微波消解ICP-MS法测定藏药十五味赛尔斗丸中的无机元素

目的 建立藏药十五味赛尔斗丸无机元素含量的测定方法。方法 样品经微波消解后,以铑、铼为内标,用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）测定样品中Na、Mg、Al、K、Ca、V、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Se、Mo、Ag、Au、Hg、Pb等20种元素的含量。结果 该方法对各元素的检出限为0.0032~2.416ng·g-1,加标回收率在86.92%~104.9%之间。结论 所建立的方法快速、准确、灵敏度高,可以用于测定十五味赛尔斗丸中微量元素的含量,分析各金属元素的分布模式。

藏药十五味赛尔斗丸治疗豚鼠胆囊炎的作用机制研究

目的:运用网络药理学及分子对接技术探讨藏药十五味赛尔斗丸治疗胆囊炎的作用机制,并以胆囊炎豚鼠模型验证其核心靶点和通路。方法:通过检索PubMed、CNKI、万方、维普等文献数据库,结合中药系统药理学数据库与分析平台和中药分子机制的生物信息学分析工具搜集十五味赛尔斗丸各药的化学成分。通过Swiss Target Prediction数据库筛选活性成分相关靶点。在人类基因数据库、在线人类孟德尔遗传数据库中检索胆囊炎相关靶点。将有效成分相关靶点与胆囊炎靶点进行映射,绘制venny图,交集靶点即为十五味赛尔斗丸治疗胆囊炎的潜在靶点,运用Cytoscape3.8.2软件构建“药物-活性成分-潜在靶点-疾病”网络图并进行网络拓扑分析筛选关键成分。将潜在靶点输入STRING数据库得出蛋白质相互作用关系,导入Cytoscape3.8.2软件中获得PPI网络,通过网络拓扑分析获得核心靶点。将潜在靶点导入DAVID数据库进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。采用Schr9dinger Maestro软件中的Glide模块对关键成分及靶点进行分子对接。随机从60只雌雄各半清洁级豚鼠中选12只为正常组,其余48只豚鼠复制胆囊炎模型。将造模成功的48只豚鼠随机分为模型组、十五味赛尔斗丸水溶液组(0.35 g·kg^(-1))、十五味赛尔斗丸醇提组(0.12 g·kg^(-1))、消炎利胆片组(0.36 g·kg^(-1)),每组12只,各给药组给予相应剂量的药物进行灌胃,正常组和模型组给予等体积的生理盐水,每天1次,连续15 d。HE染色观察胆囊组织病理损伤;ELISA法测定血清和胆汁中TNF-α的含量;实时荧光定量PCR检测胆囊中NF-κB、TNF-α的mRNA表达水平;Western Blot检测胆囊组织中NF-κB蛋白表达水平。结果:共获得活性成分193个及相关靶点1 069个,胆囊炎相关靶点702个,潜在靶点141个。“药物-活性成分-潜在靶点-疾病”网络拓扑分析筛选出N-methylcorydaldine、氧化血根碱、金圣草(黄)素和7-羟基香豆素4个关键成分。PPI网络拓扑分析筛选出核心靶点30个。GO富集分析共得到661个条目,其中包含生物过程491个、细胞组分62个及分子功能108个。KEGG通路富集分析共得到113条通路。核心活性成分与关键靶点具有较高的匹配度和较好的结合活性。动物实验表明,与正常组相比,模型组血清TNF-α、TNF-α mRNA、NF-κB mRNA及NF-κB蛋白水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,十五味赛尔斗丸醇提组血清TNF-α、TNF-α mRNA水平显著下降(P<0.01);各给药组NF-κB mRNA表达水平显著降低(P<0.01)。经过药物治疗后,胆囊组织损伤得到明显改善。结论:十五味赛尔斗丸可通过多成分、多靶点、多通路治疗胆囊炎,动物实验证实十五味赛尔斗丸通过抑制NF-kB通路抑制TNF-α的产生而发挥治疗胆囊炎的作用。