浓度(20%、10%、5%),3个复孔。各组加入相应的含药血清,培养24、48、72 h后,采用CCK8法测算细胞增殖抑制率。采用Transwell细胞培养24 h后镜下观察各组细胞的形态学改变。进行细胞划痕实验,检测各组HepG2细胞迁移的水平。结果:在20%血清浓度下,与对照组比较,24 h时BHF高、低剂量组细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05)。72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高、低剂量组均高于中剂量组(P<0.05)。在10%血清浓度下,与对照组比较,24 h时BHF低剂量组细胞增殖抑制率显著增加(P<0.05),72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高剂量组显著高于低剂量组(P<0.05)。在5%血清浓度下,与对照组比较,48 h时BHF高剂量组显著增加(P<0.05)。72 h时BHF各剂量组细胞增殖抑制率均显著增加(P<0.05),且高剂量组显著高于中、低剂量组(P<0.05)。与空白组比较,72 h时BHF高剂量组划痕迁移率显著降低(P<0.05)。结论:BHF含药血清对HepG2肝癌细胞增殖、迁移具有抑制作用,且高剂量组表现最优。 展开更多
关键词 补肾化痰方 肝癌 含药血清 细胞增殖 细胞迁移
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基于血清药理学的肝龙胶囊含药血清制备方法的初步探究
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作者 张珂珂 白豪 +2 位作者 吕金宇 金悦 罗芮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期956-960,共5页
目的:利用血清药理学,探究用于肝细胞脂肪变性药效观察的肝龙胶囊(GLC)含药血清的最佳取血时间和含药血清体积分数。方法:C57BL/6J小鼠60只,灌胃GLC(90 mg/kg),每日两次,连续7 d,分别在末次给药0.5、1、2和4 h心脏采血,收集血清。对照... 目的:利用血清药理学,探究用于肝细胞脂肪变性药效观察的肝龙胶囊(GLC)含药血清的最佳取血时间和含药血清体积分数。方法:C57BL/6J小鼠60只,灌胃GLC(90 mg/kg),每日两次,连续7 d,分别在末次给药0.5、1、2和4 h心脏采血,收集血清。对照组小鼠灌胃同体积的生理盐水。LC-MS/MS技术检测空白血清及不同采血时间含药血清肌苷含量,确定最佳采血时间。应用0%、1%、3%和10%GLC血清处理棕榈酸(PA)刺激的小鼠肝细胞NCTC1469,尼罗红染色检测细胞脂滴生成,RT-qPCR检测细胞内脂肪酸生成基因Fabp1和Scd1,及脂肪酸β-氧化基因Pparα的表达。结果:(1) LC-MS/MS检测发现在末次给药2 h后血清中肌苷浓度最高。(2)尼罗红染色显示GLC血清对PA诱导的肝细胞脂质积累具有剂量依赖性的减少趋势。(3) 1%和3%和10%GLC血清处理均能显著下调PA刺激的肝细胞内Fabp1和Scd1的表达,且具有剂量依赖性的减少趋势;1%、3%和10%GLC血清处理均能显著上调PA刺激的肝细胞内Pparα的表达,且具有剂量依赖性的增加趋势。结论:小鼠给药后2 h的10%GLC血清是用于肝细胞脂肪变性药效观察的最佳血清干预浓度。 展开更多
关键词 肝龙胶囊 含药血清 取血时间 体积分数
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骨疏康干预破骨细胞:激活核因子E2相关因子2调控c-Fos/NFATc1通路
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作者 侯成志 韩佳童 +4 位作者 魏光成 卓泽川 李秋月 赵勇 俞张镜泽 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期279-285,共7页
背景:已有研究表明,骨疏康通过调节核苷酸、氨基酸代谢和免疫机制影响骨骼代谢,目前骨疏康治疗骨质疏松症的机制研究主要聚焦于调控成骨细胞,对破骨细胞的关注较少。目的:以RAW 264.7细胞为实验对象,从破骨细胞角度探讨骨疏康治疗骨质... 背景:已有研究表明,骨疏康通过调节核苷酸、氨基酸代谢和免疫机制影响骨骼代谢,目前骨疏康治疗骨质疏松症的机制研究主要聚焦于调控成骨细胞,对破骨细胞的关注较少。目的:以RAW 264.7细胞为实验对象,从破骨细胞角度探讨骨疏康治疗骨质疏松症的机制。方法:取8周龄雌性SD大鼠24只,采用随机数字表法分为4组(n=6),3个实验组分别灌胃给予1,2,4 g/kg的骨疏康药液(2次/d),对照组灌胃给予等量蒸馏水(2次/d),连续灌胃7 d后抽取大鼠主动脉血,离心收集血清,同组血清合并,获得低、中、高浓度的骨疏康含药血清及正常血清,进行后续实验。①将RAW 264.7细胞分6组培养:对照组加入正常血清,低、中、高浓度组分别加入低、中、高浓度的骨疏康含药血清,Nrf2抑制剂组加入核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)抑制剂ML385,Nrf2激活剂组加入Nrf2激活剂t-BHQ,采用CCK8法检测细胞相对活性。②将第3代RAW 264.7细胞分5组培养:空白对照组加入正常血清,破骨组加入核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL),低、中、高浓度组在加入RANKL的基础上分别加入低、中、高浓度的骨疏康含药血清,培养5 d后进行抗酒石酸酸性磷酸染色。③将RAW 264.7细胞分5组培养:空白对照组加入正常血清,破骨组加入正常血清与RANKL,高浓度+破骨组加入RANKL+高浓度骨疏康含药血清,破骨+Nrf2激动剂组加入RANKL+t-BHQ,高浓度+破骨+Nrf2抑制剂组加入RANKL+高浓度骨疏康含药血清+ML385,培养5 d后进行Western Blot与活性氧含量检测。结果与结论:①CCK8检测结果显示,骨疏康含药血清及Nrf2抑制剂、激动剂对RAW 264.7细胞活力无明显影响;②抗酒石酸酸性磷酸染色结果显示,骨疏康含药血清呈浓度依赖性抑制破骨细胞的分化;③Western Blot与活性氧含量检测结果显示,与空白对照组比较,破骨组Nrf2蛋白表达降低(P<0.05),c-Fos、NFATc1蛋白表达与活性氧含量升高(P<0.05);与破骨组比较,高浓度+破骨组、破骨+Nrf2激动剂组、高浓度+破骨+Nrf2抑制剂组Nrf2蛋白表达升高、活性氧含量降低(P<0.05),高浓度+破骨组、破骨+Nrf2激动剂组c-Fos、NFATc1蛋白表达降低(P<0.05);与高浓度+破骨组比较,高浓度+破骨+Nrf2抑制剂组Nrf2蛋白表达降低(P<0.05),活性氧含量升高(P<0.05);④结果表明,骨疏康通过激活Nrf2减少活性氧生成,进而抑制下游c-Fos/NFATc1通路表达和破骨细胞分化。 展开更多
关键词 骨质疏松症 骨疏康 含药血清 破骨细胞 Nrf2 c-Fos/NFATc1通路 RAW 264.7细胞
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基于JAK2/STAT3通路研究周氏固金消瘤汤含药血清对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移能力的影响
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作者 文静 王理槐 侯超 《陕西中医》 CAS 2024年第4期451-456,共6页
目的:探讨周氏固金消瘤汤(ZSGJXLT)含药血清对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移能力的影响及其机制。方法:应用健康SD大鼠制备ZSGJXLT含药血清与空白血清,将0%(空白血清)及5%、10%、20%、30%、40%ZSGJXLT含药血清作用于A549细胞,CCK-8法测算细... 目的:探讨周氏固金消瘤汤(ZSGJXLT)含药血清对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移能力的影响及其机制。方法:应用健康SD大鼠制备ZSGJXLT含药血清与空白血清,将0%(空白血清)及5%、10%、20%、30%、40%ZSGJXLT含药血清作用于A549细胞,CCK-8法测算细胞活性抑制率和半数抑制浓度(IC_(50))。用0%ZSGJXLT(空白对照组)、5%ZSGJXLT(ZSGJXLT低剂量组)、10%ZSGJXLT(ZSGJXLT中剂量组)及20%ZSGJXLT(ZSGJXLT高剂量组)含药血清培养A549细胞,细胞划痕实验及高内涵细胞成像技术观察细胞运动情况;Transwell侵袭及迁移实验观察细胞侵袭及迁移情况;Western blot法检测A549细胞JAK2/STAT3通路相关蛋白表达情况。结果:与空白对照组相比,不同浓度ZSGJXLT含药血清组A549细胞活性受到不同程度的抑制,与时间及浓度呈正相关性,24 h的IC_(50)为25.42%。与空白对照组相比,ZSGJXLT中、高剂量组A549细胞划痕愈合率、细胞移动速度均显著下降(均P<0.05),不同浓度ZSGJXLT含药血清组A549细胞侵袭及迁移数量明显减少(均P<0.05)。与空白对照组比较,ZSGJXLT中、高剂量组A549细胞的p-JAK2、p-STAT3、VEGFA蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);不同浓度ZSGJXLT含药血清组MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达有下调趋势,而E-cadherin蛋白表达有上调趋势,呈剂量依赖性,其中ZSGJXLT高剂量组与空白对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:周氏固金消瘤汤含药血清能抑制A549细胞侵袭迁移能力,其机制可能与调控JAK2/STAT3通路有关。 展开更多
关键词 肺腺癌A549细胞 周氏固金消瘤汤 含药血清 侵袭 迁移 JAK2/STAT3
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壮骨健膝方对巨噬细胞极化的影响及作用机制研究
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作者 张鹏 郭洁梅 +6 位作者 肖艳 陈鹏 张英杰 刘俊 陈雨 邱梦婷 苏友新 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第13期1959-1965,共7页
目的:探讨壮骨健膝方对巨噬细胞经典活化型(M1)/替代活化型(M2)极化的影响及作用机制。方法:佛波酯诱导人单核白血病细胞分化为非活化巨噬细胞(M0),脂多糖刺激M0复制M1极化模型,将细胞分为空白组(M0+空白血清)、模型组(M1+空白血清)、... 目的:探讨壮骨健膝方对巨噬细胞经典活化型(M1)/替代活化型(M2)极化的影响及作用机制。方法:佛波酯诱导人单核白血病细胞分化为非活化巨噬细胞(M0),脂多糖刺激M0复制M1极化模型,将细胞分为空白组(M0+空白血清)、模型组(M1+空白血清)、抑制剂组(M1+NF-κB抑制剂+空白血清)、壮骨健膝方组(M1+含药血清)。干预24 h后,检测各组M1标志分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1),M2标志分子分化簇206、163、209(CD206、163、209)mRNA表达,炎症介质白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),抗炎因子IL-4、IL-10水平及mRNA表达,核因子κB(NF-κB)信号通路中节点蛋白核内NF-κBp65、NF-κBp50及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)表达。结果:模型组M1标志分子、炎症介质及NF-κBp65、NF-κBp50蛋白均高于空白组(P<0.05),CD206、IL-4 mRNA及IκBα蛋白,IL-4水平均低于空白组(P<0.05);抑制剂及壮骨健膝方组M1标志分子、炎症介质及NF-κBp65、NF-κBp50蛋白均低于模型组(P<0.05),M2标志分子、抗炎因子及IκBα蛋白均高于模型组(P<0.05);壮骨健膝方组MHC-Ⅱ、MCP-1 mRNA及炎症介质均低于抑制剂组(P<0.05),CD206、CD209、IL-10 mRNA及IL-4、IL-10水平均高于抑制剂组(P<0.05)。结论:壮骨健膝方可抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1极化,促进M2极化,其机制可能与降低细胞中NF-κB信号通路活性有关。 展开更多
关键词 壮骨健膝方 含药血清 膝骨关节炎 巨噬细胞极化 M1/M2型巨噬细胞 滑膜炎 THP-1源巨噬细胞
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二仙丸加减方含药血清抑制巨噬细胞焦亡的物质基础和作用机制
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作者 李思源 王瑜茹 +5 位作者 徐烨 郭地 南楠 刘杨 赵杰 郝慧琴 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第19期4029-4037,共9页
背景:课题组前期研究发现二仙丸加减方可以缓解胶原诱导性关节炎大鼠炎症反应,但其作用机制尚需进一步验证。目的:分析二仙丸加减方入血成分,观察二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响。方法:①二仙丸加减方入血成分分析:... 背景:课题组前期研究发现二仙丸加减方可以缓解胶原诱导性关节炎大鼠炎症反应,但其作用机制尚需进一步验证。目的:分析二仙丸加减方入血成分,观察二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响。方法:①二仙丸加减方入血成分分析:采用超高效液相色谱-高分辨质谱(UHPLC-HRMS)对二仙丸加减方及入血成分进行检测和鉴定。②二仙丸加减方含药血清对J774A.1巨噬细胞焦亡的影响:采用分子对接技术对二仙丸加减方入血成分倍半萜类化合物与NLRP3进行初步验证。将J774A.1巨噬细胞随机分为空白对照组、脂多糖+三磷酸腺苷组及脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清低(2.5%)、中(5%)、高(10%)剂量组。根据试剂盒说明书检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶释放情况;ELISA检测各组细胞上清液中白细胞介素1β、白细胞介素18水平;Hoechst/PI染色法检测各组细胞膜受损情况;Western blot检测各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达水平。结果与结论:①共鉴定出二仙丸加减方药效成分32个,入血成分21个,其中入血成分主要包括多种倍半萜类化合物;②分子对接结果显示3-O-Acetyl-13-deoxyphomenone、Incensol oxide、Atractylenolide Ⅲ、Rupestonic acid、3,7-Dihydroxy-9,11-eremophiladien-8-one与NLRP3之间结合活性较好;③与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组细胞上清中乳酸脱氢酶活性及白细胞介素1β、白细胞介素18水平均显著升高(P<0.001),Hoechst/PI染色可见PI阳性细胞数量显著增加。脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组上述指标均显示不同程度降低;④与空白对照组相比,脂多糖+三磷酸腺苷组NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达显著升高(P<0.05);与脂多糖+三磷酸腺苷组相比,脂多糖+三磷酸腺苷+二仙丸加减方含药血清各组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD及GSDMD-N蛋白表达均有不同程度降低(P<0.05),且具有一定的剂量依赖性。结果表明:二仙丸加减方含药血清可能通过调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制J774A.1巨噬细胞焦亡。 展开更多
关键词 二仙丸加减方 含药血清 细胞焦亡 J774A.1巨噬细胞 倍半萜类
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菊藻丸含药血清调控PTEN对乳腺癌MCF-7细胞生长和转移的作用研究
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作者 欧阳志 王赫 欧阳慧婷 《中国医药导报》 CAS 2024年第9期1-8,共8页
目的 研究菊藻丸含药血清调控10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)对人乳腺癌MCF-7细胞生长和转移的作用。方法 8周龄、体重(200±20)g的SPF级Wistar雌性大鼠12只,采用随机数字表法分为菊藻丸组和对照组,各6只。各... 目的 研究菊藻丸含药血清调控10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)对人乳腺癌MCF-7细胞生长和转移的作用。方法 8周龄、体重(200±20)g的SPF级Wistar雌性大鼠12只,采用随机数字表法分为菊藻丸组和对照组,各6只。各组分别以5.4 g/(kg·d)菊藻丸和等量生理盐水灌胃,制备含药血清和空白对照血清。将培养好的人乳腺癌MCF-7细胞分为20%空白血清组、5%含药血清组、10%含药血清组、15%含药血清组和20%含药血清组,分别使用含20%空白对照血清和含5%、10%、15%、20%含药血清的培养基进行培养干预。采用CCK-8检测细胞增殖、集落形成实验观察克隆形成能力、TUNEL染色检测凋亡、流式细胞术检测周期分布、划痕实验和Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,q PCR和Western blot检测PTEN m RNA和蛋白表达水平。结果 与20%空白血清组比较,10%、15%、20%含药血清组细胞增殖活性降低、克隆形成率减少、侵袭能力降低(P<0.05);5%、10%、15%、20%含药血清组细胞凋亡水平升高、迁移能力降低、细胞周期阻滞于G1期、PTEN的m RNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与5%含药血清组比较,10%、15%、20%含药血清组细胞增殖活性降低、克隆形成率降低、细胞凋亡水平升高、迁移能力降低、侵袭能力降低、细胞周期阻滞于G1期、PTEN m RNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05)。结论 菊藻丸含药血清能抑制MCF-7细胞生长和转移,其机制可能与激活PTEN的表达有关。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 菊藻丸 磷酸酶和张力蛋白同源物 含药血清 MCF-7细胞
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Effect of Chinese Herbal Drug-Containing Serum for Activating-Blood and Dispelling-Toxin on ox-LDL-Induced Inflammatory Factors'Expression in Endothelial Cells 被引量:9
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作者 蒋跃绒 缪宇 +6 位作者 杨琳 薛梅 郭春雨 马晓娟 殷惠军 史大卓 陈可冀 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS 2012年第1期30-33,共4页
Objective: To investigate the effects of drug-containing serum of Chinese herbal compound, Xiongshao Capsule (芎芍胶囊, XS, for activating-blood) and Huanglian Capsule (黄连胶囊, HL, for dispellingtoxin) on the o... Objective: To investigate the effects of drug-containing serum of Chinese herbal compound, Xiongshao Capsule (芎芍胶囊, XS, for activating-blood) and Huanglian Capsule (黄连胶囊, HL, for dispellingtoxin) on the oxidized low-density lipoprotein (ox-LDL)-induced inflammatory factors in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods: Thirty-two rats were randomly divided into four groups: the blank control group treated with distilled water, the positive control group treated with simvastatin (1.8 mg/kg), the test group I treated with Chinese herbal compound of XS (0.135 g/kg), and the test group 1T treated with Chinese herbal compound of XS (0.135 g/kg) and HL (0.135 g/kg). All the treatments were administered for 7 successive days by gastrogavage. Rats' blood serum was harvested 1 h after the last administration to prepare respective drug- containing serum. HUVECs were exposed to ox-LDL (100 μg/mL) to induce cell injury model and incubated with corresponding drug-containing serum for 24 h. Untreated HUVECs were set for blank control. Levels of interleukin-6 (IL-6), tumor necrosis factor-α (TNF-α), and soluble intercellular adhesion molecule-1 (slCAM-1) in supematant of cultured HUVECs were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). HUVEC surface expressions of ICAM-1 and E-selectin were determined by flow cytometry. Results: Levels of IL-6, TNF-α, and sICAM-1 in the supernatant of HUVECs as well as the cell surface expressions of ICAM-1 and E-selectin significantly increased after 24-h ox-LDL stimulation (P〈0.01), while the abnormal elevations, except slCAM-1 in the test group Ⅰ, were all reduced in the treated groups (the positive control and the two test groups) significantly (P〈0.01 or P〈0.05). Besides, the effect in the test group Ⅱ seemed somewhat higher than that in the test group Ⅰ but with no statistical significance (P〉0.05). Conclusion: Drug-containing serum of XS plus HL has a certain inhibitory effect on the vascular endothelial inflammation response induced by ox-LDL. 展开更多
关键词 activating blood and dispelling toxin drug-containing serum endothelial cell oxidized low-densitylipoprotein inflammation
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Pharmacological Effects of Serum Containing Chinese Medicine Bushen Huayu Jiedu Compound Recipe (补肾化瘀解毒复方) in Lung Cancer Drug-resistance Cells 被引量:7
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作者 曹勇 夏清华 +1 位作者 孟华 钟安朴 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS 2008年第1期46-50,共5页
Objective: To explore the pharmacologic effects of Chinese medicine Bushen Huayu Jiedu Compound Recipe (补肾化瘀解毒复方,BSHYJDR) in drug-resistance cells of lung cancer. Methods: Human lung adenocarcinoma A549/DD... Objective: To explore the pharmacologic effects of Chinese medicine Bushen Huayu Jiedu Compound Recipe (补肾化瘀解毒复方,BSHYJDR) in drug-resistance cells of lung cancer. Methods: Human lung adenocarcinoma A549/DDP cell strain was selected, serum pharmacology and flow cytometer (FCM) method were adopted, $180 tumor-bearing mice and normal mice were given, through gastrogavage, different doses of a decocted concentration of BSHYJDR. Serum from the abdominal aorta was taken to observe the effect of drug-serum on cisplatin (DDP) concentration, free Ca^2+ concentration and the expression of lung drug-resistance protein LRP-56 in A549/DDP cells. Results: Compared with the drug-resistance group, the intracellular DDP concentration in the group taking a high dose and the normal group of Chinese medicine showed significant difference (P〈0.05), while no significant difference was found in the low-dose group (P〉0.05). Compared with the drug-resistance group, the Ca^2+ concentration in cells and the expression of LRP in lung cancer drug-resistance cells A549/DDP of the high-dose group, the low-dose group and the normal group of Chinese medicine were significantly different (all P〈0.01), the LRP expression of the normal group was obviously higher than that of the drug-resistance group (P〈0.05). Cenclusien: It was indicated that serum containing Chinese medicine BSHYJDR in the tumor-bearing mice and the normal mice had certainly different, tumor-bearing mice serum containing could improve drug concentration in lung cancer drug-resistance cells, prevent the inflow and release of Ca^2+, and inhibit the expression of the drug-resistance gene in the lung cancer drug-resistance cells, which might be the mechanism of BSHYJDR in enhancing the efficacy in reversing and inhibiting tumor. 展开更多
关键词 serum containing Chinese compound medicine lung cancer drug-resistance cell cisplatin concentration Ca^2+ concentration lung drug-resistance protein expression
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Drug-containing serum of Xinfeng capsules protect against H9C2 from death by enhancing miRNA-21 and inhibiting toll-like receptor 4/phosphorylated p-38(p-p38)/p-p65 signaling pathway and proinflammatory cytokines expression 被引量:4
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作者 Cao Yunxiang Guo Yunke +3 位作者 Zong Ruikai Huang Chuanbing Wang Yue Liu Jian 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期359-365,共7页
OBJECTIVE: To investigate effect of drug-containing serum of Xinfeng capsules on myocardial cell growth.METHODS: Drug-containing serum of Xinfeng capsules rat models were established by intragastricly administrated Xi... OBJECTIVE: To investigate effect of drug-containing serum of Xinfeng capsules on myocardial cell growth.METHODS: Drug-containing serum of Xinfeng capsules rat models were established by intragastricly administrated Xinfeng capsules. MTT assay wasused to evaluated H9C2 cells viability. H9C2 cells were divided into normal control group, triptolide group, lipopolysaccharide(LPS) group, drug-containing serum group and mi RNA-21 inhibitor group. micro RNA-21(mi RNA-21) inhibitor was structured and transfected into H9C2 cells. Western blot and immunofluorescence assay were applied to examine toll-like receptor 4(TLR4), phosphorylated p-38(p-p38) and p-p65 expression. Quantitative real-time PCR(q RT-PCR) was used to evaluated m RNA levels of mi RNA-21. Enzyme linked immunosorbent(ELISA) was used to measure tumor necrosis factor α(TNF-α), IL-6 and IL-17 levels.RESULTS: Drug-containing serum treatment significantly increased cell viability compared to LPS treated group. q RT-PCR results indicated that mi RNA-21 levels were significantly decreased in drugcontaining serum group compared to LPS group.Early and late apoptosis in drug-containing serum group were significantly decreased compared to LPS group. Western blot and immunofluorescence assay results showed that TLR4, p-p38 and p-p65 levels in drug-containing serum group were significantly decreased compared to LPS group. ELISA findings indicated that drug-containing serum significantly decreased inflammatory cytokine levels of TNF-α, IL-6 and IL-17.CONCLUSION: Drug-containing serum of Xinfeng capsules protect against lipopolysaccharide instructed H9C2 cells from death by enhancing mi RNA-21 and inhibiting TLR4/p-p38/p-p65 signaling pathway and proinflammatory cytokines expression. 展开更多
关键词 drug-containing serum Xinfeng cap-sules MicroRNAs PROINFLAMMATORY cytokines Toll-like receptor 4 Myocardial cell Apoptosis
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半枝莲含药血清通过抑制mTOR信号通路影响非小细胞肺癌NCI-H1650细胞上皮间质转化 被引量:2
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作者 冯佳 袁傲 +1 位作者 黄芳 章建国 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第6期60-64,共5页
目的探讨半枝莲含药血清通过抑制雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)NCI-H1650细胞上皮间质转化。方法选取健康青紫蓝大白兔制备半枝莲含药血清,根据不同... 目的探讨半枝莲含药血清通过抑制雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路影响非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)NCI-H1650细胞上皮间质转化。方法选取健康青紫蓝大白兔制备半枝莲含药血清,根据不同剂量分为对照组、低剂量组(A组)、中剂量组(B组)、高剂量组(C组)。选取人非小细胞肺癌细胞NCI-H1650与含药血清培养,采用逆转录RT-PCR、免疫印迹、MTT、划痕实验等方法,观察4组不同剂量半枝莲含药血清抑制mTOR信号通路对NCI-H1650细胞上皮间质转化、增殖、迁移的影响。结果4组mTOR表达量差异具有统计学意义,其中C组mTOR表达量低于对照组和A组(P<0.05);4组Vimentin、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达相对灰度值差异具有统计学意义,且C组Vimentin、N-cadherin灰度值低于对照组、A组、B组,E-cadherin灰度值高于对照组(P<0.05);4组24、48、72 h吸光度差异具有统计学意义,且C组24、48、72 h吸光度低于对照组、A组、B组(P<0.05);4组NCI-H1650细胞迁移率差异具有统计学意义,且A组、B组、C组迁移率低于对照组,C组低于A组、B组(P<0.05)。结论高剂量半枝莲含药血清可通过抑制mTOR信号通路影响NCI-H1650细胞上皮间质转化、增殖及迁移,从而抑制NSCLC发生和发展。 展开更多
关键词 半枝莲含药血清 非小细胞肺癌 上皮间质转化 mTOR信号通路
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活血荣络方含药血清对氧糖剥夺/复氧糖损伤PC12细胞线粒体自噬的影响及机制研究 被引量:7
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作者 颜思阳 杨仁义 +3 位作者 陈瑶 刘利娟 高晓峰 周德生 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2023年第7期101-107,共7页
目的基于氧糖剥夺/复氧糖(OGD/R)损伤的PC12细胞模型观察活血荣络方含药血清对线粒体自噬的影响及作用机制。方法采用OGD/R损伤PC12细胞模拟体外脑缺血再灌注损伤模型,将细胞分为正常对照组、模型组、空白血清组、活血荣络方含药血清组... 目的基于氧糖剥夺/复氧糖(OGD/R)损伤的PC12细胞模型观察活血荣络方含药血清对线粒体自噬的影响及作用机制。方法采用OGD/R损伤PC12细胞模拟体外脑缺血再灌注损伤模型,将细胞分为正常对照组、模型组、空白血清组、活血荣络方含药血清组和雷帕霉素组,采用相应血清进行干预,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位(MMP),免疫荧光染色检测线粒体-LC3B共定位、线粒体-PINK1-Parkin共定位,Western blot检测微管蛋白1轻链3B(LC3B)、p62、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、Parkin蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组细胞MMP明显降低(P<0.01),线粒体-LC3B共定位无明显变化,线粒体-PINK1-Parkin共定位增强,LC3B、PINK1、Parkin蛋白表达明显升高,p62、TOMM20蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,活血荣络方含药血清组细胞MMP明显升高(P<0.01),线粒体-LC3B共定位和线粒体-PINK1-Parkin共定位增强,LC3B、PINK1、Parkin蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01),p62、TOMM20蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论活血荣络方含药血清可减轻OGD/R诱导的PC12细胞损伤,其机制可能与调控PINK1/Parkin通路,增加Parkin蛋白的线粒体转位,上调LC3B,下调p62、TOMM20蛋白表达,激活线粒体自噬相关。 展开更多
关键词 活血荣络方 含药血清 脑缺血再灌注损伤 线粒体自噬 神经保护 PC12细胞
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基于UPLC-Q-TOF-MS的左归降糖解郁方体内外成分分析 被引量:2
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作者 张驰 周思倩 +5 位作者 李金来 邵乐 刘检 赵洪庆 王宇红 龙红萍 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期228-240,共13页
目的 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对左归降糖解郁方(左归丸化裁)的体外及体内血清化学成分进行快速分析鉴别。方法 采用Agilent ZORB AX Eclipse Plus C_(18)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,质... 目的 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对左归降糖解郁方(左归丸化裁)的体外及体内血清化学成分进行快速分析鉴别。方法 采用Agilent ZORB AX Eclipse Plus C_(18)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,质谱扫描采用正负离子模式,对左归降糖解郁方的提取液、空白血清和含药血清进行分析,结合精确相对分子质量、保留时间、碎片离子、中性丢失等信息鉴定其体内外化学成分。结果 使用Agilent Masshunter Qualitative Analysis工作站结合复方成分数据库,从复方提取物中共鉴别出化合物57个,其中从提取物中首次发现Glycine。从血清样本中共鉴定出入血成分15个。结论 运用UPLC-Q-TOF-MS技术,可对左归降糖解郁方化学成分进行快速且系统地分析鉴定,为左归降糖解郁方的质量控制、临床应用以及更深入的药效作用研究提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 左归丸 左归降糖解郁方 高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱 成分分析 含药血清 裂解规律
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黄芩汤含药血清对TNF-α诱导的Caco-2细胞炎症模型的影响 被引量:3
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作者 冯雪 刘雅清 +3 位作者 刘滨 马旭冉 王敦方 杨伟鹏 《中医药学报》 CAS 2023年第1期16-19,共4页
目的:观察黄芩汤不同时间点的含药血清对TNF-α诱导的Caco-2细胞炎症模型的影响。方法:参照《伤寒论》组方及课题组的前期研究,煎煮、过滤、浓缩制成黄芩汤提取物,按照20 g/kg的剂量一次性给予大鼠黄芩汤,分别于给药后0、0.5、1、2、3、... 目的:观察黄芩汤不同时间点的含药血清对TNF-α诱导的Caco-2细胞炎症模型的影响。方法:参照《伤寒论》组方及课题组的前期研究,煎煮、过滤、浓缩制成黄芩汤提取物,按照20 g/kg的剂量一次性给予大鼠黄芩汤,分别于给药后0、0.5、1、2、3、4、6、8、10、12、24 h眼眶取血,分离血清,MTT法观察不同浓度的黄芩汤含药血清对Caco-2细胞增殖的影响;并用TNF-α诱导细胞炎症损伤模型,10%的含药血清给药18 h后,采用Griess法观察黄芩汤含药血清对其NO的影响,采用Elisa法测定IL-1β、PGE_(2)和TNF-α的变化。结果:与正常组相比,5%、10%、20%的黄芩汤含药血清作用Caco-2后,均有促进其增殖的作用,尤以10%黄芩汤含药血清的效果最佳;10 ng/mL的TNF-α致炎效果最佳;不同时间点的10%黄芩汤含药血清可降低炎症细胞内NO的含量,降低细胞内IL-1β、TNF-α和PGE_(2)的浓度。结论:黄芩汤不同时间点的含药血清对TNF-α诱导的Caco-2细胞炎症具有明显的抑制作用,其作用机制可能与抑制NO、IL-1β、TNF-α等炎性因子有关。 展开更多
关键词 黄芩汤 含药血清 TNF-Α CACO-2细胞 炎症
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胃复春胶囊通过STAT3信号通路促进人胃癌细胞凋亡 被引量:4
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作者 潘海春 祁大庆 +2 位作者 陈琳慧 汪玲羽 万林春 《浙江中医药大学学报》 CAS 2023年第3期227-233,共7页
[目的]研究胃复春胶囊对人胃癌MKN-49P细胞的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供新的依据。[方法]受试样品为经胃复春胶囊饲喂大鼠的含药血清。胃癌MKN-49P细胞与不同浓度的胃复春胶囊含药血清共同孵育,采用噻唑蓝(methy th... [目的]研究胃复春胶囊对人胃癌MKN-49P细胞的作用,为胃复春胶囊在抗消化道肿瘤方面的应用提供新的依据。[方法]受试样品为经胃复春胶囊饲喂大鼠的含药血清。胃癌MKN-49P细胞与不同浓度的胃复春胶囊含药血清共同孵育,采用噻唑蓝(methy thiazolyl tetrazolium,MTT)法及流式细胞术分别检测细胞活力和细胞凋亡情况;JC-1染色检测线粒体膜电位的变化;免疫印迹法检测信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT 3)蛋白及与细胞凋亡相关的蛋白表达情况。[结果]胃复春胶囊含药血清能够剂量和时间依赖地抑制MKN-49P细胞的生长,并可诱导MKN-49P细胞凋亡。浓度为0~100μg·mL-1的胃复春胶囊含药血清作用于MKN-49P细胞24 h后,细胞活力呈剂量依赖性降低;JC-1染色显示线粒体膜电位降低;经过25、50、100μg·mL-1的胃复春胶囊含药血清分别处理24 h后,胃复春胶囊含药血清处理组细胞中STAT3的磷酸化减弱。[结论]胃复春胶囊含药血清能抑制胃癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与STAT3信号通路有关,该结果为胃复春胶囊在临床上治疗胃癌提供了依据。 展开更多
关键词 胃复春胶囊 含药血清 胃癌 MKN-49P细胞 STAT3信号通路 凋亡 剂量依赖 时间依赖
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温法干预对HBV相关慢加急性肝衰竭阳黄证患者外周血树突细胞功能的影响 被引量:1
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作者 马远 唐丹 孙克伟 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2023年第5期430-435,共6页
目的:研究温法干预对HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)阳黄证患者外周血树突状细胞(DC)功能的影响。方法:分别选取8例HBV-ACLF阳黄证患者作为阳黄组和8名健康对照者,收集两组人员外周抗凝血,体外诱导培养成成熟的DCs。将两组人员的DCs... 目的:研究温法干预对HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)阳黄证患者外周血树突状细胞(DC)功能的影响。方法:分别选取8例HBV-ACLF阳黄证患者作为阳黄组和8名健康对照者,收集两组人员外周抗凝血,体外诱导培养成成熟的DCs。将两组人员的DCs细胞分为5组:正常组、模型组、温法干预组、去温法干预组和空白组。并用大鼠温阳解毒化瘀方(温法)及温阳解毒化瘀方减附子、白术方(去温法)含药血清干预模型组(HBV-ACLF阳黄证患者)DCs。流式细胞仪分析DCs表面CD80、CD86、CD83、HLA-DR表达及平均荧光强度;ELISA法检测DCs分泌细胞因子IL-12、IL-6、IL-10水平;混合淋巴细胞反应(MLR)检测DCs对T淋巴细胞增殖的影响。结果:与正常组DCs比较,模型组DCs表面CD80、CD86、CD83、HLA-DR表达及平均荧光强度明显降低,DCs分泌细胞因子IL-12、IL-10显著减少,IL-6增多,促T淋巴细胞增殖功能下降(P<0.01);与模型组比较,温法干预组DCs表面CD80、CD86、CD83、HLA-DR表达及平均荧光强度显著升高,DCs分泌细胞因子IL-12、IL-10显著增多,IL-6减少,促T淋巴细胞增殖功能提高。结论:温法干预能明显提高HBV-ACLF阳黄证患者外周血DCs细胞功能,有利于清除HBV病毒、恢复患者紊乱的免疫功能。 展开更多
关键词 温法干预 乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭 阳黄证 树突细胞 含药血清
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香萱解郁方对血清剥夺诱导HT22细胞损伤模型的神经保护作用
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作者 高圆媛 沙中玮 +2 位作者 薛纯纯 徐建 李欧 《西部医学》 2023年第6期793-798,共6页
目的探讨香萱解郁方含药血清对血清剥夺致小鼠海马神经元HT22细胞损伤模型的影响。方法采用血清剥夺培养HT22细胞建立神经损伤体外模型,实验分为对照组、模型组和中药组[中药组A(含药血清15%浓度)、中药组B(含药血清20%浓度)],各组血清... 目的探讨香萱解郁方含药血清对血清剥夺致小鼠海马神经元HT22细胞损伤模型的影响。方法采用血清剥夺培养HT22细胞建立神经损伤体外模型,实验分为对照组、模型组和中药组[中药组A(含药血清15%浓度)、中药组B(含药血清20%浓度)],各组血清剥夺12 h后,通过CCK8法检测各组细胞活力,确定15%浓度含药血清干预后细胞的存活率最高,设定为后续实验中药组的药物浓度。免疫荧光染色法检测神经元特异性微管蛋白(β-TubulinⅢ)在各组中的表达,蛋白质免疫印迹法及qPCR法检测脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白及其mRNA在各组中的表达。结果在加药后培养12 h,中药组的细胞活力明显高于对照组与模型组(P<0.001)。培养24 h,模型组细胞活力较对照组明显下降(P<0.001),中药组较模型组明显提高(P<0.001)。培养36 h,模型组细胞活力较对照组显著下降(P<0.001),中药组较模型组明显提高(P<0.001)。模型组BDNF蛋白含量及BDNF mRNA表达量较对照组显著降低(P<0.05,P<0.001),模型组少数神经元长出突起;中药组BDNF蛋白含量及BDNF mRNA表达量较模型组显著增加(P<0.05),中药组HT22细胞轴突突起长度和分支增加,β-TubulinⅢ阳性表达明显增多。结论香萱解郁方含药血清对血清剥夺诱导小鼠海马神经元HT22细胞损伤具有神经保护作用,可能与促进BDNF蛋白表达有关。 展开更多
关键词 含药血清 血清剥夺 HT22细胞 神经保护
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