玉米新品种对3种病害的抗性鉴定研究

玉米大斑病、小斑病和灰斑病是玉米生产上重要的叶部真菌病害。采用人工接种法,对16个玉米新品种在田间进行大斑病、小斑病和灰斑病的抗性鉴定评价。结果表明,在鉴定的16个玉米新品种中,4个品种(屏单3号、云玉2号、HL-66和春喜06-10)对3种病害均有较好的抗性,其余品种对1种或者2种病害具有中抗或感病的水平。

玉米大斑病菌StTOXE蛋白的原核表达及分析

【目的】构建玉米大斑病菌StTOXE蛋白的原核表达载体,明确StTOXE融合蛋白的诱导体系和可溶性,为开展该蛋白的功能和结构研究奠定基础。【方法】试验首先克隆了StToxE基因,并通过酶切连接技术将StToxE连接入原核表达载体pET-28a(+)中获得StTOXE融合蛋白表达载体pET28a-StToxE;分别将pET28a(+)和pET28a-StToxE载体分别转入大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达菌株BL21-pET28a和BL21-pET28a-StToxE,通过ITPG诱导,SDS-PAGE和Western Blot检测StTOXE融合蛋白的表达及其可溶性。【结果】构建了玉米大斑病菌StToxE基因原核表达载体pET28a-StToxE,并获得转化子BL21-pET28a和BL21-pET28a-St-ToxE;确定了StTOXE融合蛋白的最适ITPG浓度为0.4~0.6 mmol/L,分子量约为72 kD;并确定了StTOXE融合蛋白主要以包含体的形式存在,且为可溶性蛋白。【结论】实验成功构建了StTOXE融合蛋白表达载体pET28a-StToxE;发现ITPG浓度对StTOXE融合蛋白的表达有显著影响;在37℃条件下,StTOXE融合蛋白基本以包涵体形式存在细胞内,且融合蛋白为可溶性蛋白。