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Characteristics of short double stranded RNA against hepatitis C virus: a literature-based analysis
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作者 WU Wenbin 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2013年第3期139-151,共13页
Objective: To describe the characteristics of short interfering double stranded RNA (dsRNA) against hepatitis C virus (HCV) and to find out the determining factors in design for desirable inhibitory efficacy. Methods:... Objective: To describe the characteristics of short interfering double stranded RNA (dsRNA) against hepatitis C virus (HCV) and to find out the determining factors in design for desirable inhibitory efficacy. Methods: The data were collected and analyzed by retrieval of 229 published short dsRNAs designed for degradation of HCV RNA. Results: Statistical analyses showed that the most frequently involved short dsRNAs were directing against 5′NTR/core and genotype 1b, accounting for 64.2% and 69.9%, respectively. Inhibitory efficacy varied with the structural characteristics of short dsRNAs, of which the most potential were those directed against HCV core region with inhibitory efficacy of 70.2%. Moreover, the mean inhibitory efficacy of short dsRNAs with GC contents from 30% to 52% was higher than that of those with GC contents out of this range. Conclusion: Based on this pooled data in a relatively large sample, the present results provided clues to design for short dsRNAs with more potent inhibitory efficacy. 展开更多
关键词 双链rna 丙型肝炎病毒 文献 特性 抑制效果 GC含量 DSrna 统计分析
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Effects of PI3-k/Akt short hairpin RNA on proliferation, fibronectin production and synthesis of thrombospondin-1 and transforming growth factor-beta(1 ) in glomerular mesangial cells induced by sublytic C5b-9 complexes 被引量:5
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作者 Gao, L. Zhang, Y. Qiu, W. Xu, W. Feng, X. Ren, J. Jiang, X. Wang, H. Zhao, D. Wang, Y. 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期344-344,共1页
关键词 连接蛋白 凝血栓蛋白 临床分析 治疗方法 白血病
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Antitumor effect of RNA interference on non-small- cell lung cancer in vivo
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作者 Min Zhang Chunxue Bai +2 位作者 Xin Zhang Ling Mao Yuehong Wang 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2009年第8期463-466,共4页
客观的肺癌症在世界上作为癌症死亡的一个领先的原因出现了。当前的治疗是无效的,这样新的途径被需要改进治疗学的比率。RNA 干扰(RNAi ) 在 vitro,在为 non-small-cell 的治疗开发新方法,肺癌症(NSCLC ) 需要进一步在 vivo 被测试... 客观的肺癌症在世界上作为癌症死亡的一个领先的原因出现了。当前的治疗是无效的,这样新的途径被需要改进治疗学的比率。RNA 干扰(RNAi ) 在 vitro,在为 non-small-cell 的治疗开发新方法,肺癌症(NSCLC ) 需要进一步在 vivo 被测试其潜力在基因 silencing 显示出诺言。在这研究,化学上综合了指向表皮的生长因素受体(EGFR ) 的双 stranded RNA (dsRNA ) 是进 NSCLC 房间线 SPC-A1 房间的 transfected 并且证实肿瘤麻烦了裸体老鼠建模调查 dsRNA 是否能在 vivo 在 NSCLC 房间导致基因 silencing 的 athymic。方法 SPC-A1 是 transfected, EGFR 顺序特定的 dsRNA 与 Lipofectamine 2000 提出了。SPC-A1 房间(在 200 &#956;L 的 10 <SUP>7</SUP>/mL) 是的 1 ×进老鼠的左胁腹区域的注射 s.c 麻烦了裸体老鼠建模的 athymic 建立肿瘤。由测量直径和肿瘤的重量计算肿瘤生长抑制率。Immunohistochemistry 和西方的污点被用来在 EGFR 蛋白质的生产监视减小。实时 RT-PCR 被用来检测 EGFR mRNA 水平的 silencing。EGFR 显著地定序特定的 dsRNA (dsRNA-EGFR ) ,这显示了的结果在 vivo 禁止了肿瘤生长。肿瘤生长抑制率是 75.03% 。dsRNA-EGFR 明确地与 EGFR 蛋白质生产的 53.6% 下面规定和 EGFR mRNA 的 32.3% silencing 定序 silenced EGFR 水平。结论 DsRNA-EGFR 显示出轰动效果在在 EGFR mRNA 的规定下面在 vivo 的肿瘤生长的水平和蛋白质生产,和抑制。 展开更多
关键词 rna干扰 抗肿瘤作用 体内 肺癌 细胞
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siRNA逆转乳腺癌细胞系MCF-7/ADR耐药 被引量:6
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作者 李臣宾 张峰 +3 位作者 史玉荣 魏熙胤 杨毅 牛瑞芳 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1605-1610,共6页
背景与目的:肿瘤的多药耐药性常导致乳腺癌化疗失败,多药耐药基因1(multidrugresistance1,mdr1)编码的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)过度表达是重要的耐药机制。本研究拟探讨siRNA抑制耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADRmdr1基因表达的可行性... 背景与目的:肿瘤的多药耐药性常导致乳腺癌化疗失败,多药耐药基因1(multidrugresistance1,mdr1)编码的P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)过度表达是重要的耐药机制。本研究拟探讨siRNA抑制耐药乳腺癌细胞系MCF-7/ADRmdr1基因表达的可行性。方法:选择耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADR及其敏感细胞系MCF-7作为研究对象。将预先设计的siRNA包装入质粒载体,然后转化质粒到大肠杆菌中,经过克隆、扩增、纯化后转染到MCF-7/ADR细胞中,潮霉素筛选,流式细胞仪检测P-gp的表达率,实时定量PCR检测mdr1基因的表达率,并对转染后的细胞作阿霉素耐药实验。结果:流式细胞仪检测结果显示,MCF-7/ADR细胞经特异性siRNA作用后,P-gp的表达率由99.8%下降到12.3%。实时相对定量PCR检测结果显示,MCF-7/ADR细胞经特异性siRNA作用后其Ct值由25.22增加到30.64。阿霉素耐药实验显示,转染siRNA的MCF-7/ADR细胞IC50为0.51μmol/L,而未转染组的IC50为17.88μmol/L。结论:siRNA能引发人乳腺癌多耐药细胞系MCF-7/ADR内mdr1基因沉默,从而为siRNA作为一种可能的治疗手段提供了理论依据。 展开更多
关键词 小干扰rna 短发卡rna 多药耐药基因 基因沉默
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RNA干扰技术在抗乙型肝炎病毒感染应用中的研究进展 被引量:5
5
作者 孔令波 佟立新 王锡育 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第13期1324-1328,共5页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术能够特异性地降低目的基因的表达,是目前最有效的基因沉默技术,体内外研究均证实了RNAi在抗乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)感染中的作用.近年来,为使RNAi更适应抗HBV感染临床应用的需要,许多学... RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术能够特异性地降低目的基因的表达,是目前最有效的基因沉默技术,体内外研究均证实了RNAi在抗乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)感染中的作用.近年来,为使RNAi更适应抗HBV感染临床应用的需要,许多学者针对小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)靶序列、转导方法、短发夹状RNA(shorthairpin RNA,shRNA)载体、各种联合策略的选择及化学修饰的应用等方面进行了大量研究.本文综述RNAi技术,尤其是HBV特异shRNA在抗HBV感染中应用的研究进展. 展开更多
关键词 rna干扰 乙型肝炎病毒 小分子干扰rna 短发夹状rna
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日本血吸虫小热休克蛋白Sjp40的RNA干扰效应 被引量:3
6
作者 陈敏芳 麦荣嘉 +1 位作者 莫倩珍 周晓红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期456-461,共6页
目的研究日本血吸虫小热休克蛋白(sHSP)Sjp40基因的RNA干扰效应及其干扰后日本血吸虫HSP60、HSP70、HSP90基因在mRNA水平出现的协同效应,观察各期虫体Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA表达水平。方法以双链RNA(dsRNA)实现RNA... 目的研究日本血吸虫小热休克蛋白(sHSP)Sjp40基因的RNA干扰效应及其干扰后日本血吸虫HSP60、HSP70、HSP90基因在mRNA水平出现的协同效应,观察各期虫体Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA表达水平。方法以双链RNA(dsRNA)实现RNA干扰。体外转录合成dsRNA,将Sjp40的dsRNA(dsSjp40)及阴性对照GFP的dsRNA(dsGFP)通过浸泡法转染到日本血吸虫成虫中,体外培养7 d后用TRIZOL法提取其总RNA及总蛋白,实时荧光定量PCR(qPCR)检测Sjp40基因及SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达,Western blot检测Sjp40蛋白表达产物。提取各期虫体总RNA,qPCR检测Sjp40、SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达。结果转染后Sjp40 dsRNA转染组目的基因的转录水平较阴性对照GFP dsRNA转染组下降了80%左右;蛋白质水平较空白对照及阴性对照组(dsGFP)出现明显降低,qPCR结果显示在Sjp40基因RNA干扰后SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因的mRNA表达水平未发现明显变化。此四种HSPs在日本血吸虫生活史不同时期mRNA表达存在明显差异,Sjp40基因在虫卵期mRAN水平表达相对其他HSPs基因高。结论 dsSjp40 RNAi可特异性抑制Sjp40的表达,但对SjHSP60、SjHSP70、SjHSP90基因mRNA的表达没有明显的影响。 展开更多
关键词 日本血吸虫 小热休克蛋白 rna干扰 DSrna
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RNAi及其在功能基因组研究中的应用 被引量:3
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作者 向彦 贺浩华 傅军如 《中国农学通报》 CSCD 2003年第4期103-105,112,共4页
RNAi是双链RNA介导的、序列特异性的转录后基因沉默 ,自 1998年发现至今已有很大进展。随着后基因组时代的到来 ,将是今后功能基因组研究中的有力工具 ,并可能用于基因特异治疗。
关键词 rnaI 功能基因组 应用 双链rna介导 序列特异性 基因沉默
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双链RNA在基因沉默中的作用 被引量:2
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作者 汤富酬 李成建 薛友纺 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期659-663,共5页
介绍依赖于同源识别的基因沉默 .依赖于同源识别的基因沉默 ,是指向生物体内导入外源核酸时引起相应序列的内源基因的表达被特异性抑制的一种基因调控现象 .基因沉默分为转录基因沉默和转录后基因沉默 ,二者都通过双链RNA介导 .它们是... 介绍依赖于同源识别的基因沉默 .依赖于同源识别的基因沉默 ,是指向生物体内导入外源核酸时引起相应序列的内源基因的表达被特异性抑制的一种基因调控现象 .基因沉默分为转录基因沉默和转录后基因沉默 ,二者都通过双链RNA介导 .它们是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制 .这些机制具有巨大的应用前景 . 展开更多
关键词 小干涉rna 甲基化 双链rna 基因沉默 作用
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RNA干扰的研究进展 被引量:2
9
作者 袁克华 冯仁军 +1 位作者 程萍 张银东 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第8期3471-3473,共3页
RNA干扰(RNAi)是一种由双链RNA诱发的转录后水平的基因沉默现象,是近几年发展起来的基因表达调节新机制,广泛地存在于真菌、植物和动物中。主要介绍了RNAi的发现、分子机制、转基因载体构建策略以及RNA i在生命科学中广阔的应用前景。
关键词 rna干扰 双链rna 转录后水平的基因沉默 小干扰rna
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RNAi对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白表达的沉默作用观察 被引量:1
10
作者 秦军 梁海滨 +4 位作者 吴美华 马利林 柯靖 黄宝玉 樊勇 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第42期22-23,共2页
目的观察RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白(Paxillin)表达的沉默作用。方法构建针对Paxillin基因序列的短发卡RNA(shRNA)表达载体,并转染至结肠癌HCT-8细胞,72 h后分别用实时定量PCR和Western blot法测定转染细胞中Paxillin mRNA... 目的观察RNA干扰(RNAi)对结肠癌HCT-8细胞桩蛋白(Paxillin)表达的沉默作用。方法构建针对Paxillin基因序列的短发卡RNA(shRNA)表达载体,并转染至结肠癌HCT-8细胞,72 h后分别用实时定量PCR和Western blot法测定转染细胞中Paxillin mRNA及蛋白。结果根据针对Paxillin基因设计了小干扰RNA(siRNA)序列,构建了shRNA表达载体,并成功转染至HCT-8细胞。以空白对照组作均一化,转染Paxillin-shRNA_1、Paxillin-shRNA_2、Paxillin-shRNA_3、Paxillin-shRNA_NC的细胞及空白对照组细胞Paxillin mRNA相对表达量分别为0.66±0.28、0.31±0.11、1.00±0.22、1.05±0.32、1.00±0.29,Paxillin蛋白相对表达量分别为0.62±0.11、0.39±0.13、0.74±0.21、0.94±0.09、1.00±0.16。结论 RNAi可沉默结肠癌HCT-8细胞Paxillin的表达。 展开更多
关键词 rna干扰 短发卡rna 小干扰rna 结肠癌细胞 桩蛋白
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短干扰RNA特异性抑制哺乳动物β淀粉样前体蛋白裂解酶基因表达 被引量:1
11
作者 胡海涛 董炜疆 +4 位作者 冯改丰 刘朝晖 刘苏虎 杨广笑 王全颖 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第6期622-629,共8页
目的:探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(-βsite APP cleav ing enzym e,BACE)的短干扰RNA(short interfering RNA s,siRNA)是否能抑制BACE在哺乳动物细胞中的表达,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段。方法:采用PCR分别扩增增强型绿色荧... 目的:探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(-βsite APP cleav ing enzym e,BACE)的短干扰RNA(short interfering RNA s,siRNA)是否能抑制BACE在哺乳动物细胞中的表达,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段。方法:采用PCR分别扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、U 6启动子和靶向BACE的特异性小干扰RNA(siBACE),随后将相应的序列片段克隆入真核表达载体pLXSN,通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE进行鉴定;制备稳定高表达BACE基因的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,用荧光显微镜和免疫组织化学的方法观察siRNA对BACE表达的影响。结果:成功构建了靶向BACE的短干扰RNA的逆转录病毒载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE,并能特异性地抑制BACE在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株中的表达。结论:成功构建了针对BACE的短干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U 6-siBACE,并能有效抑制哺乳动物BACE基因的表达,为利用RNA干扰技术作为治疗AD的新方法提供了重要的实验基础。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病/治疗 rna 小分子干扰 淀粉样Β蛋白前体 基因 短干扰rna Β分泌酶
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靶向X基因shRNA特异抑制HBV基因表达和复制 被引量:5
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作者 孟忠吉 柯昌征 +3 位作者 汤守兵 陈悦 陆蒙吉 杨东亮 《郧阳医学院学报》 CAS 2008年第6期481-485,共5页
目的:研究针对HBV X基因小发夹RNA(shRNA)对HBV基因表达和复制的抑制作用。方法:利用分子克隆方法构建了4个HBV X基因特异性shRNA的表达质粒pshHBx1-4,与HBV复制性质粒共转染HepG2细胞,Northern和Southern印迹法检测HBV的mRNA和病毒复... 目的:研究针对HBV X基因小发夹RNA(shRNA)对HBV基因表达和复制的抑制作用。方法:利用分子克隆方法构建了4个HBV X基因特异性shRNA的表达质粒pshHBx1-4,与HBV复制性质粒共转染HepG2细胞,Northern和Southern印迹法检测HBV的mRNA和病毒复制中间体,化学发光微粒免疫分析方法检测细胞培养上清中的HBsAg和HBeAg,免疫荧光染色分析细胞HBcAg的表达水平。结果:共转染pshHBx1-4显著抑制HBV mRNA表达、降低细胞培养上清中HBsAg和HBeAg的水平和细胞内HBcAg的表达水平、并有效抑制HBV的病毒复制中间体的合成。结论:HBV X基因特异性的shRNA可以有效抑制HBV的基因表达和病毒复制,有可能发展成为新的抗HBV制剂。 展开更多
关键词 rna干扰 小干扰性rna 发夹状rna 乙型肝炎病毒 基因治疗
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HLCDG1基因siRNA表达质粒的构建及其对A549细胞周期和增殖的影响 被引量:1
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作者 邹飞雁 李峰 +4 位作者 陈主初 贺智敏 吕辉 刘孝荣 欧阳咏梅 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1256-1262,共7页
目的:本研究旨在应用RNA干扰技术,诱导转基因肺癌细胞HLCDG1基因沉默并观察其对肺癌细胞周期和增殖的影响。方法:构建HLCDG1基因短小干扰双链RNA表达载体,筛选HLCDG1基因表达沉默的肺癌细胞株并应用MTT和流式细胞仪分析这一肺癌细胞株... 目的:本研究旨在应用RNA干扰技术,诱导转基因肺癌细胞HLCDG1基因沉默并观察其对肺癌细胞周期和增殖的影响。方法:构建HLCDG1基因短小干扰双链RNA表达载体,筛选HLCDG1基因表达沉默的肺癌细胞株并应用MTT和流式细胞仪分析这一肺癌细胞株增殖和细胞周期分布状况。结果:根据siRNA表达载体的设计原则,构建了能在哺乳动物细胞稳定表达的siRNA载体5个(4个位点匹配实验组和1个位点错配对照组),依次命名为pHL-si-1、pHL-si-2、pHL-si-3、pHL-si-4和pHL-si-c。上述载体分别与表达HLCDG1的重组体pcDNA3.1(+)/HLCDG1共转染A549细胞,筛选到一株共转染pHL-si-1载体和pcDNA3.1(+)/HLCDG1重组体的A549细胞,它几无HLCDG1基因表达,这株细胞暂命名为A549-HLCDG1-si-1。MTT和流式细胞仪分析表明,A549-HLCDG1-si-1细胞增殖能力明显提高,进入S期和G2+M期增多,滞留G1期减少。结论:采用RNAi技术特异阻断HLCDG1基因表达,验证了HLCDG1基因对A549肺癌细胞有生长抑制作用。 展开更多
关键词 基因 HLCDG1 短小干扰双链rna A549细胞 细胞周期
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siRNA及其在哺乳动物中的应用 被引量:3
14
作者 孙岩 马用信 《四川动物》 CSCD 2003年第4期281-285,共5页
RNA干扰现象已经在多种生物中发现 ,但是在多数哺乳动物中尚未发现自然存在RNA干扰的证据。因此最初RNA干扰技术在哺乳动物细胞中的应用受到很大的限制。直到对RNA干扰作用机制有了较深入的了解以后 ,主要是小干扰RNA的发现使RNA干扰技... RNA干扰现象已经在多种生物中发现 ,但是在多数哺乳动物中尚未发现自然存在RNA干扰的证据。因此最初RNA干扰技术在哺乳动物细胞中的应用受到很大的限制。直到对RNA干扰作用机制有了较深入的了解以后 ,主要是小干扰RNA的发现使RNA干扰技术在哺乳动物中的应用得以推广。本文介绍了RNA干扰 ,重点描述了小干扰RNA的发现、特点。 展开更多
关键词 SIrna 哺乳动物 小干扰rna rna干扰
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抑制HIF-1α表达的siRNA序列长效shRNA抑制载体的构建 被引量:1
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作者 郭欢 孙蕾 +6 位作者 汲翔 康巧珍 程道博 张聚真 赵立群 杨观瑞 汲振余 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2011年第2期173-176,共4页
目的:设计特异抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白诱导表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建能长效抑制HIF-1α基因表达的HIF-1α的短发夹siRNA(shRNA)表达载体。方法:依据NCBI数据库获得HIF-1αmR-NA序列,利用Whitehouse、SiDirect和Rati... 目的:设计特异抑制缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白诱导表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并构建能长效抑制HIF-1α基因表达的HIF-1α的短发夹siRNA(shRNA)表达载体。方法:依据NCBI数据库获得HIF-1αmR-NA序列,利用Whitehouse、SiDirect和Rationalsi RNA Design软件及Blast设计和优化siRNA序列;将siRNA序列转换成编码shRNA的DNA序列后克隆入pENTRTM/H1/TO载体,测序鉴定;将重组质粒pENTRTM/H1/TOHIF-1α转染食管上皮细胞Het-1A(实验组),并设阴性对照(转染阴性对照序列)、空白对照组和诱导对照组。实验、阴性对照和诱导对照组细胞经CoCl2化学诱导。Western blot法检测4组HIF-1α蛋白的表达。结果:以优化改造的含29核苷酸的干扰序列构建shRNA表达载体,经测序鉴定无误。4组细胞HIF-1α蛋白表达比较,差异有统计学意义(F=66.863,P<0.001)。实验组Het-1A细胞HIF-1α蛋白表达较诱导对照和阴性对照组明显下降。结论:成功构建了HIF-1αshRNA表达载体。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1Α 小干扰rna 短发夹rna Het-1A细胞
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RNA干扰技术的研究进展 被引量:2
16
作者 张泰 蔡英 翟博智 《现代诊断与治疗》 CAS 2015年第6期1254-1256,共3页
RNA干扰(RNAi)指由ds RNA或si RNA诱发的转录后基因沉默现象,其机制是通过与靶序列特定位点互补配对,通过阻碍靶基因的翻译或者诱导m RNA降解来抑制基因表达,是一项高效率、强特异性的基因沉默技术。RNAi技术不仅在基础研究方面成为基... RNA干扰(RNAi)指由ds RNA或si RNA诱发的转录后基因沉默现象,其机制是通过与靶序列特定位点互补配对,通过阻碍靶基因的翻译或者诱导m RNA降解来抑制基因表达,是一项高效率、强特异性的基因沉默技术。RNAi技术不仅在基础研究方面成为基因功能和蛋白功能研究的工具,也广泛的应用于临床研究,在肿瘤、病毒性疾病以及其他疾病的治疗方面显示了广阔的前景。 展开更多
关键词 rna干扰(rnaI) 双链rna(dsrna) 小干扰rna(sirna) 基因沉默
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RNAi在植物中的作用机理及其应用研究进展 被引量:9
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作者 王永佳 陈永胜 李国瑞 《内蒙古民族大学学报(自然科学版)》 2010年第1期54-58,共5页
本文综述了近年来有关RNA干扰的发现、作用过程及其作用机理,并介绍了RNA干扰在植物基因功能、植物抗病毒、作物品种改良等方面的应用.
关键词 rnaI 基因沉默 SIrna DSrna
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RNA干扰技术抑制乳腺癌表皮生长因子受体的表达 被引量:1
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作者 吴伟东 方驰华 +1 位作者 杨正心 包佳巾 《国际医药卫生导报》 2010年第16期1934-1938,共5页
目的 探讨采用化学合成小干扰RNA(siRNA)介导的RNA干扰(RNAi)技术是否能有效抑制乳腺癌细胞株MDA-MB231、MDA-MB-453S、ZR-75-30、ZR-75细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达,以及抑制EGFR基因表达后乳腺癌细胞生物学特性的改变,以期... 目的 探讨采用化学合成小干扰RNA(siRNA)介导的RNA干扰(RNAi)技术是否能有效抑制乳腺癌细胞株MDA-MB231、MDA-MB-453S、ZR-75-30、ZR-75细胞表皮生长因子受体(EGFR)表达,以及抑制EGFR基因表达后乳腺癌细胞生物学特性的改变,以期为肿瘤治疗提供新的思路和实验依据.方法 (1)建立检测EGFR数量的方法,测定MDA-MB231、MDA-MB-453S、ZR-75-30、ZR-75细胞株EGFR的表达.(2)观察dsRNA-EGFR/Lipofectamine 2000对EGFR表达的抑制作用.(3)采用流式细胞仪测定细胞周期,采用ELISA法观察抑制EGFR表达后,MDA-MB231,MDA-MB-453S、ZR-75-30、ZR-75细胞生物学特性的改变.结果 MDA-MB231、MDA-MB-453S、ZR-75-30、ZR-75细胞株存在EGFR高表达.转染dsRNA-EGFR后可将MDA-MB231、MDA-MB-453S细胞对5-Fu的敏感性提高约4倍.细胞周期分析结果表明dsRNA-EGFR组G0-G1期细胞百分数较对照组增加了17.48%,进入S期的细胞百分数较对照组减少了19.20%.转染dsRNA-EGFR后可将ZR-75-30、ZR-75细胞对5-Fu的敏感性提高约7倍.结论 (1)乳腺癌细胞株存在EGFR高表达.(2)dsRNA-EGFR可序列特异性下调乳腺癌细胞EGFR基因水平,显著降低EGFR蛋白表达.(3)dsRNA-EGFR通过抑制EGFR表达可显著抑制细胞增生和细胞迁移,降低配体EGF的含量,将更多的细胞阻滞在G0-G1期,增加细胞对5-Fu的敏感性,有效逆转乳腺癌细胞的恶性表型,从而为乳腺癌基因治疗提供了新策略. 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 rna干扰 小干扰rna 双链rna 乳腺癌
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RNA干扰技术在动物繁殖中的应用
19
作者 陈娟 杨永梅 +3 位作者 陈洋 姜怀志 杨雨江 巩俊明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第3期128-131,共4页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由双链RNA诱发的转录后水平的基因沉默现象,是近几年发展起来的基因表达调节新机制,广泛地存在于真菌、植物和动物中。到目前为止,已有很多试验证明,RNAi作为一种基因功能研究的新手段,在动物繁殖... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由双链RNA诱发的转录后水平的基因沉默现象,是近几年发展起来的基因表达调节新机制,广泛地存在于真菌、植物和动物中。到目前为止,已有很多试验证明,RNAi作为一种基因功能研究的新手段,在动物繁殖研究中发挥了极其高效的作用。作者主要介绍了RNAi的研究历史、分子机制、作用特点、生物学意义及在动物繁殖中的应用。 展开更多
关键词 rna干扰 双链rna 小干扰rna 动物繁殖
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靶向HBV C基因的siRNA在HepG2.2.15细胞中对HBV的抑制作用
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作者 肖安 刘斌 +4 位作者 焦晔 赵欣 刘明秋 严维耀 郑兆鑫 《西南国防医药》 CAS 2012年第12期1277-1280,共4页
目的研究靶向HBV C基因的短发夹状RNA(shRNA)表达质粒对HepG2.2.15细胞中HBV的抑制作用。方法设计构建两个靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1和S2,以及用于对照的非同源shRNA表达质粒S3。转染HepG2.2.15细胞后,通过RT-PCR和ELISA方法分别... 目的研究靶向HBV C基因的短发夹状RNA(shRNA)表达质粒对HepG2.2.15细胞中HBV的抑制作用。方法设计构建两个靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1和S2,以及用于对照的非同源shRNA表达质粒S3。转染HepG2.2.15细胞后,通过RT-PCR和ELISA方法分别检测细胞中HBV C基因表达和细胞上清中HBV DNA、HBsAg和HBeAg表达。结果在转染后24 h时,HBV C基因mRNA表达量下降58%~83%,HBV DNA下降了2.44~3.36个log值,HBsAg和HBeAg的表达水平分别降低了51%~79%和50%~77%。S1、S2联合运用可以提高对HBV的抑制作用,而S3无抑制效果。结论靶向HBV C基因的shRNA表达质粒S1、S2及其联合运用,均能有效地抑制HepG2.2.15细胞中HBV的复制和表达。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 rna干扰 小干扰rna 短发夹状rna
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