日本血吸虫SjCTPI和SjC23DNA疫苗联合免疫保护作用的研究

目的 探索 Sj CTPI和 Sj C2 3DNA疫苗联合应用保护性免疫的协同作用。方法 大量制备 pc DNA3.1- Sj CTPI和 pc DNA3.1- Sj C2 3的质粒 DNA。 4 8只 BAL B/ c小鼠分为 4个组 (A、B、C、D组 )每组 12只。 A组每鼠经双侧股四头肌注射 10 0 μg pc DNA3.1的质粒 DNA,为对照组 ;B组为Sj C2 3组 ,每鼠肌注 10 0μg pc DNA3.1- Sj CTPI的质粒 DNA;C组为 Sj CTPI组 ,每鼠肌注 10 0μgpc DNA3.1- Sj CTPI的质粒 DNA;D组为联合免疫组 ,每组肌注 10 0μg pc DNA3.1- Sj C2 3和 10 0μgpc DNA3.1- Sj CTPI质粒 DNA的混和物。分别于 0、14、2 8d免疫 3次。末次免疫后 30 d,每鼠经腹部皮肤攻击感染 (45± 2 )条日本血吸虫尾蚴。攻击后 4 5 d,剖杀所有小鼠 ,灌冲 ,收集成虫并计数。每鼠肝脏称重后剪碎 ,置 5 % KOH中消化 ,并计数虫卵数。比较各组间的减虫率和减卵率。结果 与对照组相比 ,Sj C2 3组、Sj CTPI及联合组的减虫率分别为 2 8.1%、2 9.1%和 4 1.5 % ,均非常显著地高于对照组 (P分别为 <0 .0 1,<0 .0 1,<0 .0 0 1) ,而联合组则又显著地高于单独 Sj C2 3组及单独 Sj CTPI组 (P均 <0 .0 5 )。三组的减卵率分别为 37.9%、4 4 .2 %和 6 1.4 % ,均非常显著地高于对照组 (P分别为 <0 .0 1,<0 .0 1,<0 .0 0 1) ,但?

抗rSjCTPI单克隆抗体检测血吸虫循环抗原疗效考核价值研究

目的 进一步探讨抗重组血吸虫磷酸丙糖异构酶 (r Sj CTPI)的单克隆抗体检测血吸虫循环抗原对血吸虫病疗效考核的价值。方法 建立以纯化的抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原 (SEA )的多克隆抗体 (Ig G)为捕捉系统 ,以酶标抗 r Sj CTPI为检测系统的酶联免疫吸附试验 (P- M- EL ISA)法 ,分别对同批治疗前及治疗后 2、4、6、12个月的血吸虫病人进行检测 ,并与常规检测抗体的 SEA-EL ISA法比较。结果 P- M- EL ISA法对治疗前血吸虫病人检测阳性率为 96 .6 % ,而检测抗体的SEA- EL ISA为 98.3%。 P- M- EL ISA法对治愈后 2、4、6、12个月血清循环抗原检测阴转率分别为15 .3%、 37.3%、 5 2 .0 %、 83.3% ,而检测抗体的 SEA - EL ISA法分别为 3.4%、 6 .8%、 12 .0 %、16 .7%。结论 表明该法既有较好的诊断价值 ,又有较好的疗效考核价值。

日本血吸虫SjCTPI-Hsp70 DNA疫苗与白细胞介素12对水牛的联合免疫保护作用研究

目的探讨中国大陆株日本血吸虫磷酸丙糖异构酶-热激蛋白(SjCTPI-Hsp70)DNA疫苗联合佐剂白细胞介素-12(IL-12)质粒DNA对水牛的免疫保护作用。方法实验采用双盲法,所用疫苗及制剂均在实验结束后解码。将购自非血吸虫病流行区45头8～10月龄健康水牛随机分为A组(SjCTPI-Hsp70+IL-12,300μg)、B组(SjCTPI+IL-12,300μg)和C组(空质粒pVAX+IL-12,300μg)等3组(每组15头),每头牛分别经肩部肌肉注射免疫3次,每次间隔28d。末次免疫后28d,每头牛经大腿内侧皮肤感染日本血吸虫尾蚴1000条。解剖前2d及当天分别收集粪便1次,用定量法计数虫卵和毛蚴。攻击感染后56d解剖,用生理盐水经胸主动脉灌冲法收集、计数成虫,检测每克肝组织虫卵数。结果A、B组减虫率分别为51.2%和41.5%(χ2=1.89,P>0.05),减雌虫率分别为48.9%和44.7%(χ2=0.35,P>0.05),减粪卵率分别为52.1%和38.3%(χ2=3.84,P<0.05),减毛蚴率为52.1%和33.2%(χ2=7.30,P<0.01)及减肝卵率为61.5%和42.0%(χ2=7.61,P<0.01)。结论用SjCTPI-Hsp70+IL-12免疫水牛可获得一定的免疫保护性作用。

日本血吸虫磷酸丙糖异构酶(TPI)DNA疫苗对肝脏虫卵肉芽肿调节作用的研究

目的 探讨日本血吸虫TPI DNA疫苗对血吸虫肝脏虫卵肉芽肿的免疫调节作用,以评价其作为抗病疫苗的潜能。方法 30头松江猪分为3组。A组(TPI组)每头猪于两侧臀部肌注500μgpcDNA3.1-SjCTPI质粒DNA;B组(TPI+IL-12组)每头猪肌注500μg pcDNA3.1-SjCTPI DNA疫苗及500μg pcDNA3.1-P35和500μg pcDNA3.1-P40质粒DNA的混和物;C组(对照组),每头猪肌注500μg pcDNA3.1质粒DNA。于第0、3、6周共免疫3次。末次免疫后30d,每头猪采用背部贴片法攻击感染600条日本血吸虫尾蚴,攻击后45 d剖杀实验猪,取肝脏,于同一部位切取1.5 cm^3的肝组织。按常规法制备石蜡切片。切片在NYD-1000型图像分析系统下观察,测定所有肉芽肿的面积和直径,并比较。结果 与对照组相比TPI组及TPI+IL-12组肉芽肿内炎性细胞明显减少。肉芽肿平均面积较对照组分别减少41.95%和42.50%,肉芽肿直径分别减少25.14%和25.66%。结论 SjCTPI DNA疫苗具有下调血吸虫肝脏肉芽肿的作用,可望成为一种血吸虫病抗病疫苗。