应用水动力转染技术使人低密度脂蛋白受体、CD81和浸入诱导蛋白L同时在小鼠体内表达

为建立人低密度脂蛋白受体(LDLR)、CD81和浸入诱导蛋白L(Sip-L)等多个HCV感染相关分子共表达的转基因小鼠,首先分别构建了白蛋白启动子调控的人LDLR、CD81和Sip-L基因的小鼠肝脏组织特异性表达载体,将3种质粒同时采用水动力转染技术导入小鼠体内,RT-PCR和免疫组化技术检测转入体内基因的表达及持续时间。结果表明,转染8h后即可检测到3种基因在体内转录,人LDLR和CD81在转染1～4d后可在50%～90%的肝细胞中高效表达,7d后检测不到目的基因表达。为了进一步延长转染基因在小鼠体内的表达时间,又分别构建了人LDLR、CD81和Sip-L的染色体整合型表达载体,将它们与噬菌体ФC31的整合酶表达载体同时水动力转染小鼠,3种基因在体内表达时间可持续到转染后25d。以上结果表明建立了多个HCV感染相关分子共表达的转基因小鼠,为确定这些分子能否使小鼠感染HCV奠定了基础。

一种基于SIP技术的多通道L波段T/R组件设计

为了满足工程设计需求,提出一种基于系统级封装(System in Package,SIP)技术的多通道L波段收发组件设计方案,详细阐述其实现原理。SIP作为一种先进的系统集成与封装技术,是实现有源相控阵雷达收发(T/R)组件小型化、高密度化及高可靠性的重要途径。针对T/R组件关键技术指标进行设计分析,采用SIP技术进行了关键电路小型化设计,同时进行了多层微波电路PCB设计、T/R模块结构设计等工作,研制了L波段多通道T/R组件实物。收发组件的测试数据验证了设计方案的可行性和工程实用性。

1-磷酸鞘氨醇与肺部疾病的研究进展

1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)是一种具有生物活性的细胞膜的重要组成部分以及鞘脂类代谢产物之一。S1P也是调节细胞内外多种生物学功能的重要信号分子,通过与5种G蛋白偶联受体亚型结合(即S1PR1-S1PR5)产生不同的生物学功能,包括调节细胞增殖、存活、凋亡、炎症诱导及血管再生等。近年来研究表明S1P及其S1PR/SPHK对肺部疾病的发生发展起着重要的作用,尤其对支气管哮喘、肺纤维化、肺炎、支气管扩张、慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)以及肺癌的发生发展起着关键的作用,这或许为肺部疾病的治疗提供一个新途径。

缺氧前、后处理1-磷酸鞘氨醇对心肌细胞缺氧/复氧损伤拮抗作用的差异及相关机制

目的：探讨1-磷酸鞘氨醇（S1P）缺氧前、后处理对心肌细胞缺氧／复氧（H／R）损伤拮抗作用的差异及相关机制。方法：分离SD乳鼠（1—2d龄）心肌细胞进行体外培养。对培养的心肌细胞进行H／R处理以模拟心脏缺血／再灌注（ischemia／reperfusion，r／R）损伤。将培养的心肌细胞随机分为对照组、H／R组、H／R＋SIP缺氧前处理（H／R’pre—S1P）组及I-I／R＋SIP缺氧后处理（I-I／R＋post—S1P）组，采用四甲基偶氮唑蓝（methylthiazolyltetrazo｜ium。MTT）比色法检测心肌细胞的活力，乳酸脱氢酶（1actatedehydrogenase，LDH）检测试剂盒检测培养基中LDH的水平，caspase-3活性检测试剂盒检测心肌细胞中caspase．3的活性，Westernblot检测ATP激活的蛋白激酶（AMPK）、激活的苏氨酸激酶（Akt）、细胞外信号调节激酶1／2（ERKl／2）蛋白磷酸化水平及SIP裂解酶．1（SIPlyase1，SPLl）蛋白表达的水平。结果：与对照组相比，I-1／R组心肌细胞活力显著降低（P〈0．01），培养基中LDH的浓度和细胞中easpase-3的活性显著增高（P〈0．01）。S1P缺氧前处理可明显增加H／R处理后心肌细胞的活力（P〈0．01），减少LDH释放和caspase-3的活性（P〈0．01）；而I-I／R＋post—S1P组的各项指标与H／R组比较均无明显差异。Westernblot检测发现，S1P缺氧前处理可明显增高心肌细胞中AMPK、Akt和ERkl／2磷酸化的水平（P〈0．05），而SIP缺氧后处理未激活AMPK、Akt和ERKl／2生存信号。Westernblot检测发现，缺氧处理组心肌细胞中SPLl表达的水平较对照组显著升高（P〈0．01）。结论：缺氧前用S1P处理可激活AMPK、Akt、ERKl／2生存信号，显著减少心肌细胞凋亡，增加细胞的存活率，减轻心肌细胞H／R损伤；而S1P缺氧后处理不能发挥以上保护作用，其机制可能是缺氧处理导致心肌细胞SPLl的表达上调，通过降解SIP而减弱了其介导的抗心肌细胞H／R损伤的作用。