目的:基于网络药理学和分子对接分析芍胡调经方治疗原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的作用机制,并通过动物实验加以验证。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database a...目的:基于网络药理学和分子对接分析芍胡调经方治疗原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的作用机制,并通过动物实验加以验证。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)和PharmMapper数据库分析芍胡调经方的活性成分与靶点,在GeneCards数据库和DrugBank数据库搜索痛经的靶点,并获取两者的交集靶点。通过Cytoscape 3.9.1软件构建“活性成分-交集靶点”网络,根据拓扑分析筛选关键成分。将交集靶点导入STRING数据库,构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,采用Network Analysis插件进行拓扑分析,从而筛选核心靶点。借助Metascape网站进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析,最后进行分子对接验证。40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、芍胡调经方组、布洛芬组,每组10只。除空白组外,其余大鼠采用冰水浴联合苯甲酸雌二醇皮下注射以及缩宫素腹腔注射法建立PD模型。造模第3天开始给药,连续12 d。末次给药后,计算大鼠的扭体潜伏期和扭体次数;HE染色观察子宫病理形态,ELISA法检测血清雌二醇(estradial,E2)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)含量。结果:芍胡调经方活性成分210个,靶点255个。痛经靶点831个,其与芍胡调经方的交集靶点67个,包括信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transduction 3,STAT3)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等。槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、木犀草素、柚皮素、芍药苷和甘草苷可能是芍胡调经方治疗痛经的关键成分。STAT3、AKT1、TNF、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)、雌激素受体1(estrogen receptor 1,ESR1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)可能是芍胡调经方治疗痛经的核心靶点。KEGG通路主要包括PI3K-Akt信号通路、雌激素信号通路、MAPK信号通路等。分子对接显示,芍胡调经方中的关键成分与核心靶点具有较好的结合活性。与空白组比较,模型组大鼠的扭体潜伏期缩短、扭体次数增加(P<0.05);与模型组比较,芍胡调经方组、布洛芬组大鼠的扭体潜伏期延长、扭体次数减少(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠的脏器系数(子宫、心、肝、肺、肾)升高(P<0.05);与模型组比较,芍胡调经方组(子宫、心、肝、肺)、布洛芬组(子宫)大鼠的脏器系数降低(P<0.01)。HE染色显示,空白组大鼠子宫病理形态无明显异常;模型组大鼠子宫内膜出现明显肿胀、损伤和脱落,药物组大鼠子宫内膜肿胀程度有所减轻。与空白组比较,模型组大鼠血清E2、PGE2含量升高(P<0.01);与模型组比较,芍胡调经方组、布洛芬组大鼠血清E2、PGE2含量降低(P<0.05)。结论:芍胡调经方可能通过槲皮素、山柰酚等活性成分,调节雌激素信号通路,作用于STAT3、AKT1等靶点,降低血清E2和PGE2水平,从而发挥治疗PD的作用。展开更多
文摘目的:基于网络药理学和分子对接分析芍胡调经方治疗原发性痛经(primary dysmenorrhea,PD)的作用机制,并通过动物实验加以验证。方法:采用中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)和PharmMapper数据库分析芍胡调经方的活性成分与靶点,在GeneCards数据库和DrugBank数据库搜索痛经的靶点,并获取两者的交集靶点。通过Cytoscape 3.9.1软件构建“活性成分-交集靶点”网络,根据拓扑分析筛选关键成分。将交集靶点导入STRING数据库,构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,采用Network Analysis插件进行拓扑分析,从而筛选核心靶点。借助Metascape网站进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析,最后进行分子对接验证。40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、芍胡调经方组、布洛芬组,每组10只。除空白组外,其余大鼠采用冰水浴联合苯甲酸雌二醇皮下注射以及缩宫素腹腔注射法建立PD模型。造模第3天开始给药,连续12 d。末次给药后,计算大鼠的扭体潜伏期和扭体次数;HE染色观察子宫病理形态,ELISA法检测血清雌二醇(estradial,E2)和前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)含量。结果:芍胡调经方活性成分210个,靶点255个。痛经靶点831个,其与芍胡调经方的交集靶点67个,包括信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transduction 3,STAT3)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT1)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等。槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、木犀草素、柚皮素、芍药苷和甘草苷可能是芍胡调经方治疗痛经的关键成分。STAT3、AKT1、TNF、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)、雌激素受体1(estrogen receptor 1,ESR1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)可能是芍胡调经方治疗痛经的核心靶点。KEGG通路主要包括PI3K-Akt信号通路、雌激素信号通路、MAPK信号通路等。分子对接显示,芍胡调经方中的关键成分与核心靶点具有较好的结合活性。与空白组比较,模型组大鼠的扭体潜伏期缩短、扭体次数增加(P<0.05);与模型组比较,芍胡调经方组、布洛芬组大鼠的扭体潜伏期延长、扭体次数减少(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠的脏器系数(子宫、心、肝、肺、肾)升高(P<0.05);与模型组比较,芍胡调经方组(子宫、心、肝、肺)、布洛芬组(子宫)大鼠的脏器系数降低(P<0.01)。HE染色显示,空白组大鼠子宫病理形态无明显异常;模型组大鼠子宫内膜出现明显肿胀、损伤和脱落,药物组大鼠子宫内膜肿胀程度有所减轻。与空白组比较,模型组大鼠血清E2、PGE2含量升高(P<0.01);与模型组比较,芍胡调经方组、布洛芬组大鼠血清E2、PGE2含量降低(P<0.05)。结论:芍胡调经方可能通过槲皮素、山柰酚等活性成分,调节雌激素信号通路,作用于STAT3、AKT1等靶点,降低血清E2和PGE2水平,从而发挥治疗PD的作用。
