JSI-124特异性阻断STAT3通路对宫颈癌SiHa细胞增殖、凋亡相关研究

目的:观察JSI-124特异性阻断STAT3通路对宫颈癌Si Ha细胞增殖抑制以及胞质转录因子STAT3蛋白表达的影响。方法:MTT法检测不同浓度JSI-124不同干预时间对Si Ha细胞增殖的影响;流式细胞术检测不同浓度JSI-124对Si Ha细胞干预24小时凋亡的情况;Western blot法检测细胞中STAT3蛋白及其磷酸化蛋白表达的变化。采用SPSS11.5统计学分析软件对数据进行单因素方差分析及t检验。结果:JSI-124可以抑制宫颈癌Si Ha细胞的增殖,干预效果随药物作用时间及药物浓度增加而增强;JSI-124可诱导宫颈癌Si Ha细胞的凋亡,并具有较强的浓度依赖关系;经JSI-124干预后的宫颈癌Si Ha细胞,STAT3蛋白的表达无明显变化,而磷酸化激活状态的STAT3蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:选择性JAK/STAT3抑制剂JSI-124可明显抑制宫颈癌Si Ha细胞的增殖并诱导其细胞凋亡。其可能成为宫颈癌防治的一条新的有效途径。

高良姜总黄酮对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨高良姜总黄酮对宫颈癌Si Ha细胞的增殖、形态学变化和细胞凋亡的影响及其抗肿瘤作用机理,为高良姜总黄酮作为抗肿瘤药物开发提供理论和实验依据。方法 （1）用倒置显微镜观察不同浓度高良姜总黄酮在不同时间内作用于宫颈癌Si Ha细胞后的形态学变化;（2）采用MTT比色法,检测不同浓度高良姜总黄酮在不同时间内对宫颈癌Si Ha细胞存活率所产生的影响,设抗癌药顺氯氨铂（cis-dichlorodiamine-platinum,DDP）为阳性对照;（3）采用流式细胞仪检测高良姜总黄酮对宫颈癌SiHa细胞24 h作用而引起的细胞凋亡率,设DDP为阳性对照。结果 （1）在25~400μg/m L浓度范围内,随着高良姜总黄酮干预宫颈癌Si Ha细胞的剂量增加,细胞存活率显著下降,其细胞存活率变化趋势与阳性对照DDP基本一致,并呈剂量和时间依赖性;（2）50μg/m L和100μg/m L高良姜总黄酮剂量引起宫颈癌Si Ha细胞凋亡,其早期凋亡率升高（17.35%和22.4%）,但远低于阳性对照DDP引起的早期凋亡率（60.3%）。结论高良姜总黄酮能显著抑制宫颈癌Si Ha细胞的增殖并诱导细胞凋亡。

变异型分化抗原簇44(17)对宫颈癌HeLa细胞、SiHa细胞系增殖的影响

目的探讨变异型分化抗原簇44(17)(CD44v17)对人宫颈癌HeLa细胞、SiHa细胞系增殖的影响。方法用lipofectamine 2000将CD44v17siRNA、pc DNA3.1-CD44v17质粒及其阴性对照组转染HeLa细胞、SiHa细胞,通过CCK-8、划痕实验、流式细胞术、免疫印迹法(Western blotting)、细胞周期测定方法等观察CD44v17对人宫颈癌细胞系HeLa细胞及SiHa细胞的增殖、凋亡、迁移等能力的影响。结果 CCK-8法证实CD44v17促进宫颈癌细胞的生长;划痕实验显示CD44v17可增强宫颈癌细胞的迁移能力;流式细胞术及Western blotting检测凋亡相关蛋白验证了CD44v17具有抑制宫颈癌细胞凋亡的作用;细胞周期测定显示干扰CD44v17 RNA后,S期细胞比例降低,G1期细胞增高,细胞阻滞于G1期并诱导细胞凋亡。结论 CD44v17能抑制宫颈癌细胞凋亡,促进宫颈癌细胞的生长,增强宫颈癌细胞的增殖迁移能力,它有可能成为宫颈癌治疗的新靶点。

3-甲氧基异甘草素的合成及其对宫颈癌细胞的影响

目的以异甘草素（ILG）为先导化合物进行化学合成其衍生物3-甲氧基异甘草素（3-MO-ILG）,探讨其体外抗宫颈癌活性。方法采用硼酸催化高温法、羟基保护法、微波辅助碱催化法3种方法进行羟醛缩合反应而制备目标化合物;以人宫颈癌Si Ha细胞为体外模型,用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法测定对癌细胞增长的抑制率;用流式细胞仪测定促进癌细胞凋亡作用,以顺铂作为阳性对照组。结果用硼酸催化高温法、羟基保护法、微波辅助碱催化法3种方法所得到的3-甲氧基异甘草素产率分别为8.9%、9.27%和57.60%。3-甲氧基异甘草素对Si Ha细胞具有较强抑制增殖作用,当药物浓度为20～150μg/mL、作用时间为24 h时,其抑制率可达93.5%;当作用时间达到72 h时,抑制率最强。3-甲氧基异甘草素在100μg/mL时,对Si Ha细胞早期凋亡率为38.6%,晚期凋亡率为1.4%,具有明显的促细胞凋亡作用。结论微波辅助碱催化方法在查尔酮类化合物的合成中具有产率较高的方法。3-甲氧基异甘草素对Si Ha细胞具有较强抑制增殖作用,并且具有明显浓度和时间依赖性;同时对Si Ha细胞具有明显的促细胞凋亡作用。

5-甲基水杨醛缩对氨基水杨酸希夫碱铜配合物合成表征与体外抗肿瘤活性研究

目的合成5-甲基水杨醛缩对氨基水杨酸希夫碱铜配合物药物并研究其体外抗肿瘤作用。方法采用常规加热回流法合成目标化合物,利用紫外吸收、元素分析和红外光谱等方法对其进行表征研究。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察药物对人宫颈癌细胞Si Ha和He La增殖的抑制作用,并采用吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)双染色荧光显微镜观察药物对Si Ha细胞形态的变化。结果目标化合物的组成为[C30H24N2O8Na2Cu]·2H2O;对Si Ha和He La细胞都有不同程度的抑制作用,呈现良好的剂量-效应关系,对Si Ha的活性优于He La;并且可使肿瘤细胞的形态发生显著变化,引起细胞株的凋亡或坏死。结论 5-甲基水杨醛缩对氨基水杨酸希夫碱铜配合物能抑制人宫颈癌细胞Si Ha和He La的增殖,在体外有良好的抗肿瘤活性。

中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖的影响

目的:探讨中药清毒栓对宫颈癌Si Ha细胞增殖的影响及其诱导凋亡作用的可能机制。方法:设立空白对照组,清毒栓高、中、低剂量组(0.16、0.04、0.01 g/ml)及保妇康栓组(0.017 5 g/ml),分别以不同药液作用于宫颈癌Si Ha细胞24 h、48 h、72 h,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测细胞增殖情况,采用线粒体膜电位法检测细胞凋亡情况。结果:不同剂量的清毒栓作用24 h、48 h、72 h时对宫颈癌Si Ha细胞的增殖均具有一定的抑制作用,其中以清毒栓高剂量组在48 h时作用最为明显。不同剂量的清毒栓均可引起宫颈癌Si Ha细胞线粒体膜电位的改变,进而引起不同程度的细胞凋亡;经统计学分析显示,清毒栓各剂量组、保妇康栓组的凋亡率与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),清毒栓低、中剂量组与清毒栓高剂量组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论:高剂量的中药清毒栓在48 h时对宫颈癌Si Ha细胞增殖的抑制作用最为明显,其作用机制可能是通过使线粒体膜电位降低来促进肿瘤细胞的凋亡。

细胞培养法评价含硅羟基磷酸钙涂层镁合金的生物相容性

目的采用细胞培养法在体外评估镁合金表面不同硅含量的羟基磷酸钙涂层对成骨细胞的毒性反应。方法采用经鉴定的SD大鼠成骨细胞接种于三种含有不同浓度硅含量的羟基磷酸钙涂层的镁合金及对照组裸镁合金,MTT法检测细胞活力并检测成骨细胞的碱性磷酸酶表达;扫描电镜观察细胞生长情况。结果细胞活力检测和碱性磷酸酶活性分析均表明,硅含量在5%及10%的羟基磷酸钙涂层利于成骨细胞在镁合金表面的生长;扫描电镜下可见,成骨细胞在5%及10%硅含量的涂层上呈聚集性生长且分布均匀,而在裸镁合金上生长缓慢且稀疏分布。结论镁合金表面硅含量为5%及10%的羟基磷酸钙涂层都利于成骨细胞的体外黏附和生长。