肾炎四味片可减轻5/6肾切除大鼠的肾脏纤维化

目的观察肾炎四味片对5/6肾切除大鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法 24只Wistar大鼠分成4组:假手术组、模型组、干预组、空白对照组。肾切除术后3 d,各组予生理盐水2 mL灌胃,干预组、空白对照组加入肾炎四味片2.16 g/(kg.d)灌胃,术后第90天处死大鼠。Real-Time PCR和Westernblot分别测定各组大鼠肾脏组织中NF-κB、TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平。免疫组化检测各组NF-κB、TGF-β1、ColⅢ的表达。结果与假手术组比较,模型组的NF-κB、TGF-β1的mRNA和蛋白水平表达增强,差异具有统计学意义(P<0.05),干预组高于假手术组(P<0.05),低于模型组(P<0.05);免疫组化结果类似。结论肾炎四味片可能通过下调NF-κB、TGF-β1的mRNA和蛋白的表达发挥延缓肾脏纤维化的作用。

肾炎四味片对大鼠的长期毒性试验

目的:观察肾炎四味片长期给药对大鼠产生的毒性反应。方法:140只wistar大鼠随机分为4组,低、中剂量组各30只,分别给予肾炎四味片8．0和24．0 g生药·kg-1·d-1,高剂量组40只给予肾炎四味片72．0 g生药·kg-1·d-1,对照组40只给予相同体积的0．5％的羧甲基纤维素钠混悬液。各组连续灌胃给药26周,进行血液学、血液生化、脏器重量系数、组织病理学检查及常规观察。结果:给药组动物各项观察指标和各项检测指标与空白对照组比较均无显著差异(P>0．05)。高剂量组动物脏器组织形态学检查结果与空白对照组比较无明显异常。结论:肾炎四味片对大鼠连续ig 26周的无毒性剂量为72．0 g生药·kg-1·d-1。

肾炎四味片对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的观察并探讨肾炎四味片对实验性糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠早期肾脏病变的作用及可能的作用机制。方法健康雄性SD大鼠45只,随机抽取30只腹腔注射链脲佐菌素制备DM大鼠模型,成模后随机分为DM对照组(B组)15只、肾炎四味片干预组(C组)15只;正常对照组(A组)15只,分别于8周、12周末检测尿蛋白定量,肌酐清除率(Ccr),应用光镜和电镜对肾组织行病理形态学观察,免疫组织化学染色检测肾组织转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)、α平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,、αSMA)表达情况。结果 C组大鼠与同时期B组比较,24 h尿蛋白明显减少(P<0.01),肾组织TGF-β_1、α-SMA表达明显下降(P<0.01),肾组织病理形态学改变明显减轻。结论肾炎四味片能够抑制DM大鼠肾组织TGF-β_1、αSMA的表达,减少DM大鼠的尿蛋白,减轻及延缓肾小球硬化,发挥保护肾脏的作用。

肾炎四味片对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质NF-κB、MCP-1、ColⅢ表达的影响

目的:观察肾炎四味片对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质核转录因子-κB(NF-κB)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、胶原Ⅲ(ColⅢ)的表达,并探讨其对肾间质纤维化的作用机制。方法:将SD大鼠60只随机分为假手术组(A组)、肾炎四味片假手术组(B组)、模型组(C组)和肾炎四味片治疗组(D组),分别于术后第3、7、14天处死各组大鼠。用HE和MASSON染色法观察肾脏病理改变,用免疫组化方法检测核转录因子-κB(NF-κB)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、胶原Ⅲ(ColⅢ)的表达情况。结果:A组和B组各指标组内及组间比较无统计学意义(P>0.05)。病理变化,C组和D组间质纤维化程度进行性加重,显著重于同期A组,D组间质纤维化程度较C组明显减轻(P<0.05)。免疫组化,C组NF-κB、MCP-1和ColⅢ在肾间质表达明显增强,与A组相比差异有显著性(P<0.05);D组各因子的表达下调,与相应时间点C组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:肾炎四味片可降低NF-κB、MCP-1、ColⅢ的表达,从而延缓肾间质纤维化。

肾炎四味片对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的探讨肾炎四味片对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响及其作用机制。方法采用单侧输尿管结扎(UUO)肾间质纤维化模型,将SD大鼠60只随机分为4组,即假手术组、肾炎四味片假手术组、模型组和肾炎四味片治疗组,每组15只,分别于术后第3、7、14 d每组大鼠各取5只。用HE和Masson染色法观察肾脏病理改变,用免疫组化方法检测肾小管间质中转化生长因子β1(TGF-β1)和血小板凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)表达情况,对结果进行半定量分析。结果假手术组和肾炎四味片假手术组肾小管间质胶原纤维相对面积及TGF-β1、TSP-1的表达组内及组间比较无统计学意义(P>0.05)。模型组肾小管间质胶原纤维相对面积及TGF-β1、TSP-1的表达,随梗阻时间延长而增加(P<0.05),且与同期假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05);在术后各时间点,肾炎四味片治疗组肾小管间质胶原纤维相对面积及TGF-β1、TSP-1的表达较模型组显著减少(P<0.05),但仍高于假手术组(P<0.05)。结论肾炎四味片缓解UUO大鼠肾间质纤维化可能部分是通过降低肾脏TGF-β1和TSP-1的表达而实现的。

肾炎四味片及洛汀新对糖尿病大鼠肾脏足细胞数目的影响

目的探讨肾炎四味片和洛汀新对糖尿病大鼠肾脏足细胞数目的影响。方法建立STZ诱导的糖尿病大鼠模型,将35只大鼠随机分为正常对照组、糖悄病组、肾炎四味片干预组、洛汀新干预组及肾炎四味片与洛汀新联合干预组(联合干预组)各7只。应用WT-1标记足细胞核,观察8周末5组血糖、尿蛋白、血肌酐、肾质量/体质量;光镜及电镜观察肾组织形态学变化,免疫组化检测足细胞数目的变化。结果与正常对照组比较,糖尿病组大鼠血糖、尿蛋白、肌酐清除率、肾质量/体质量明显增加,足细胞数目明显减少(P<0.01);与糖尿病组相比,除血糖外,肾炎四味片干预组、洛汀新干预组及联合干预组上述指标明显改善(P<0.05),而3组间差异无统计学意义(P>0.05)。足细胞数目与尿蛋白呈负相关(r=-0.95,P=0.0036)。结论肾炎四味片及洛汀新具有改善糖尿病肾病发展过程中足细胞数目减少、减轻尿蛋白的作用。

RP-HPLC法测定肾炎四味片中黄芩苷、木犀草素和山柰素的含量

目的：建立测定肾炎四味片中黄芩苷、木犀草素和山柰素含量的方法。方法：采用Eclipse XDB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇（A）-0.2%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱（0～20 min,40%A→60%A;20～25 min,60%A;25～29 min,60%A→90%A;29～32 min,90%A→40%A）,流速1.0 m L·min-1,检测波长为279 nm（0～17 min）和267 nm（17～25 min）,柱温25℃。结果：黄芩苷、木犀草素和山柰素的线性范围分别为0.039～7.800μg（r=0.999 9）、0.032～6.454μg（r=0.999 9）和0.001～0.288μg（r=0.999 9）;平均加样回收率（n=6）分别为98.09%、99.10%和99.73%,RSD分别为1.9%、2.3%和2.7%。3批样品的测定结果分别为每片含黄芩苷13.482、13.520、14.524 mg,木犀草素9.120、7.246、8.615 mg,山奈素0.278、0.219、0.294 mg。结论 ：所建立的方法经方法学验证,可作为肾炎四味片的质量控制方法。