不同来源产地酸枣仁药材的HPLC-DAD指纹图谱研究

目的:建立不同来源产地酸枣仁药材的高效液相色谱-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)指纹图谱检测方法。方法:采用超声离心法提取12批不同来源产地酸枣仁药材中的化合物成分,通过梯度洗脱程序,检测204 nm波长下HPLC-DAD指纹图谱,并进行指纹图谱分析与评价。结果:通过指纹图谱的构建和分析,共计确认27个共有峰,指认5个活性化合物,指纹图谱中的相对保留时间接近,相似度较高。结论:本文建立的酸枣仁药材HPLC-DAD指纹图谱检测方法,处理简易,检测快速,操作便捷,可对未知样品进行鉴定、分类和评价。

色谱指纹图谱相似度方法的适应性研究

目的评价8种相似度方法,研究各相似度方法的适应性,为相似度方法的应用提供指导。方法以土茯苓药材色谱指纹图谱峰面积数据为载体,以峰数弹性、峰比例同态性和峰面积同态性为指标,比较了8种相似度方法,分析多种相似度方法在药材真伪鉴别、同一品种药材的分类评价和中药制剂质量稳定性评价3个中药质量评价层面中的适应性。结果数量相似度仅对小峰增减响应灵敏,可用于药材的品种鉴别;夹角余弦、相关系数和组合相似度仅对峰比例差异响应灵敏,适合药材品种鉴别和原料药峰比例稳定性的初步评价;基于相似系统理论的多种程度相似度对峰比例差异和峰面积差异同时响应,能定量地衡量色谱峰峰面积的差异和对应成分配比的稳定性,适合中药制剂质量稳定性的精细评价。结论数量相似度可用于中药材品种的初步鉴别,共有峰夹角余弦和相关系数相似度适合药材的品种鉴别,所有峰夹角余弦和组合相似度适合原料药峰比例稳定性的初步评价,基于相似系统理论的多种程度相似度适用于中药制剂质量稳定性的精细评价。

中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统

目的介绍"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"的组成框架和核心内容。方法该软件能给出①指纹峰特征技术参数;②色谱指纹图谱潜信息特征判据参数即以色谱指纹图谱指数F和色谱指纹图谱信息量指数I及色谱指纹图分离量指数RF等综合性指标为核心挖掘色谱指纹图谱的潜信息特征;③色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数;④色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数,能计算以上4类参数用于中药信息质量控制研究。结果给出①指纹峰特征技术参数15个;②色谱指纹图谱潜信息特征判据参数42个;③色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数32个,其中定性相似度15个,定量相似度17个,使用时仅需32个参数的1到4个即可;④色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数25个,用以上4类参数可构建详实的中药数字化指纹图谱,能清晰准确地反映和控制中药质量。结论"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统3.0"是进行中药数字化指纹图谱研究的重要有效工具,其114个指标基本构成了数字中药质控的核心,是中药现代信息质量控制的一种最佳技术和合理选择。

色谱及相关技术在中药质量评价中的应用

对中药物质基础的研究方法——化学物质组学,以及中药质量评价的关键技术——指纹图谱技术做了介绍,并在此基础上综述了中药化学信息获取的关键技术——色谱及相关技术在中药质量评价中的应用。论述的结果表明,以化学物质组学为指导,结合色谱及相关技术获取指纹图谱信息及多指标成分定量信息的研究模式,对中药质量评价体系的建立具有指导意义。

中药色谱指纹图谱评价方法研究进展

通过查阅二十余年国内外相关文献,并结合本实验室工作进行,综述了中药色谱指纹图谱评价方法,包括化学模式识别、相似度法、总量统计矩分析法、超信息特征数字化法和系统指纹定量法等,并对相关计算机评价软件进行了对比总结。结果发现近年来,中药色谱指纹图谱评价方法的研究在不断地深入发展,尤为突出的是孙国祥课题组发明了中药指纹整体定量评价的核心技术-系统指纹定量法。

中药色谱指纹图谱相似度评价新模型及其论证

目的:为进一步发展和完善用于中药质量评价的色谱指纹图谱相似度计算方法。方法:应用了中药实例研究数据和模拟数据对已有和新提出的图谱相似度计算法各自特点进行了比较和分析。结果:表明新提出的图谱相似度计算新模型在实践应用中具有很多优势。结论:在实际应用中,新模型自身固有的模型特点对中药质量评价和控制的解释更具合理性和实用性。

中药色谱指纹图谱相似性计算方法的研究

目的 :简要论述了中药色谱指纹图谱相似性计算的基本原理。方法 :在中药色谱指纹图谱分析中 ,可根据样品指纹图谱的整体相似程度来估算中药化学组成的整体波动程度 ,据此分析中药质量的稳定性。谱峰面积比较法和谱图数据点比较法是两种常用的指纹图谱相似性计算方法。结果 :本文对两者进行了仿真实验及实例研究 ,其结果均表明谱峰面积比较法在方法稳健性和结果可靠性等方面优于谱图数据点比较法。结论

中药色谱指纹图谱双层次控制模型理论和应用研究

目的建立中药色谱指纹图谱双层次控制模型理论并应用于天王补心丸(TWBXP)HPLC定量指纹图谱评价,以丰富中药指纹图谱质控理论。方法采用特征指纹图谱作为中药指纹图谱的第一控制层次(司定性),对中药指纹图谱检测系统实行远控制;采用标准指纹图谱作为第二控制层次(司定量),对中药指纹图谱质控系统实行近控制。结果以物质三态描述第一层次特征指纹图谱属于图谱的气态,是升华得到;标准指纹图谱属于图谱的固态,具有不变性和难以应用于具体样品的检测定量;以标准制剂控制模式得到的标准指纹图谱属于图谱的液态,具有适用性强和检测引起的误差极小,其更适合我国中药质量工业化控制。以甘草酸(GHIA)为参照物峰,确定46个共有指纹峰,建立了TWBXP-HPLC定量指纹图谱,并以系统比率指纹定量法鉴别出11批样品质量均为好以上(S12除外)。结论中药色谱指纹图谱双层次控制模型理论为中药标准制剂控制模式和定量指纹图谱模式走向中药工业化应用在理论上奠定了重要基础。

穿山甲色谱指纹谱的建立及其在基源鉴别和质量等级区分方面的应用

中药穿山甲为鳞鲤科动物穿山甲的鳞甲,常用于治疗乳汁不通、痈肿疮毒、风湿痹痛等症,饮片来源上经常存在基源不清、等级不明的问题。针对以上问题,目前已发展出了多种分析方法,包括薄层色谱、质谱和DNA检测,但由于特异性低、设备成本高、步骤繁琐等不足,以上方法均不适合作为穿山甲质量监测的常规手段,而色谱指纹谱技术恰好可以弥补以上不足。该文旨在建立穿山甲的色谱指纹谱,并探讨其在等级及基源鉴别方面的可行性。穿山甲粉末经1 mol/L HCl加热水解得供试液,色谱柱采用Waters Symmetry 300 C18,以0.1%(v/v)三氟乙酸/水、0.1%(v/v)三氟乙酸/乙腈为流动相,280 nm为检测波长,采用梯度洗脱获得穿山甲指纹谱。经考察,该方法的精密度、日内日间重复性及样品稳定性均表现良好(RSD<5%)。以12批中华穿山甲一等品的平均指纹谱为对照指纹谱,同时确认17个共有峰,继而以共有峰绝对峰面积为原始数据,计算样品指纹谱与对照指纹谱的相似度。结果表明,中华穿山甲与其他动物来源穿山甲的相似度不高于0.776,体现了相似度评价在基源鉴别上的有效性;但不同等级穿山甲之间交叉严重,表明相似度评价在等级鉴别上的局限性。以24批不同等级中华穿山甲为分析对象建立判别分析模型,经十折交叉验证,模型无偏差正确率为95.83%,说明该模型在等级区分上可行性很高。该文通过建立穿山甲的色谱指纹谱,并结合不同数据处理方法验证了其在基源鉴别和等级区分方面的可行性,为保证穿山甲临床用药的科学性、准确性提供新的思路。

培养条件对毛霉胞内代谢产物稳定性的影响研究

试验初步探讨了毛霉培养条件对其胞内代谢产物稳定性的影响。以单一菌株为研究对象,探讨了培养基、接种量、培养时间、培养温度、摇瓶速度等因素对菌株胞内代谢产物HPLC图谱的影响,分析各因素的影响大小,建立了规范化的培养流程:选用马铃薯制作马铃薯葡萄糖培养基,按每支18×180 mm试管装载30 m L进行分装,灭菌后接种2 m L的孢子悬液,在温度设为20℃的恒温摇床中以150 r/min摇瓶速度摇瓶培养4 d后取出。

进口西拉葡萄酒的HPLC-DAD-MS特征指纹图谱

建立进口西拉葡萄酒的高效液相色谱-二极管-离子阱质谱指纹图谱分析方法。样品采用乙酸乙酯萃取,旋转蒸发仪浓缩,甲醇溶解,高效液相色谱-离子阱质谱分析测定。色谱柱采用MGⅡC18柱(150 mm×2.0 mm,5μm),以pH 3.0水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.25 mL/min,多波长检测,离子阱质谱采用负离子模式,扫描范围m/z 50~1 200,可对没食子酸等11个组分进行定性和定量。维拉西拉葡萄酒的15个共有峰在60 min内得到良好分离,通过与标准品比较,对其中6个峰进行了确证,10批次维拉西拉葡萄酒的相似度均大于0.9。方法简便、灵敏、稳定、精确,生成的葡萄酒指纹图谱能够用于进口西拉葡萄酒的质量评价。

中药一致性评价关键技术——中药溶出-系统指纹定量法评价溶出曲线相似性

目的建立中药溶出-系统指纹定量法,以复方甘草片为模型药物使用溶出-宏定性相似度(S_(m))和溶出-宏定量相似度(P_(m))评价供试制剂与参比制剂溶出曲线一致性。方法以复方甘草片为例,在水和pH 1.0盐酸溶出介质中,用紫外全指纹溶出度测定法测定样品累积溶出度和溶出曲线,用S_(m)、P_(m)及f_(2)评价溶出曲线相似性,并研究f_(2)与P_(m)间的关系。结果用中药溶出-系统指纹定量法的S_(m)、P_(m)评价溶出曲线相似性,在选择不同溶出介质和不同参照标准时,评价结果显著不同。当溶出曲线满足①S_(m)≥0.9和②90%≤P_(m)≤110%时f_(2)基本大于50。结论本方法从定性和定量两个方面对复方甘草片溶出曲线进行评价,可揭示不同厂家产品质量的差异性。中药制剂溶出曲线可定在DG3(85%≤P_(m)≤115%)。特殊情况,考虑中药多成分复杂性可定在DG5(①S_(m)≥0.9和②70%≤P_(m)≤130%)。中药制剂溶出曲线相似性标准要根据制剂工艺复杂程度和制剂稳定性情况来确定。

色谱指纹图谱相似度评价方法的规范化研究(二)

目的进行色谱指纹图谱相似度评价方法的规范化研究。方法采用高效液相色谱法和计算机拟合技术对特征成分(以北柴胡为例)的含量规律、指纹图谱的确立原则和相似度结果的统计学意义进行了考察。结果指纹图谱各指标成分的含量应符合正态分布规律;推荐采用成分含量信息与中位数构建参照指纹图谱;应对相似度结论的置信度进行考察。结论对色谱指纹图谱从样品收集、标准建立到结论检验等一系列环节从统计学意义上进行了阐述和规范。

川芎药材与饮片指纹图谱对比研究

目的:采用高效液相色谱法建立川芎药材和饮片的指纹图谱,从而考察川芎炮制前后的质量传递信息,为川芎饮片质量控制及质量标准的建立提供依据。方法:液相色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相;梯度洗脱(0~10min,15%→30%A;10~20min,30%→50%A;20~40min,50%→70%A;40~45min,70%A;45~55min,70%→100%A;50~60min,100%A;60~65min,100%→15%A;65~70min,15%A)流速:0.8mL·min^(-1),检测波长为270nm,柱温:30℃,进样量:10μL,理论板数按阿魏酸峰计算应不低于2000。通过测定15批川芎药材和饮片的指纹图谱,并用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版对两者相似度进行配对t检验比较分析。结果:15批川芎药材及饮片指纹图谱匹配结果,可匹配成功30个共有峰(饮片29个共有峰),经筛选可得8个共有峰。经过与对照品对比标定出1个色谱峰,分别为2号(阿魏酸)。川芎炮制前后指纹图谱基本一致(配对样本相关系数γ=0.9188,其均值差异检验t=1.896,df=14,P=0.0788)。结论:川芎炮制成饮片后未改变川芎原药材的化学成分,保留了川芎原药材的质量属性,川芎炮制前后其化学成分变化无统计学差异(P>0.05)。

辽藁本药材与饮片指纹图谱对比研究

目的:建立辽藁本药材和饮片的HPLC指纹图谱,从而考察辽藁本炮制前后的质量传递信息,为辽藁本药材及饮片质量控制及质量标准的建立提供依据。方法:测定15批辽藁本药材和饮片的指纹图谱,并用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版对两者相似度进行配对t检验比较分析。在选定的色谱条件下,确定6个共有色谱峰构成15批辽藁本药材与饮片指纹图谱的特征峰,辽藁本炮制前后指纹图谱基本一致,对15批辽藁本药材和饮片指纹图谱相似度进行配对t检验,得配对样本相关系数(γ=0.7696),其均值差异检验(t=0.2394,d;=14,P=0.8143)。结果:辽藁本药材和饮片指纹图谱大体一致,辽藁本炮制前后其化学成分变化的差异无统计学意义(P>0.05)。辽藁本药材和饮片指纹图谱大体一致,辽藁本炮制后未改变辽藁本药材的化学成分,保留辽藁本原药材的质量属性。结论:该研究可为辽藁本产地加工炮制、炮制前后质量属性的变化及辽藁本饮片质量控制提供参考。

色谱指纹图谱相似度评价方法的规范化研究(一)

目的对色谱指纹图谱相似度评价方法的规范化进行研究。方法采用计算机拟合技术和高效液相色谱法对不同相似度评价方法的性能和指纹图谱特征指标的选择标准进行了考察。结果在以色谱峰面积作为指标进行的相似度计算中,推荐采用夹角余弦和相关系数法。在指纹图谱特征变量的选择方面,推荐采用色谱峰面积。结论对常用的色谱指纹图谱相似度评价方法的特性和应用范围进行了明确阐述和界定。

信阳毛尖茶指纹图谱分级标准样品的研制方法

建立一套基于指纹图谱分级的茶叶标准样品研制方法,研制3个级别(120个样,每样50 g)的信阳毛尖茶标准样品。依据国标方法制备茶汤,采用高效液相色谱法进行茶汤滋味成分指纹图谱分析,并采用新改良程度相似度法进行相似度计算。以指纹图谱的相似度作为评价指标,按照《标准样品工作导则》的要求,对所研制标准样品进行均匀性检验(F检验)、稳定性检验(t检验)和8家实验室联合定值。结果表明,所研制的各级茶样均匀性、稳定性良好,对各级茶样的指纹图谱相似度的定值结果和不确定度(95%置信度)分别为0.918±0.027(一级)、0.662±0.033(二级)、0.400±0.074(三级),且与感官评审等级一致。该标准样品具有量化分级的特征,是国内首套指纹图谱分级茶叶标准样品。已获得全国标准样品技术委员会颁发的有证标准样品证书,可用于信阳毛尖茶的分等定级。

HPLC考察燕窝加工前后唾液酸的含量变化

目的:建立燕窝中唾液酸的分离分析方法,考察燕窝原料(去除杂质的干燥燕窝)、炖煮和加工成即食罐头前后唾液酸的含量变化。方法:燕窝经过磷酸水解,使唾液酸(即N-乙酰神经氨酸)从唾液酸糖蛋白的结合状态游离,用高效液相色谱法测定唾液酸的含量,应用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》评价燕窝3种样品的指纹图谱,比较3种样品的唾液酸含量变化。结果:燕窝原料的唾液酸含量为9.898%,经炖煮或加工成即食罐头后,唾液酸的含量分别为9.921%,9.913%,略高于原料。结论:燕窝加工成即食罐头后其唾液酸含量与直接炖煮的接近,略高于燕窝原料,提示应用现代工艺将燕窝加工成即食罐头,唾液酸保存较好。

防风药材与饮片指纹图谱对比研究

目的:采用高效液相色谱法建立防风药材和防风饮片的指纹图谱,考察防风炮制前后的量值传递信息,为建立防风饮片质量控制及质量标准提供依据。方法:液相色谱柱(月旭,Ultimate■XBC_(18),4.6mm×250mm,5μm);以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相为甲醇-水;洗脱方式:线性梯度,0~70min(20%甲醇~90%甲醇);检测波长为254nm;流速:1.0mL·min^(-1);进样量:10μL;柱温:30℃,理论板数按升麻素苷峰计算应不低于2000。共测定了23批防风药材和饮片的指纹图谱,通过应用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版对两者相似度进行配对t检验分析。结果:在选定的色谱条件下,确定15个色谱峰构成23批防风的指纹图谱特征峰,防风炮制前后指纹图谱基本一致(配对样本相关系数γ=0.9374,均值差异检验t=0.6841,df=22,P=0.5011),防风炮制前后其化学成分变化无统计学差异(P>0.05)。结论:防风药材和饮片指纹图谱大体一致,防风炮制成饮片后,未改变防风药材的化学成分,并保留了防风原药材的质量属性,量值传递率高。

构建中药数字化指纹图谱研究

定义数字化指纹图谱内涵,构建中药数字化指纹图谱基础框架和内核以及数字化中药的核心。采用(1)指纹峰特征技术参数;(2)色谱指纹图谱潜信息特征判据参数即以色谱指纹图谱指数F和色谱指纹图谱信息量指数I及色谱指纹图分离量指数RF等综合性指标为核心挖掘色谱指纹图谱的潜信息特征;(3)色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数;(4)色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数。用以上4类参数构建中药数字化指纹图谱。确定(1)指纹峰特征技术参数15个;(2)色谱指纹图谱潜信息特征判据参数42个;(3)色谱指纹图谱定性相似度和定量相似度判据参数32个,其中定性相似度15个,定量相似度17个,使用时仅需32个参数的1到4个即可得到确切评价结果;(4)色谱指纹图谱相对统一化特征判据参数25个。用以上4类参数可构建详实的中药数字化指纹图谱,能清晰准确地反映和控制中药质量。数字化指纹图谱技术是数字化中药质控的典型代表和核心技术,是中药现代质量控制的一种理想技术和正确选择。