PRRSV陕西分离株ORF5基因克隆、序列分析及原核表达

克隆猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因,并进行序列分析及原核表达。根据GenBank公布的PRRSV ORF5基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,用RT-PCR方法扩增PRRSV陕西分离株糖基化囊膜蛋白基因ORF5,将其克隆入pGEM-T载体中,进行测序及序列分析。再设计另外1对引物扩增ORF5缺失编码N端31个氨基酸残基的基因片段,将截短的ORF5基因亚克隆入原核表达载体pET-32a中,在大肠杆菌BL21中进行原核表达。结果扩增到603 bp的PRRSV全长ORF5基因,序列分析表明,分离株与北美型代表株VR-2332和欧洲型代表株LV氨基酸同源性分别为87.8%和54.5%。因此推测陕西分离株属于北美型。SDS-PAGE可检测到大小约为38 ku的融合蛋白,主要以可溶性蛋白形式存在。West-ern-blot分析表明,重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别。

PCV-2陕西株ORF2基因的克隆、分析及原核表达

【目的】克隆猪圆环病毒2型陕西分离株(PCV-2SX株)ORF2基因,并进行序列分析及原核表达。【方法】根据GenBank公布的PCV-2ORF2基因的核苷酸序列,设计并合成1对特异性引物,应用PCR方法扩增PCV-2SX株ORF2全长基因,将其克隆入pGEM-T载体中,进行测序及序列分析。然后,将ORF2基因亚克隆入原核表达载体pET-32a中,在大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blotting鉴定。【结果】扩增到了702bp的PCV-2ORF2全长基因。序列分析结果表明,PCV-2SX株ORF2基因与广西分离株(EF675237,ChinaGX)和巴西分离株(DQ861802,am21)的核苷酸序列同源性均达98.0%,氨基酸序列同源性均达98.3%,与其他毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在89.9%～97.9%和88.5%～98.0%。SDS-PAGE可检测到分子质量约为48ku的融合蛋白,主要以可溶性蛋白形式存在。Western-blotting分析表明,重组蛋白可被PCV-2阳性血清所识别。【结论】成功克隆了PCV-2SX株ORF2基因,并进行了原核表达。

陕西中部地区近年来重力和应变场变化特征研究

基于2001—2005年陕西中部地区重力观测资料和GPS区域应变资料，研究了其重力场和应变场的分布与变化特征，结果表明：1）近年来陕西中部重力场和应变场的变化整体趋势一致，都是西升东降，南升北降；2）在西侧靠近鄂尔多斯西南弧形断裂带处，重力和最大剪应变均为正高值，并呈压缩状态；而中东部局部地区尤其是口镇．关山断裂带附近，重力为负值，最大剪应变呈高值状态，并受面拉张的作用与影响。

微生物法处理陕北采油污水

从陕北油区的靖边天赐湾注水井、子长余家坪选油站、青化砭选油站采集采油污水,利用高效石油降解菌CT-6的菌液以及加入营养物质的菌液两种方法进行了净化处理。实验结果为:靖边县天赐湾水样用不加营养物的实验菌株处理2 d后,石油类物质质量浓度为7.86 mg/L,达到国家石油类物质排放二级标准,8 d时,石油类物质质量浓度下降至4.21 mg/L,达到一级标准;子长余家坪选油站水样用不加营养物的实验菌株处理8 d后,石油类物质质量浓度为19.52 mg/L,达到国家石油类物质排放三级标准;青化砭选油站的水样用两种方法处理后水样中的含油量均没有明显下降。在青化砭选油站水样处理过程中,只给水样中投加菌体的处理效果优于给水样中添加菌体和营养物质的效果。

3株鸽源新城疫病毒陕西分离株F基因的克隆与序列分析

对3株鸽源性新城疫病毒F基因进行扩增和序列分析,探讨分离毒株相互之间以及与疫苗毒之间的遗传进化关系。采集病料,通过非免疫鸡胚接毒传代分离病毒,HA及HI试验鉴定其为ND病毒;设计特异性引物,RT-PCR扩增分离ND病毒F基因的重要功能区片段（1 395 bp）,并对其进行克隆、测序及序列分析。结果表明：3株鸽源NDV陕西分离株相互之间F基因核苷酸序列的同源性在98.0%-99.3%,氨基酸序列同源性为98.5%-99.1%;其F基因裂解位点的氨基酸组成与NDV强毒株的特征性结构（112R-R-Q-K-R-F117）一致。系统发育进化树表明,此3株强毒株与某贵州分离株（登录号：EF589137）高度同源,处于进化树的同一分支,属于基因Ⅵ型。分离到的3株鸽源NDV之间同源性较高,鸡胚病变和序列分析表明其为强毒,与传统的La Sota,B1等疫苗株同源性很低。

不同菌种秸秆生物反应堆对温室黄瓜生长及产量的影响

【目的】针对当前秸秆生物反应堆菌种使用较为杂乱的问题,筛选适用于陕西关中地区温室黄瓜种植的秸秆生物反应堆的配套菌种。【方法】选取7种不同来源的菌种,测定不同菌种对日光温室土壤温度、黄瓜农艺性状、产量和抗病性等指标的影响,以不放置菌种为对照,对其效果进行综合评价。【结果】与对照相比,7个菌种均能提高温室土壤温度,促进黄瓜生长发育,提高黄瓜产量,降低黄瓜白粉病的发病率。其中经世明生物反应堆专用菌种001、秸秆生物降解专用菌种和来自西北农林科技大学植物保护学院的Z1处理后,土壤温度分别较对照提高3.3,3.1,2.4℃,黄瓜株高分别较对照增加26.8,22.2,25.0cm,单果质量分别较对照增加44.9,32.9,26.9g,白粉病病情指数分别较对照降低18.88,10.38,6.07,增产率分别为32.5%,27.1%,21.0%。【结论】在关中地区黄瓜日光温室栽培中,世明生物反应堆专用菌种001综合表现最为突出。

陕北窑洞笼养鸡品种比较试验

对引入陕北的3个商品代蛋鸡品种6个品系罗曼褐壳蛋鸡、罗曼白壳蛋鸡、海赛克斯褐壳蛋鸡、海赛克斯白亮蛋鸡、海兰褐壳蛋鸡、海兰白壳蛋鸡,在窑洞笼养条件下进行比较试验,对各品种不同品系的产蛋性能、生长发育及存活率、饲养效益进行了测定。结果 75周龄平均产蛋量分别为19.58kg、17.73kg、19.71kg、19.79kg、18.05kg和16.90kg;产蛋期料蛋比分别为2.58:1、2.45:1、2.37:1、2.48:1、2.55:1、2.47:1。饲养效益分别为18.47元/只,17.46元/只、25.45元/只、18.95元/只、16.97元/只和16.13元,研究认为海赛克斯蛋鸡的饲养效益最高,为陕北窑洞笼养鸡技术首要推广品种。

翠华山甘湫池景观地质遗迹成因

甘湫池是翠华山国家地质公园的一个新景点。实地调查发现,整个景区是一座罕见的基岩古滑坡,具有滑坡地貌可观察的景观形态特征。从空间分布和层序关系来看,上覆的崩塌乱石是后期堆积在古滑坡体上,甘湫池应是古滑坡形成的拉伸洼地,并非是由崩塌形成的堰塞湖,同时在景观形态上也与水湫池明显不同,这对于科学认识和开展地质遗迹旅游具有重要的意义。

PRRSV陕西分离株ORF3基因的克隆、序列分析及原核表达载体的构建

根据GenBank公布的PRRSVORF3基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,用RT-PCR方法扩增PRRSV陕西分离株ORF3基因,将其克隆入pGEM-T载体中,测序并进行序列分析。再将ORF3基因亚克隆入pET-32a中,构建原核表达载体。结果扩增到765 bp的PRRSV全长ORF3基因,序列分析结果表明,分离株与SY0608亲缘关系较近,而与CH-2、HB-2关系较远。重组原核表达质粒经酶切鉴定正确后命名为pET-GP3,为进一步研究GP3蛋白的原核表达、免疫特性、结构与功能奠定了基础。

八方山多金属矿床控矿构造变形机制研究

陕西凤县八方山铜铅锌多金属矿床为一层控矿床,其后生热液改造富集作用主要受构造控制.区内主体构造为一短轴背科,产于背斜中的环状层滑断层严格控制了矿体的展布.应用构造解析、有限应变分析、显微组构分析等方法对该背斜及其次级构造进行研究,结果表明该区构造为多期变形(至少二级韧性变形和二期脆性变形)的产物,矿化富集受前三期变形控矿.

秦巴山区蜜环菌新菌株“陕蜜2009”选育研究

秦巴山区拥有独特的地理环境和气候,成为中国最大的天麻主产区之一,为保障天麻、猪苓产业稳步发展,课题组从不同生态环境条件的天麻种植区采集蜜环菌资源进行分离纯化,获得资源菌株18个,经过系统选育,筛选出优良菌株ZY-17,命名为“陕蜜2009”。该品种在秦巴山区多年多点的区域试验和生产试验中,表现出伴栽天麻产量高、菌种适应性强、稳定性好的特点。栽培试验表明,该品种伴栽天麻无性繁殖生产,比对照菌株(京-234)增产28.22%;伴栽天麻有性繁殖生产,比对照菌株(京-234)增产28.71%。

陕南地区不同羊肚菌菌株栽培比较试验

为研究筛选适宜陕南地区大田栽培的羊肚菌菌株。以7个不同羊肚菌菌株为研究对象,以菌丝生长速率、菌丝长势、原基分化时间、鲜重、折干率和抗逆性等为指标,进行羊肚菌栽培试验研究。结果表明:优良菌株是影响羊肚菌产量的关键因素。M-2菌株菌丝长势旺盛,菌丝生长速率快,子实体发育时间短,产量高,每667 m^(2)产量为198.13 kg,折干率12.86%,且抗逆性强;其次为M-6菌株,每667 m^(2)产量为167.07 kg,折干率为12.62%,抗逆性强。M-3产量最高,但抗逆性相对较差。羊肚菌六妹系列M-2和M-6菌株产量高、抗逆性强,可作为优良菌株在陕南地区进行大田栽培推广应用。

陕北榆林地区砂土动剪切模量比和阻尼比的统计研究

陕北榆林地区位于鄂尔多斯地块内部,其沉积地层主要为细砂。基于该地区大量的工程场地地震安全性评价报告,本文共收集了83组砂样动三轴试验数据,并分类统计分析了松散~稍密、中密和密实三种密实程度的砂土在8个典型剪应变下的动剪切模量比和阻尼比统计值。选取一个典型钻孔,建立土层地震反应模型,分别以本文“统计值”、“规范值”和“推荐值”作为模型参数进行土层地震反应计算,并对反应得到的地面峰值加速度与反应谱进行了对比分析。

三轴压缩条件下含界面重塑黄土力学特性试验

黄土细观界面是广泛分布在黄土体中的一种结构缺陷,是黄土灾变的重要控制因素。为探究细观界面对黄土力学行为的影响,在土样侧壁标注网络剖分线,开展预制界面重塑黄土常规三轴压缩试验,获取破坏后试样侧壁网络剖分线,分析不同位置细观界面对土体强度及变形破坏特征的影响。结果表明:①试样变形主要分为轴向变形和弯曲变形,并以轴向变形为主;破坏方式以“X”型破坏和45°剪切破坏为主;根据破坏形态、破坏规模和破坏后应力-应变曲线类型,将破坏后的侧壁网络剖分线分为弱硬化型、屈服后弱硬化型、软化型和双峰值强软化型4种类型。②试样应力-应变曲线以软化型为主,受细观界面位置及围压影响。围压为300 kPa时,中部界面土样表现为弱硬化型;围压为100 kPa时,中部界面土样表现为屈服后弱硬化型,顶部和底部界面土样表现为双峰值强软化型。③中部界面对土样强度的劣化作用最强,顶、底部界面次之。细观界面黄土的应力-应变特性和变形破坏特征,受界面位置、试验围压等因素共同影响,研究成果可为进一步研究细观界面黄土强度准则,揭示细观界面对黄土灾变机理提供参考。

晋陕豫交界区地震应变能的演变与地震趋势

本文采取动静结合、时空并举的方法，从地震应变能释放的时空分布入手，对晋陕豫交界区分时段进行了空间扫描计算，研究分析了１９７０年以来，该区的应变能释放的时空动态演变过程及其与地震的关系。指出该区地震活动存在着长趋势增强的背景。

2019-2021年陕西省结核病防治院患者的非结核分枝杆菌菌种分布特征及流行情况

目的分析陕西省结核病防治院患者的非结核分枝杆菌(NTM)菌种分布特征及流行情况,为临床诊断及防治提供依据。方法回顾性分析陕西省结核病防治院2019年7月至2021年12月分枝杆菌核酸检测阳性的呼吸道样本,对检出的NTM使用基因芯片法进行菌种鉴定统计不同菌种构成比,χ^(2)检验分析人口学资料及临床特征,采用logistic回归进行以肺部病灶严重程度为结局,评估不同NTM对肺部的病理损伤程度。结果NTM分离率为3.5%(128/3646);共检出7个菌种,前3位的分别是胞内分枝杆菌47份(36.7%,47/128)、龟/脓肿分枝杆菌34份(26.6%,34/128)、堪萨斯分枝杆菌32份(25.0%,32/128);年龄分布提示不同的NTM感染患者年龄构成比差异有统计学意义(χ^(2)=25.727,P<0.001),居住地差异有统计学意义(χ^(2)=15.227,P=0.002);多因素logistic回归分析显示,龟/脓肿分枝杆菌感染对肺部病理损伤程度较其他两种细菌轻(OR=0.188,P=0.039)。结论非结核分枝杆菌的种类主要以胞内分枝杆菌、龟/脓肿分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌这三类为主,且不同的NTM菌种对肺部的病理损伤程度不同。