基于网络药理学和动物实验探讨加味升降散治疗糖尿病肾脏病的分子机制

目的:通过网络药理学研究预测加味升降散治疗糖尿病肾脏病(DKD)的潜在作用机制,并通过db/db小鼠动物模型验证药物疗效及机制,拓展经典方剂的临床运用。方法:首先通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)收集加味升降散药物的主要化学成分和潜在的作用靶点,然后通过Drug Bank数据库、GenCards数据库、OMIM数据库收集DKD的疾病靶点;利用Draw Venn的Diagram平台获取药物与疾病的交集靶点,再使用String平台建立PPI网络系统,获取药物与疾病的核心作用靶点。通过Metascape解析“中药-成分-靶点”及参与的主要生物学过程及相关通路,然后通过Cytoscape 3.7.2软件系统建立“加味升降散成分-糖尿病肾脏病靶点-通路”的网络系统。将30只8周龄db/db小鼠按照体质量分层法随机分为模型组,培哚普利组和加味升降散低、中、高剂量组,每组6只。另取6只8周龄db/m小鼠,为空白对照组。空白对照组和模型组以7.00 g/(kg·d)纯水灌胃,加味升降散低、中、高剂量组分别予低[3.50 g/(kg·d)]、中[7.00 g/(kg·d)]、高[14.00 g/(kg·d)]剂量加味升降散灌胃,培哚普利组予培哚普利[0.48 mg/(kg·d)]灌胃,连续治疗12周。实验结束后,采用全自动生化分析仪检测小鼠血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠24 h尿白蛋白、NGAL、TNF-α、IL-1β、VCAM-1、MCP-1、HbA1c;采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测小鼠p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-NF-κB p65、NF-κB p65蛋白表达水平。结果:通过分析,共获取加味升降散中85种主要药物活性成分、976个靶点,糖尿病肾脏病主要靶点872个,取得药物及疾病的交集靶点226个,其中药物核心活性成分为槲皮素、木犀草素、β-谷固醇、山柰酚、毛茛黄素、棕榈油酸等,核心靶点有PIK3CA、PIK3R1、AKT1、AKT2、MAPK14、IL1β、TNF、IL6等,参与的主要通路为AGE-RAGE信号通路在糖尿病并发症中的作用。动物实验结果表明,与空白对照组比较,模型组小鼠SCr、BUN明显升高,24 h尿白蛋白增加,血清NGAL、TNF-α、IL-1β、VCAM-1、MCP-1、HbA1c水平升高,p-PI3K、p-PI3K/PI3K、p-Akt、p-Akt/Akt降低,p-NF-κB p65、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高。与模型组比较,加味升降散可使db/db小鼠SCr、BUN下降,24 h尿微量白蛋白减少,NGAL、HbA1c水平降低,TNF-α、IL-1β、VCAM-1、MCP-1等炎症因子的表达含量降低,并能上调p-PI3K、p-Akt的表达水平(P<0.05),抑制p-NF-κB p65蛋白的活化(P<0.05)。结论:加味升降散可通过多靶点、多通路治疗糖尿病肾脏病,其机制可能为调控PI3K/Akt/NF-κB信号通路。

基于数据挖掘对升降散、清瘟败毒饮性味规律的研究

目的:评价升降散、清瘟败毒饮的疗效,总结其性味组方规律,为临床实践提供新的思路和方法。方法:通过检索国内升降散、清瘟败毒饮的临床文献,以纳入、排除标准进行筛选,对纳入后的文献使用RevMan 5.4软件进行meta分析,并总结其性味组方规律。结果:本研究共纳入19篇文章,meta分析显示,中药治疗试验组效果均优于对照组(P<0.01)。药物主要性寒、温、平,味苦、甘、辛。结论:升降散、清瘟败毒饮临床使用效果良好。虽然通过meta分析总结了性味组方规律,但其仍需在临床实践中验证。

高立珍主任运用大柴胡汤验案举隅

大柴胡汤是临床常用方,出自张机(字仲景)《伤寒杂病论》,具有和解少阳、内泻热结之功效,是治疗少阳阳明合病的经典方。随着中医药的不断传承发展,现代医疗水平的不断进步,该方被广泛应用于消化系统疾病、循环系统疾病、呼吸系统疾病、内分泌和代谢性疾病及免疫性疾病的治疗中。导师高立珍主任医师为湖北中医药大学教授,硕士研究生导师,第四批全国中医临床优秀人才,从事临床30载,临床经验极为丰富,对经方的使用有独特的体会。该文介绍了高老师运用大柴胡汤治疗各科杂病的思路及经验:一是立足原文,方证相应,根据大柴胡汤原文,总结了如下症状作为应用大柴胡汤的指征:“按之心下满痛,或心下急,或心下痞硬”“呕不止,或呕吐而下利,或便秘,或腹胀、嗳气,或口苦”“郁郁微烦”“发热汗出不解,或寒热往来”,不必诸证悉俱,但见一证便可用之。二是异病同治,经方新用:基于传统医学“异病同治”理论,谨遵病机,结合现代医学药理作用研究,凡病机属少阳阳明合病者,无论何种疾病,均可运用大柴胡汤加减治疗。现结合高老师的三则医案探讨其运用大柴胡汤加减治疗股外侧皮神经炎、荨麻疹、皮脂腺囊肿等杂病的经验,为临床应用提供参考。

升降散对脓毒症小鼠 Th1／Th2和 Th17／Treg失衡的干预

目的：观察中药升降散对脓毒症小鼠CD4＋T辅助细胞Th1／Th2和Th17／Treg失衡的干预作用。方法80只小鼠随机分为对照组、假手术组、脓毒症组和升降散组，脓毒症造模后比较升降散干预前后不同时间段各组小鼠Th1、Th2、Th17和Treg细胞占辅助T细胞比例及Th1／Th2、Th17／Treg比值的变化。结果①Th1细胞比例：脓毒症组24 h内持续上升，升降散组24 h内逐渐下降，12 h和24 h脓毒症组均高于对照组、假手术组和升降散组（ P＜0．05或＜0．01）。Th2细胞比例各时间段在各组之间差异均无统计学意义（ P＞0．05）。 Th17细胞比例：升降散组24 h内呈逐渐升高趋势；6 h脓毒症组显著高于对照组、假手术组和升降散组（P＜0．01），12 h和24 h脓毒症组均高于对照组和假手术组（P＜0．05或＜0．01），12 h和24 h升降散组显著高于对照组和假手术组（ P＜0．01）。 Treg细胞比例：脓毒症组、升降散组24 h内呈逐渐升高趋势；各时间段假手术组、脓毒症组和升降散组均高于对照组（P＜0．05或＜0．01），24 h脓毒症组高于假手术组和升降散组（P＜0．05或＜0．01）。②Th1／Th2比值：各时间段脓毒症组均高于对照组（P＜0．05或＜0．01），升降散组与对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05），24 h脓毒症组高于假手术组和升降散组（P＜0．05）；Th17／Treg比值：各时间段脓毒症组均高于对照组和假手术组（P＜0．05或＜0．01），6 h脓毒症组显著高于升降散组（P＜0．01），12 h和24 h升降散组显著高于假手术组和对照组（P＜0．01）。结论升降散具有调节脓毒症小鼠CD4＋T辅助细胞Th1／Th2和Th17／Treg失衡的作用。

升降散对脓毒症患者Th1/Th2失衡及相关调节因子的干预

目的研究中药升降散对脓毒症患者血清Th1/Th2失衡及相关调节因子T-bet、GATA-3的干预作用。方法将55例脓毒症患者随机分为常规组(27例)和升降散组(28例),另将健康志愿者9例设为对照组。常规组患者给予西医常规治疗,升降散组患者在西医常规治疗的基础上加用升降散100 m L,每日2次口服或鼻饲,对照组患者予口服安慰剂;3组的疗程均为3 d。比较治疗前后3组患者中医证候评分、白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、血清Th1/Th2及其相关转录因子T-bet、GATA-3的水平。结果常规组与升降散组比较,治疗后中医证候评分、WBC、Th1/Th2和T-bet的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),2组患者治疗后CRP、PCT和GATA3的差异无统计学意义(P>0.05);2组与对照组比较,除GATA3外,其他各项指标差异均有统计学意义(P<0.01)。结论升降散可以改善脓毒症患者中医临床征候和炎症反应指标,对血清Th1/Th2失衡及其相关调节因子T-bet、GATA-3的水平具有干预作用。

升降散对脓毒症小鼠细胞炎症因子抑制作用的研究

目的观察中药升降散对脓毒症小鼠炎症细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)、白介素-4(IL-4)和白介素-6(IL-6)的抑制作用。方法 72只小鼠随机分为对照组、脓毒症组与升降散组,脓毒症造模后比较升降散干预前后不同时间段各组小鼠IFN-γ、TGF-β、IL-4和IL-6水平的变化。结果 IFN-γ水平24 h内脓毒症组呈逐渐上升趋势,升降散组呈逐渐下降趋势,12 h和24 h脓毒症组显著高于升降散组(P<0.01)。TGF-β水平24 h内升降散组均呈逐渐下降趋势,各时段均低于脓毒症组(P<0.05或P<0.01)。IL-4水平24 h内升降散组和脓毒症组呈逐渐下降趋势,24 h升降散组低于脓毒症组和对照组(P<0.05或P<0.01)。IL-6水平24 h内升降散组和脓毒症组均呈逐渐下降趋势,各时段脓毒症组均高于升降散组和对照组(P<0.01),各时段升降散组均显著高于对照组(P<0.01)。结论升降散具有抑制脓毒症小鼠炎症细胞因子IFN-γ、IL-4、TGF-β和IL-6的作用。

肺肠合治法对哮喘小鼠血清总IgE影响的实验研究

目的:采用肺肠合治法原理,运用加味升降散方药,探讨该方法治疗哮喘的免疫学作用机理。方法:将小鼠随机分为空白组、模型组、肺肠合治组、治肺组、治肠组和阳性对照组共6组,除空白组外均用鸡卵清蛋白致敏并激发哮喘,采用酶连免疫法检测各组血清总IgE。结果:腹腔注射鸡卵清蛋白可使小鼠血清总IgE水平增高,药物干预可使IgE水平降低;模型组与空白组比较血清总IgE水平明显升高(P(0.01);阳性对照组、肺肠合治组、治肺组、治肠组血清总IgE含量依次升高,与模型组比较均有显著差异(P(0.01)。结论:本方法对哮喘小鼠有治疗作用,其平喘作用与降低哮喘模型小鼠异常升高的血清总IgE水平,参与机体的免疫调节有关。

升降散对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞NF-κB信号的影响

目的研究升降散对LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)TLR4表达及其下游NF-κB信号通路的影响。方法用不同浓度LPS(0、2、10μg/mL)诱导NR8383细胞,采用Real-time PCR和Western Blotting分别检测TLR4的mRNA和蛋白表达水平。用带有NF-κB的质粒转染NR8383细胞,双荧光素酶报告基因检测NF-κB活性,Western Blotting检测磷酸化p65表达水平,Real-time PCR检测细胞因子TNF-α、A20、IL-6和IL-1β的mRNA表达水平,ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β的含量。将升降散作用于LPS成功诱导NF-κB上调的NR8383细胞,Real-time PCR、Western Blotting、双荧光报告基因检测和ELISA实验检测升降散在NR8383细胞中对LPS诱导NF-κB信号通路的影响。结果 LPS成功诱导NR8383细胞中NF-κB上调,在蛋白表达和mRNA表达水平均证实,LPS能梯度诱导TLR4高表达,且与LPS浓度呈正相关;同时,LPS能够诱导TLR4下游NF-κB的激活,增加下游靶基因编码细胞因子的合成与分泌,且与LPS浓度呈正相关。10μg/mL升降散作用NR8383细胞后,能抑制LPS诱导TLR4的高表达和下游NF-κB的激活。结论 LPS能梯度诱导NR8383细胞中TLR4的高表达及其下游NF-κB的激活,升降散能够显著抑制该诱导作用。

不同剂量升降散对脓毒症心肌P38MAPK信号转导通路干预作用的研究

目的探讨升降散保护脓毒症心肌损伤的分子机制。方法雄性成年SD大鼠随机分为正常组、模型组、升降散低剂量组、升降散中剂量组、升降散高剂量组和P38MAPK抑制组。采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)制备脓毒症大鼠模型,造模后4.8.12 h进行观察。升降散组于造模后2 h分别给予升降散冻干粉1.5 g/kg、3 g/kg、6 g/kg灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃。P38MAPK抑制组于造模前2 h分别给予P38MAPK抑制剂(SB203580)2 mg/kg腹腔皮下注射。腹主动脉留取血标本和心脏组织做相关检测。观察和检测各时间点大鼠病死率、血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平、肿瘤坏死因子-a(tumor necrosis factor-a,TNF-a)、p-p38MAPK蛋白水平,及p-p38MAPK mRNA、TNF-a mRNA、IL-6 mRNA、诱导型一氧化氮合酶mRNA(inducible nitric oxide synthase mRNA,iNOS mRNA)相对值水平变化。结果造模后各项检测指标均有所上升。升降散中剂量组8、12 h TNF-a水平均明显低于模型组(P=0.024,P<0.001);与模型组比较,升降散髙剂量组各时间点TNF-a均明显下降(P<0.001)。升降散低剂量组8 h IL-6水平低于模型组(P=0.022);升降散中剂量、高剂量组各时间点IL-6水平明显低于模型组(P<0.001)。升降散中、高剂量组各时间点p-P38MAPK蛋白表达较模型组降低。升降散中剂量组8、12 h p-P38 MAPK mRNA较模型组均明显下降(P<0.001);高剂量组各时间点p-P38MAPK mRNA均较模型组有所下降(P<0.001)o升降散中剂量组8J2 hTNF-a mRNA较模型组下降(P=0.018<0.001);升降散高剂量组各时间点TNF-a mRNA均较模型组下降(P<0.001)。升降散中剂量组8、12 h IL-6 mRNA较模型组下降(P=0.008,P<0.001);升降散高剂量组4、8、12 h IL-6 mRNA较模型组下降(P=0.036,P<0.001,P<0.001)。升降散低剂量组12 h iNOS mRNA较模型组下降(P=0.043);中剂量组8、12 h iNOS mRNA较模型组下降(P<0.001,P=0.002);升降散高剂量组各时间点iNOS mRNA均下降(P=0.036,P<0.001,P=0.002)。结论升降散中、高剂量组通过p38信号通路减少p-p38MAPK mRNA的表达及p-p38MAPK蛋白水平,以此减少TNF-a mRNA、IL-6 mRNA、iNOS mRNA的合成,最终减少心肌细胞损伤。

加味升降散治疗原发性膜性肾病临床研究

目的:研究加味升降散对原发性膜性肾病(IMN)的临床疗效。方法:将60例确诊为原发性膜性肾病的患者随机分为治疗组和对照组,每组30例,对照组患者单纯给予西医治疗,治疗组患者在对照组基础上加用加味升降散,分别于治疗前、治疗后1个月、2个月对患者的临床症状积分、24 h尿蛋白定量、血清总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、血尿素氮、血肌酐、血尿酸、血常规、谷丙转氨酶、谷草转氨酶进行检测分析。结果:与治疗前相比,治疗后1个月,治疗组浮肿、倦怠乏力积分较治疗前有所下降(P<0.05);治疗后2个月,两组浮肿、倦怠乏力、纳呆口腻、腹胀身重积分较治疗前下降(P<0.05),其中浮肿、倦怠乏力积分较治疗前显著下降(P<0.01),治疗组优于对照组(P<0.05)。与治疗前相比,治疗后1个月两组24 h尿蛋白定量均有所下降(P<0.05),治疗后2个月与治疗前相比,两组24 h尿蛋白定量下降显著(P<0.01),治疗组优于对照组(P<0.01);与治疗前相比,治疗后2个月两组血清总蛋白、白蛋白均有所上升(P<0.05);与治疗前相比,治疗后2个月两组血清总胆固醇、甘油三酯均有所下降(P<0.05),总胆固醇下降显著(P<0.01);与治疗前相比,两组血常规、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血尿素氮、血肌酐、血尿酸未见明显变化。结论:加味升降散具有减轻IMN患者临床症状、降低尿蛋白、提高血浆蛋白水平、降低血脂的作用,且安全性可靠。

升降散合五苓散治疗小儿秋季腹泻120例

目的:观察中药治疗小儿秋季腹泻的疗效。方法:120例患儿口服升降散合五苓散。结果:总有效率93%。结论:升降散合五苓散口服可治疗小儿秋季腹泻。

白长川从小柴胡汤与升降散对寒温少阳气机浅析

白长川在外感热病的临床治疗中最推崇的两个方子,即为小柴胡汤和升降散,此二方均主少阳气机,一出入一升降。二者一重手少阳,一重足少阳,联合应用有纵横开阖之意,使一切少阳流毒宣泄外出。

升降散源流正误

目的:探寻升降散源流。方法:运用文献整理、归纳法进行考证。结果:该方源于明代龚廷贤《万病回春》后经清代陈良佐更名为陪赈散,再经杨璇二次改名为升降散。叶霖在增订张鹤腾《伤暑全书》时从杨璇著作中引入此方。结论:升降散并非源于《伤暑全书》。

基于“火郁发之”理论探讨升降散在肺系疾病中的应用

文章基于“火郁发之”的理论探讨升降散的方义,并探讨升降散运用于肺系疾病的临床特点及治疗原则。张念志教授认为临床辨证当以郁为着眼点,治疗应明辨火郁之因,因势利导,宣透郁邪,再者调理气机升降出入,使郁热自除,气机畅达,阴平阳秘。现将吾师之治疗经验总结如下,以飨同道。

中药升降散干预脓毒症免疫功能紊乱的临床疗效及其可能机制探讨

目的评估中药升降散对纠正脓毒症免疫功能紊乱和改善患者症状的临床疗效。方法选取2014年6月至2016年6月在宁夏回族自治区工人医院就诊的53例脓毒症患者作为研究对象,根据住院号的奇偶性分为观察组(n=28)和对照组(n=25)。2组均予以西医常规治疗,观察组在此基础上加用升降散治疗,对照组则相应给予生理盐水。观察2组在治疗后第1、3和7天的免疫指标变化和记录28天内的临床结局。结果与对照组相比,观察组患者在给药第7天时的CD4^+T细胞计数、CD8^+T细胞计数和m HLADR表达显著增加(P<0.05)。进一步评估单核细胞功能结果显示,与对照组相比,观察组患者在给药第3天和第7天的单核细胞分泌的IL-6和TNF-α水平显著提高(P<0.05),而在第7天的IL-10水平显著降低(P<0.05)。观察组患者的ICU住院时间、APACHE II评分、Marshall评分和血管加压素使用时间均显著低于对照组(P<0.05)。结论升降散可以纠正脓毒症患者的细胞免疫,并且可作为一个有希望的脓毒症辅助治疗方案。

大柴胡汤合升降散加减治疗小儿疱疹性口腔炎临床研究

目的:观察大柴胡汤合升降散治疗小儿疱疹性口腔炎的疗效。方法:将78例疱疹性口腔炎患儿随机分为治疗组48例和对照组30例,治疗组给予大柴胡汤合升降散加减,对照组给予阿糖腺苷抗病毒治疗,观察患儿退热时间、疱疹消散及溃疡愈合时间,比较两组的临床疗效。结果:退热时间,治疗组为(2.0±1.5)d,对照组为(3.0±1.2)d;疱疹消散及溃疡愈合时间,治疗组为(5.0±1.3)d,对照组为(7.0±1.1)d;两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗组有效率为93.75%,对照组有效率为80.00%;两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大柴胡汤合升降散治疗小儿疱疹性口腔炎疗效较好。

夏永良运用丹栀逍遥散合升降散治疗痤疮经验浅析

[目的]探讨夏永良主任治疗肝郁热毒型痤疮的临床经验。[方法]通过对夏永良主任门诊诊治肝郁热毒型痤疮的病例进行收集整理,分析夏主任治疗肝郁热毒型痤疮的诊治思路,并总结相关治疗经验及用药特色,最后通过分析典型案例进一步论证。[结果]夏永良主任认为肝郁热毒型痤疮的主要病机为肝气郁滞,肝郁化火,热毒壅滞,火毒相搏,攻于肌表,故而为疮。根据该病肝郁热毒的特点,主张以疏肝解郁、泻火解毒、凉血活血为治法。夏主任在治疗该类型痤疮时,立足辨证施治,以丹栀逍遥散合升降散治疗,并结合自己丰富的临证经验,灵活加减,取得了较好的临床疗效。所举验案为肝郁热毒型痤疮,治以疏肝解郁、泻火解毒、凉血活血,方用丹栀逍遥散合升降散加减,标本同治,疗效确切。[结论]夏永良主任认为治疗肝郁热毒型痤疮必须从整体出发,辨证辨病相结合,从"气、火、毒、瘀"多角度论治,其临床经验值得学习和推广。

柴胡升降散治疗亚急性甲状腺炎的临床观察

目的:观察柴胡升降散治疗亚急性甲状腺炎的临床疗效。方法:选取符合纳入标准的108例亚急性甲状腺炎的患者,按随机数字表法分为治疗组与对照组,各54例,对照组予以泼尼松片治疗,治疗组予以柴胡升降散治疗;两组疗程均为8周;观察两组患者治疗前后临床疗效、中医证候积分、炎症指标、甲状腺功能指标及B超甲状腺肿块大小变化情况、不良反应情况;停药后随访半年,观察两组复发率、甲状腺功能减退症发生率。结果:治疗组总有效率达92.59%,优于对照组的66.70%(P<0.05);治疗组在改善中医证候积分方面优于对照组(P <0.01);治疗组治疗后炎症指标、甲状腺功能及B超甲状腺肿块大小变化情况与对照组比较差异无统计学意义(P> 0.05);治疗组不良反应发生率为3.70%,对照组不良反应发生率为22.20%;治疗组在复发和甲状腺功能减低发生方面明显好于对照组(P <0.05)。结论:柴胡升降散治疗亚急性甲状腺炎的临床疗效可靠,并能明显改善患者的临床症状及体征,不良反应很少,在减少病情复发和甲状腺功能减低方面具有优势,值得临床推广及进一步研究。

从“热毒滞络”论述特发性肺纤维化急性加重期证治

特发性肺纤维化急性加重(AE-IPF)是特发性肺纤维化患者死亡的主要原因,尚无有效治疗措施,给个人及社会造成沉重的负担。本文从络病、伏邪致病、“阴火”理论认识该病:“热毒滞络”是AE-IPF病机;痰瘀伏络、渐成热毒、伏而后发,“阴火”上升、肺受火侮是导致“热毒滞络”并造成急性加重的机制。治疗上分别采用升降散加味以清透伏热、凉血解毒,人参平肺散加味以降气散火、补气升阳。

从升降散证治谈气机升降

气的运动是为气机，《黄帝内经》概括为“升降出入”4种形式。人体脏腑经络、气血津液、营卫阴阳、四肢百骸、五官九窍，无不依赖于气机之升降出入发挥作用。人体气机升降出入正常，则“五脏元真通畅，人即安和”；反之，气机升降出入失常，人体即会“百病丛生”。升降散是温病名方，用治“表里三焦大热”，即温热弥漫表里内外之证，宣郁清热。