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绵羊β-乳球蛋白基因调控序列的分离、克隆及序列分析
被引量:
2
1
作者
李雪玲
施一燊
+3 位作者
郭继彤
于海泉
王达珍
张肇英
《内蒙古大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
1996年第3期371-377,共7页
根据绵羊β-乳球蛋白基因调控区DNA序列设计了两个引物,以绵羊基因组DNA为模板,用PCR技术扩增,得约900hP的DNA片段插入到pUC18质粒的XbaI/KpnI位点之间.PCR产物的克隆经双酶切、PCR检测和序...
根据绵羊β-乳球蛋白基因调控区DNA序列设计了两个引物,以绵羊基因组DNA为模板,用PCR技术扩增,得约900hP的DNA片段插入到pUC18质粒的XbaI/KpnI位点之间.PCR产物的克隆经双酶切、PCR检测和序列分析证明是绵羊β-乳球蛋白基因的调控序列.序列分析结果表明该克隆片段与绵羊β-乳球蛋白基因相应DNA序列相比有很高的一致性.研究结果为指导异源基因的表达和进一步利用乳腺特异表达的转基因动物生产医用蛋白提供了有效的调控序列.
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关键词
绵羊
调控序列
PCR
β乳球蛋白基因
分离
无性系
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职称材料
人胰岛素原乳腺表达基因构建及其在转基因小鼠乳汁中的表达
2
作者
刘明军
武坚
+4 位作者
李文蓉
黄俊成
杨冬梅
玛依拉
郭志勤
《草食家畜》
2001年第S2期179-185,共7页
从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ...
从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ,以及 1 .2kb人胰岛素原基因组DNA。将绿色荧光蛋白基因与BLG 5’和 3’调控区融合后转化乳腺细胞系 (TD47) ,通过荧光显微镜观察和紫外吸收检测 ,证明GFP在TD47乳腺细胞系中获得了表达。用BLG -hINS基因分别注射小鼠 ,通过PCR和限制性内切酶检测分析 ,共获得 5只转基因小鼠。经放免 (RIA)检测 ,两只转基因母鼠乳汁中人胰岛素原的表达量分别为 37.44和 39.99mg/L。该结果表明 ,本文所构建的 pBLG乳腺表达结构 。
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关键词
人胰岛素原
羊乳球蛋白
转基因
乳腺表达
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职称材料
题名
绵羊β-乳球蛋白基因调控序列的分离、克隆及序列分析
被引量:
2
1
作者
李雪玲
施一燊
郭继彤
于海泉
王达珍
张肇英
机构
内蒙古大学生物学系
出处
《内蒙古大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
1996年第3期371-377,共7页
基金
国家自然科学基金
文摘
根据绵羊β-乳球蛋白基因调控区DNA序列设计了两个引物,以绵羊基因组DNA为模板,用PCR技术扩增,得约900hP的DNA片段插入到pUC18质粒的XbaI/KpnI位点之间.PCR产物的克隆经双酶切、PCR检测和序列分析证明是绵羊β-乳球蛋白基因的调控序列.序列分析结果表明该克隆片段与绵羊β-乳球蛋白基因相应DNA序列相比有很高的一致性.研究结果为指导异源基因的表达和进一步利用乳腺特异表达的转基因动物生产医用蛋白提供了有效的调控序列.
关键词
绵羊
调控序列
PCR
β乳球蛋白基因
分离
无性系
Keywords
sheep
β-lactoglobulin (
blg
) regulatory sequence polymerase chain reaction (PCR)
分类号
S826.2 [农业科学—畜牧学]
Q781 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
人胰岛素原乳腺表达基因构建及其在转基因小鼠乳汁中的表达
2
作者
刘明军
武坚
李文蓉
黄俊成
杨冬梅
玛依拉
郭志勤
机构
新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室
出处
《草食家畜》
2001年第S2期179-185,共7页
文摘
从绵羊和人的基因组中用PCR扩增分别克隆了羊乳球蛋白 (BLG) 5’和 3’调控区及人胰岛素原 (hINS)基因组DNA ,并以此为基础构建了人胰岛素原乳腺表达载体 ( pSh -BLG -hINS)。该表达载体包括 4.2kbBLG 5’调控区和 2 .1kbBLG 3’调控区 ,以及 1 .2kb人胰岛素原基因组DNA。将绿色荧光蛋白基因与BLG 5’和 3’调控区融合后转化乳腺细胞系 (TD47) ,通过荧光显微镜观察和紫外吸收检测 ,证明GFP在TD47乳腺细胞系中获得了表达。用BLG -hINS基因分别注射小鼠 ,通过PCR和限制性内切酶检测分析 ,共获得 5只转基因小鼠。经放免 (RIA)检测 ,两只转基因母鼠乳汁中人胰岛素原的表达量分别为 37.44和 39.99mg/L。该结果表明 ,本文所构建的 pBLG乳腺表达结构 。
关键词
人胰岛素原
羊乳球蛋白
转基因
乳腺表达
Keywords
Human Proinsulin
sheep blg
Gene Transfer
Mammary gland Expression
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
绵羊β-乳球蛋白基因调控序列的分离、克隆及序列分析
李雪玲
施一燊
郭继彤
于海泉
王达珍
张肇英
《内蒙古大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
1996
2
下载PDF
职称材料
2
人胰岛素原乳腺表达基因构建及其在转基因小鼠乳汁中的表达
刘明军
武坚
李文蓉
黄俊成
杨冬梅
玛依拉
郭志勤
《草食家畜》
2001
0
下载PDF
职称材料
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参考文献
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