LRRK2活化Rho GTPases信号通路在小胶质细胞吞噬α-突触核蛋白中的作用机制

目的探讨小胶质细胞吞噬α-突触核蛋白的分子机制。方法构建α-Syn寡聚体诱导BV-2细胞活化模型,免疫荧光检测BV-2细胞内α-Syn阳性包涵体的数量。Western blot检测BV-2细胞LRRK2蛋白的表达。Pull down检测BV-2细胞Rac1、Cdc42、RhoA的活性。结果与对照组相比,α-Syn寡聚体诱导BV-2细胞内α-Syn阳性包涵体数量增加,LRRK2蛋白表达增加及Rac1、Cdc42、RhoA活性增加。结论小胶质细胞对α-突触核蛋白的吞噬与LRRK2活化Rho GTPases信号通路相关。

日本血吸虫Rho GTPase DNA疫苗及重组蛋白疫苗免疫保护机制初探

目的 初步探讨日本血吸虫中国大陆株pcDNA3 .1 SjRhoGTPaseDNA疫苗、重组蛋白疫苗以及联合疫苗免疫的保护机制。 方法 将 pcDNA3 .1 SjRhoGTPaseDNA疫苗、重组蛋白疫苗分别及联合疫苗免疫昆明鼠后 ,分不同时间采集血清 ,以ELISA法测定总抗体及IgG亚类。 结果 重组蛋白疫苗及联合疫苗诱导产生的抗体效价较高 ,DNA疫苗及联合疫苗诱导产生的抗体以IgG2a为主 ,重组蛋白疫苗诱导产生的抗体以IgG1为主。 结论 Sj RhoGTPase基因DNA疫苗及联合疫苗主要诱生Th1型细胞免疫应答 。

日本血吸虫RhoGTPaseDNA及重组蛋白免疫保护效果研究

目的 研究日本血吸虫中国大陆株Rho家族小分子G蛋白(Sj-Rho GTPase)DNA疫苗及重组蛋白疫苗免疫保护效果。方法 将pcDNA3.1-SjRho GTPase DNA疫苗和pGEX-5X-3原核载体所表达的重组蛋白疫苗三次分别或联合免疫昆明鼠,3周后,每鼠感染40条尾蚴,42 d后剖杀小鼠,记数成虫和肝脏虫卵数。结果 与佐剂或空白质粒对照组相比,DNA疫苗、重组蛋白疫苗及联合免疫分别获得22.16％(P<0.01)、18.71％(P<0.05)和39.20％(P<0.001)的减虫率以及34.55％、20.07％和49.55％(P<0.001)的肝组织减卵率。结论Sj-Rho GTPase DNA疫苗及重组蛋白疫苗均可诱导小鼠产生一定的免疫保护作用,且联合免疫方案保护效果好于单一疫苗。

大鼠海马发育过程中Rho GTPases相关信号分子mRNA的表达

目的探讨Rho GTPases相关信号分子的发育规律。方法RT-PCR法检测大鼠发育不同阶段Rho-A、Rac-1、CRMP-1和Tub β3mRNA的表达。结果RT-PCR实际扩增长度与设计长度相吻合。内参照β-actin的PCR产物电泳条带在各个阶段均呈高表达。Rho-A和Rac-1的表达有相似的变化规律,随着海马发育呈明显的阶段性,表达的高峰在胚胎、幼年和老年阶段,而新生阶段和成年阶段处于相对低表达阶段;Rac-1的表达量在海马发育的各个阶段均超过Rho-A的表达量。CRMP-1和Tubβ3的表达从胚胎到成年的各个阶段与CRMP-1的表达具有相似的变化趋势,以胎鼠、新生大鼠和幼年大鼠表达较多,但老年阶段CRMP-1的表达较成年阶段显著升高(P<0.05),而Tubβ3在老年阶段停留在成年阶段的水平。结论大鼠海马发育过程中,Rho-A和Rac-1呈阶段性高表达,CRMP-1和Tubβ3的表达从胚胎到成年逐渐减少,但老年阶段CRMP-1表达再次增多。

胰腺癌组织中miR-939-5p、ARHGAP4基因表达变化及意义

目的探讨胰腺癌组织中微小RNA-939-5p(miR-939-5p)与Rho GTPase激活蛋白4(ARHGAP4)的表达变化及临床意义。方法用荧光定量PCR技术检测98例胰腺癌组织及癌旁正常组织中miR-939-5p、ARHGAP4 mRNA的相对表达量,并分析二者表达与胰腺癌患者临床病理特征的关系,用Pearson线性相关法分析miR-939-5p、ARHGAP4 mRNA的关系。结果与癌旁正常组织比较,胰腺癌组织中miR-939-5p相对表达量高,ARHGAP4 mRNA相对表达量低(P均<0.001)。胰腺癌组织中miR-939-5p、ARHGAP4 mRNA表达与肿瘤TNM分期、组织分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者年龄、性别及肿瘤直径无关(P均>0.05)。胰腺癌组织中miR-939-5p表达与ARHGAP4 mRNA表达呈负相关(r=-0.574,P<0.05)。结论胰腺癌组织中miR-939-5p呈高表达,ARHGAP4 mRNA呈低表达,二者可能协同参与肿瘤的发生发展。