一株产L-苹果酸黑曲霉菌株的诱变筛选及发酵培养基优化

为筛选一株产L-苹果酸能力强的黑曲霉菌株,通过紫外诱变与高浓度放线菌酮迭代诱变的方法,将野生型菌株诱变为一株产L-苹果酸能力强的黑曲霉菌株,并对其种子或发酵培养基成分进行优化。结果表明,诱变所得一株产L-苹果酸能力强的黑曲霉CGMCC NO.40550菌株,其摇瓶发酵时种子培养基最适葡萄糖浓度为60 g/L、最适氮源为(NH_4)_2SO_4 4.95 g/L,黑曲霉菌球形成最优转速220 r/min;发酵培养基最适葡萄糖和最适(NH_4)_2SO_4浓度分别为180 g/L和4.95 g/L,Cu SO_4·5H_2O为其生产苹果酸最佳微量元素,最适添加量为0.065 g/L。通过单因素实验的优化,优化后的培养基更有利于L-苹果酸的合成,发酵96 h时L-苹果酸产酸量达到18.15 g/L,显著提高了245%,L-苹果酸占总酸的百分比达到71.69%。本研究为L-苹果酸的工业化生产奠定基础。

脱落酸的摇瓶发酵工艺优化研究

【目的】通过脱落酸的摇瓶发酵工艺优化,提高脱落酸的摇瓶发酵水平,从而减少摇瓶效价误差,有利于诱变效应的分析。【方法】通过工艺试验确定对脱落酸摇瓶发酵的影响因素,对影响因素进一步进行正交优化试验,得到脱落酸摇瓶培养基的最优配比组合浓度。【结果】脱落酸摇瓶配方中的麦麸可以完全被黄豆粉替代,替代后其摇瓶效价从0.171 g/L提高到0.550 g/L,提高幅度达221.6%。经过进一步正交试验,以黄豆粉、麦芽糖、乙二醇为影响因素,摇瓶产量为评价指标,摇瓶产量结果显示黄豆粉为最显著影响因子,其次为麦芽糖。得到最佳摇瓶配方为黄豆粉5 g/L、麦芽糖10 g/L、乙二醇4 g/L,花生粉4 g/L,葡萄糖4 g/L,硫酸镁1 g/L。摇瓶发酵效价从0.205 g/L提高到1.441 g/L,比对照提高602.9%,其提高幅度较大。【结论】发酵摇瓶中黄豆粉替代麦麸更有利于发酵过程中脱落酸菌产素水平的提高。

咖啡酸的生物药剂学分类系统及其大鼠体内外相关性预测

目的测定咖啡酸在不同pH环境中的平衡溶解度以及油水分配系数,推测其生物药剂学分类系统(BCS)分类;测定咖啡酸片溶出曲线,将相关参数代入大鼠生理药动学(PBPK)模型建模,利用Gastroplus软件预测其大鼠体内外相关性。方法采用高效液相色谱法定量,色谱柱Agilent Eclipse Plus C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.32%冰醋酸溶液-甲醇(70∶30),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长323 nm,柱温25℃,进样体积10μL。采用摇瓶法和正辛醇-水体系测量咖啡酸在不同pH环境中的平衡溶解度、溶解度体积(DSV)和油水分配系数(P),推测其BCS分类;测定咖啡酸片在水、pH值1.2、pH值4.5和pH值6.8环境中溶出曲线,利用Gastroplus软件分析溶出曲线的Z-Factor值,将相关参数代入大鼠的PBPK模型,模拟大鼠体内药时(PK)曲线,与已知实测PK曲线进行比较,推测其大鼠体内外相关性。结果咖啡酸在pH值1.2、pH值4.5和pH值6.8环境中平衡溶解度为0.676、1.266和4.624 mg·L-1,DSV为443787、236967和64879 mL,为难溶性药物,且具有较强pH依赖性;咖啡酸在水、pH值1.2、pH值4.5和pH值6.8环境中油水分配系数(P)为4.33(logP=0.64)、28.87(logP=1.46)、19.77(logP=1.30)、0.28(logP=-0.56),推测其具有较高渗透性。软件模拟得到咖啡酸大鼠体内的C_(max)为0.358μg·mL^(-1),t_(max)为0.39 h,AUC为0.320μg·h^(-1)·mL^(-1),与已知的实测结果C_(max)为(0.250±0.037)μg·mL^(-1)、t_(max)为(0.33±0.12)h、AUC为(0.303±0.024)μg·h^(-1)·mL^(-1)一致,PK曲线基本吻合。结论咖啡酸为低溶解性、高渗透性的药物,推测其为BCS II类药物,其片剂在大鼠中表现出较高的体内外相关性。

卡那链霉菌培养基碳源、氮源及微量元素优化研究

通过单因素及多因素实验对卡那链霉菌生长繁殖的培养基进行了优化研究。结果表明:影响卡那链霉菌生长的固体培养基主要因素有碳源的选择及培养基灭菌前pH值调节,实验确定最佳的碳源为饴糖,培养基灭菌前pH:7.50左右;影响卡那链霉菌积累代谢产物的发酵培养基主要因素有碳源的选择,微量元素的添加,实验确定结果为:最佳碳源是乳糖,其次培养基中添加0.03%FeSO4后发酵液的滤速比对照提高了65.0%,摇瓶效价比对照提高了21.97%。

药物晶型研究中溶解度的高效测定

药物晶型研究是药学研究领域的一个重要分支,很多药物晶型研究实验设计需要大量的溶解度数据支撑。如何快速、高效获得大量的药物溶解度数据的同时又保证数据的准确性,已成为晶型研究的一个棘手问题。本文结合动态溶剂法和静态平衡法,提出一种采用高效液相色谱高效、快速地测定药物溶解度的方法,克服了这两种测定方法的缺点,并讨论了测试过程中的注意事项,提出了一些建设性的建议,供药物晶型研究人员参考。

RETRACTED: Determination of the Mesalazine Solubility at Biorelevant Temperature

Short Retraction NoticeThis article has been retracted to straighten the academic record. In making this decision the Editorial Board follows COPE's Retraction Guidelines. The aim is to promote the circulation of scientific research by offering an ideal research publication platform with due consideration of internationally accepted standards on publication ethics. The Editorial Board would like to extend its sincere apologies for any inconvenience this retraction may have caused. The full retraction notice in PDF is preceding the original paper, which is marked "RETRACTED".

基于CFD模拟的七烯甲萘醌发酵过程优化

七烯甲萘醌(menaquinone-7,MK-7)是维生素K2的重要组成部分之一,前期研究发现,摇瓶培养条件下MK-7的最高产量远高于搅拌釜反应器培养条件下的最高产量。为缩小从摇瓶放大至3 L搅拌釜反应器带来的差异,使用计算流体力学(CFD)及动态吸收法对不同转速下摇瓶与搅拌釜反应器内的剪切力及氧气传递性能进行比较,并探讨氧气供应及剪切力对枯草芽孢杆菌BS20菌体生长与MK-7合成的影响。结果表明,充足的氧气供应对菌体生长及MK-7合成有促进作用,但过高的剪切力会对菌体产生破坏作用,降低MK-7的产量。基于上述结果,在3 L搅拌釜反应器中,以较低搅拌转速(400 r/min)保证低剪切力,同时采用通富氧空气(氧气体积分数55%)的方式提高供氧水平,MK-7产量达到296.25 mg/L,比对照批次(氧气体积分数21%)提高152%,达到摇瓶培养最高水平的79%。本研究在搅拌釜反应器中所采用的降低搅拌转速、提高进气氧体积分数的方法,能够有效提高对剪切敏感且高好氧微生物的发酵性能。

邻苯二甲酸酯的摇瓶生物降解规律研究

用好氧活性污泥对 9种邻苯二甲酸酯进行了摇瓶生物降解研究 ,结果表明 ,邻苯二甲酸酯的摇瓶降解速率符合一级动力学 ,速率常数 (kb)与化合物的分子结构之间存在相关关系 ,其表达式为lnkb=0 0 2 6 2x2 - 0 6 6 7x +2 15 2 (r =0 976 ) ;降解半衰期与烷基链之间也存在相关性 ,表达式为t1 2 =0 0 391x2 +0 0 95 3x - 0 0 2 5 9(r=0 972 ) .邻苯二甲酸二甲酯 (DMP)浓度超过 6 0mg·L-1时 ,其自身降解速率下降 ,邻苯二甲酸盐浓度超过 5 0 0mg·L-1时 ,对邻苯二甲酸二乙酯 (DEP)

胶质芽孢杆菌发酵条件研究

通过单因子及正交实验对一株胶质芽孢杆菌NS0 1的培养基组成 (C、N、生长因子、无机盐 )及工艺条件 (温度、起始pH、装液量 )进行了研究。结果表明比较理想的培养基配方为 (% ) :葡萄糖 1,硫酸铵 0 .15 ,酵母膏 0 .0 1,KCl0 .0 1,MgSO4 ·7H2 O 0 .0 1,NaH2 PO4 0 .0 1,CaCO30 .1。起始 pH 7.5 ,培养温度 36℃ ,装液量 5 0mL/ 2 5 0mL锥形瓶。在此条件下活菌数可达 6 .5亿 ,是传统的胶质芽孢杆菌淀粉铵培养基下活菌数的 2 6 0 %。

硫化叶菌对镍钼硫化矿的浸出作用

对金属硫叶菌浸出镍钼硫化矿进行了研究.结果表明,有菌组镍的浸出率均在90%以上,而无菌组为77.64%;驯化菌比非驯化菌的浸出率高,前者镍和钼的浸出率分别为94.7%和70.2%,后者为93.1%和68.4%;pH为2时浸出效果最佳,镍浸出率达100%,钼浸出率为66.97%;粒径<0.048mm和<0.077mm的浸样镍浸出率均达到100%,钼浸出率分别为68.4%和64.5%;低矿浆浓度比高矿浆浓度的浸出率高,5g/L矿浆镍和钼的浸出率分别达100%和87.29%;在无菌条件下,浸样添加0.5g/LFe3+和对照组的镍浸出率分别为92.8%和76.6%,钼浸出率为52.56%和49.34%;嗜热菌(金属硫叶菌)比常温菌(氧化亚铁硫杆菌)的浸出率高,前者镍钼浸出率分别为93.17%和73.52%,后者为67.34%和38.36%.

藏红花细胞悬浮培养体系的建立及优化

基于诱导的藏红花细胞系,通过摇瓶法,优化了其液体培养基、接种量和种龄等培养条件,以建立藏红花细胞悬浮培养体系。结果表明,将生长在固体培养基上的藏红花愈伤组织接种在MS液体培养基(添加了2mg/L2,4-D,1mg/L6-BA和300mg/LCH)中,于(22±0.3)℃,120r/min的摇床上,暗培养30d,便可获得藏红花的悬浮细胞系。经优化其培养基、接种量和种龄,将种龄为20d的细胞系,按照5%接种量接种在液体B5培养基(添加了2mg/LNAA,1mg/L6-BA和300mg/LCH)中,于(22±0.3)℃,120r/min的摇床上,培养36d,细胞生物量(13.4g/L)和藏红花素产量(0.91g/L)均达到最高。本研究建立的藏红花细胞悬浮培养体系为其生物反应器放大培养奠定了基础。

平菇液体菌种摇瓶和发酵罐生长动力学模型的比较

作者选用玉米粉豆粕粉蔗糖液体培养基,分别采用摇瓶和40 L全自动机械搅拌通风发酵罐培养平菇天达300液体菌种,两种培养方式的菌丝体生长动力学模型均符合Logistic方程。摇瓶培养周期为8 d,最大比生长速率是0.050 h^(-1),菌丝体质量浓度是1.5001 g/dL。发酵罐培养周期是84 h,最大比生长速率是0.110 h^(-1),菌丝体质量浓度是1.4750 g/dL。应用发酵罐培养平菇天达300液体菌种更为高效。然而,摇瓶培养的液体菌种菌丝球直径小,单位体积培养液中菌丝球数量是发酵罐的1.4倍,可能与发酵罐培养过程中培养液的粘度下降速度快于摇瓶有关。

γ-癸内酯发酵条件的初步研究

通过对筛选出的一株酵母Y 1产GDL的发酵培养基组成及发酵工艺条件的摸索 ,并经正交实验 ,得到较优培养基配方为 :蛋白胨 3 5g/L ,酵母浸汁 2 5 g/L ,蓖麻油 5 % ,KH2 PO4 0 5 g/L ,Na2 HPO4 1 2 g/L ,MgSO4 ·7H2 O 2 4 g/L ,表面活性剂 0 4 % ,起始 pH7 0。在此条件下 ,发酵液中GDL含量可达 4 0 0mg/L。

两株甲苯高效降解菌降解性能的比较

利用自行研制的玻璃龙头塞三角瓶对2株甲苯降解高效菌的甲苯降解性能进行了测定和比较．在纯培养和以甲苯为单一碳源条件下进行摇瓶实验，结果发现，在初始液相浓度为0-75mg／L范围内，甲苯不会对2株菌的甲苯降解活性产生抑制作用．2株菌对甲苯进行降解的适宜pH值约为7-8，适宜温度范围为28-37℃．比较适宜条件下甲苯降解动力学参数可知，2号菌的甲苯降解性能优于1号菌，其最大比基质降解速率和表观最大比增殖速率分别为0．40h^-1和0．18h^-1．

12种黄酮化合物油水分配系数的测定

目的测定12种黄酮化合物的油水分配系数。方法采用经典摇瓶法与HPLC法测定油水分配系数,并进行比较。结果白杨素、芹菜素、木犀草素、山柰酚、桑色素、杨梅素、橙皮素、柚皮素、花旗松素、二氢杨梅素、刺芒柄花素、大豆黄素的Log P值分别为4.38、2.69、2.89、4.87、4.62、4.23、2.44、3.77、1.76、1.36、4.15、3.88。结论花旗松素与二氢杨梅素在体内能被较好地吸收,透过生物膜能力良好,而芹菜素、木犀草素和橙皮素亲脂性较强。黄酮化合物的油水分配系数与其结构有着密切关系。

补糖对丝氨酸摇瓶发酵产酸率的影响

在测定丝氨酸产生菌黄色短杆菌C -1 2摇瓶发酵生长曲线和糖代谢曲线的基础上 ,研究补糖对丝氨酸产酸率的影响 ,并确定摇瓶条件下最佳的补糖浓度、补糖时间及补糖种类。

培养方法对钝顶螺旋藻生长的影响

比较两种培养方法 :静置培养 (每天定时摇动 4次 )和摇瓶培养 (往复式摇床 )对钝顶螺旋藻生长的影响 .实验结果表明 :摇瓶培养能加速藻的生长 ,生长周期缩短 ,生长速度、生物量、叶绿素 a含量均高于静置培养 ,摇瓶培养能维持合适的溶解氧 .摇瓶培养装置易于构建 ,混合效果良好 ,不易使螺旋藻丝断裂 ,还可使生物量提高约 2 2 .0 % .

白色金针菇摇瓶发酵培养基的优化研究

以菌丝球干质量、密度、直径为考察指标,利用单因素试验和L9(34)正交试验对白色金针菇摇瓶发酵培养基进行优化。结果表明,最适摇瓶培养基配方为:葡萄糖10 g/L、红糖13 g/L、黄豆粉3 g/L、KH_2PO_40.5 g/L、MgSO_40.5 g/L、VB10.01 g/L。在此条件下,白色金针菇菌丝球干质量达到15.48 g/L,菌丝球密度66.48个/mL,菌丝球直径为1.45 mm。

卑霉素摇瓶发酵工艺研究

根据代谢发酵控制原理,采用二次回归正交旋转组合设计,对卑霉素摇瓶发酵培养基组分及其接种量、装量和初始pH摇瓶发酵条件进行了优化。结果表明,卑霉素摇瓶发酵培养基的最优配方为:豆饼粉45 g/L,可溶性淀粉5 g/L,甘露醇24 g/L,葡萄糖5 g/L,硫酸铵2 g/L,硫酸镁0.05 g/L;最优发酵条件为:摇瓶装量100 mL/L,接种量8%,C aCO35 g/L(调节pH值),在温度28℃、发酵周期40 h的优化条件下,得到卑霉素的效价值为77.12μg/mL,较对照(64.11μg/mL)提高了20.29%。

不同茯苓化学成分的研究

本文测定了天然茯苓、发酵茯苓、药性发酵茯苓和复合药性发酵茯苓的多糖、总糖、氨基酸和微量元素的含量。研究结果表明不同茯苓的化学成分有较大差异,探讨了上述差异产生的原因。上述研究为茯苓相关保健食品和药品的开发提供了科学依据和参考。