四季三黄丸中11种成分含量测定及化学计量学分析

目的 建立同时测定四季三黄丸中11种化学成分含量的超高效液相色谱法,并评价制剂质量。方法 色谱柱为Waters HSS T3柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%三氟乙酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为30℃,进样量为1μL。采用所建立的方法测定2家生产企业25批样品中栀子苷、黄芩苷、汉黄芩苷、盐酸小檗碱、黄芩素、汉黄芩素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量,并通过聚类分析和偏最小二乘-判别分析法评价样品的整体质量。结果 11种成分的进样量分别在0.080 6~8.06μg、0.194 0~19.40μg、0.049 4~4.94μg、0.088 9~8.89μg、0.030 4~3.04μg、0.014 2~1.42μg、0.017 9~1.79μg、0.016 94~1.69μg、0.020 0~2.00μg、0.025 9~2.59μg、0.009 18~0.92μg范围内与峰面积线性关系良好(r≥0.999 5);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为96.90%~102.01%,RSD为0.52%~2.58%(n=9)。同一厂家样品的整体质量一致性良好,不同厂家之间存在差异,引起质量差异的主要成分为黄芩苷、大黄酸、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素。结论 该方法操作简便,结果准确可靠,可用于测定四季三黄丸中11种化学成分的含量及其质量评价。相关企业应重点关注制剂中上述成分尤其是黄芩苷和大黄酸的含量,以保证产品疗效。

HPLC-DAD法同时测定四季三黄丸中9种成分

目的建立高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-DAD）法同时测定四季三黄丸（大黄、黄柏、黄芩等）中9种成分的含有量。方法分析采用Agilent SB-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;乙腈（A）-0.5%磷酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱;体积流量0.8 m L/min;柱温38℃;大黄酸、大黄素、大黄素酚和大黄素甲醚检测波长254 nm,栀子苷240 nm,黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素278 nm,巴马汀345 nm;进样量10μL。结果栀子苷、黄芩苷、黄芩素、巴马汀、大黄酸、汉黄芩素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚分别在15~225μg/m L（r=0.999 8）、8~120μg/m L（r=0.999 3）、7~105μg/m L（r=0.999 6）、10~150μg/m L（r=0.999 3）、20~300μg/m L（r=0.999 5）、6~90μg/m L（r=0.999 7）、5~75μg/m L（r=0.999 6）、15~225μg/m L（r=0.999 5）、21~315μg/m L（r=0.999 4）范围内线性关系良好,平均回收率98.82%~100.85%,RSD均小于2.0%。结论该方法简单、准确、可靠,可用于四季三黄丸的质量控制。

高效液相色谱法同时测定四季三黄丸中4种活性成分的含量

采用高效液相色谱法测定四季三黄丸中栀子苷、盐酸小檗碱、黄芩苷和大黄素的含量。样品经甲醇超声提取后,利用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱进行分离,以乙腈-0.1%(体积分数)甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,采用二极管阵列检测器,栀子苷、盐酸小檗碱、黄芩苷和大黄素检测波长分别为240,345,278,287nm。栀子苷、盐酸小檗碱、黄芩苷和大黄素的线性范围分别为7.66~76.6,8.99~89.9,3.87~38.7,4.45~44.5mg·L^(-1),检出限(3S/N)分别为0.27,0.038,0.037,0.048mg·L^(-1)。加标回收率在96.3%~99.5%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.7%~2.4%之间。

四季三黄胶囊的主要药效学研究

目的研究并比较四季三黄胶囊与四季三黄丸的主要药效学作用。方法观察四季三黄胶囊的解热作用、抗炎作用、抗菌作用和对正常小鼠及肠燥结小鼠小肠推进运动。结果对鲜啤酒酵母及2,4-二硝基苯酚致大鼠发热,四季三黄胶囊均能明显降低实验动物体温;能抑制由二甲苯引起的小鼠耳壳肿胀及磷酸组胺引起的腹部皮肤毛细血管通透性增高;促进正常小鼠及肠燥结小鼠的肠推进运动。体外抑菌实验显示,四季三黄胶囊对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、福氏志贺菌、绿脓杆菌、变形杆菌均有明显的抑制作用。各作用呈剂量依赖性,与原剂型相比,胶囊作用强。结论四季三黄胶囊具有较强的解热、抗炎、抗菌、通便等作用。

HPLC法同时测定四季三黄丸中盐酸小檗碱、黄芩苷和栀子苷的含量

建立了一种同时测定四季三黄丸中盐酸小檗碱、黄芩苷和栀子苷含量的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法.色谱条件为Agilent Zorbax SB-C18分离柱(250 mm×4.6 mm,粒径5μm),乙腈-6 mmol/L KH_2PO_4流动相梯度洗脱,流速1.0m L/min,多波长切换检测.结果表明,盐酸小檗碱、黄芩苷和栀子苷线性范围分别为3.8 28.4μg/m L(r=0.999 8),16.5 123.8μg/m L(r=0.999 6)和3.8 28.4μg/m L(r=0.999 7),加样回收率分别为97.2%(RSD=1.5%),97.7%(RSD=2.6%)和102.9%(RSD=2.8%).本方法可以同时分析四季三黄丸中盐酸小檗碱、黄芩苷和栀子苷含量,对该制剂质量进行有效监控.

四季三黄丸高效液相指纹图谱与其体外抗氧化活性的灰关联度分析

目的:建立中药制剂四季三黄丸HPLC指纹图谱,确定10批四季三黄丸指纹图谱共有峰与其体外抗氧化活性作用贡献大小。方法:利用HPLC研究四季三黄丸指纹图谱,利用DPPH自由基清除实验研究其体外抗氧化作用,利用灰关联度分析法研究其谱效关系。结果:将10批经过积分处理的四季三黄丸样品的色谱图导入国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》2004A版软件,确定了33个共有峰,批次间相似度均在0.9以上,通过与对照品的保留时间和在线紫外光谱进行比较,对其中9个特征峰进行了定性;四季三黄丸体外抗氧化作用是多化学成分共同作用的结果,通过实验确定了各特征峰对DPPH自由基清除作用贡献大小顺序,其中11号峰和31号峰贡献最大,4号峰和13号峰贡献最小。结论:本实验所构建的四季三黄丸HPLC指纹图谱方法简单,重复性好,可为四季三黄丸的鉴别和质量评价提供参考,四季三黄丸HPLC指纹图谱与其体外抗氧化活性之间有一定的相关性。