LncRNA PVT1在非小细胞肺癌中的表达及其与脑转移的相关性

目的探讨长非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤变异易位1(PVT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中的表达情况,并分析其与脑转移的关系。方法选取2018年1月至2022年6月在南京市溧水区人民医院就诊并确诊为NSCLC患者95例为研究对象,根据是否发生脑转移,分为发生脑转移组(n=40)和未发生脑转移组(n=55);随机选取同期健康人群50例为对照组。收集临床资料,采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清及癌组织中lncRNA PVT1水平,Spearman法分析血清lncRNA PVT1表达水平与脑转移发生的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清lncRNA PVT1水平对NSCLC患者发生脑转移的诊断价值;采用多因素Logistic回归分析NSCLC患者发生脑转移的影响因素。结果与未发生脑转移组比较,发生脑转移组患者血清及癌组织中lncRNA PVT1水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清中lncRNA PVT1水平与NSCLC患者脑转移呈正相关(r=0.618,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清lncRNA PVT1水平诊断诊断NSCLC患者发生脑转移的曲线下面积为0.859(95%CI 0.773~0.922),灵敏度为80.00%,特异度为87.27%;多因素Logistic回归分析结果显示,lncRNA PVT1、临床分期、淋巴结转移、分化程度均与NSCLC患者发生脑转移有关(P<0.05)。结论发生脑转移的NSCLC患者血清及癌组织中lncRNA PVT1表达水平升高,检测血清lncRNA PVT1表达水平可用于诊断NSCLC患者脑转移的发生。

表观遗传调控植物雄性生殖系细胞发育的研究进展

植物雄性生殖系细胞在发育过程中需经历染色质重塑、组蛋白修饰、DNA甲基化以及小RNA等途径所介导的表观遗传重编程。现已发现诸多基因参与塑造雄性生殖系细胞的表观遗传状态,并调控植物雄性育性。此外,随着各类组学技术的不断进步,一系列关于雄性生殖系细胞在不同发育阶段的特定表观遗传信息被揭示。本文简要梳理了近年来植物雄性生殖系细胞发育过程中表观遗传动态及其所涉及的分子机理的研究进展,并对表观遗传调控植物雄性生殖系细胞发育的后续研究进行了展望。

晚期NSCLC放疗前后血清circPVT1和miR-486-5p水平变化及临床意义

目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者放疗前后血清环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(circPVT1)、微小RNA-486-5p(miR-486-5p)水平变化及对放疗疗效的评估价值。方法研究纳入137例晚期NSCLC患者作为NSCLC组,另选取健康体检者140例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清circPVT1、miR-486-5p表达水平,比较放疗前后及不同放疗疗效患者血清circPVT1和miR-486-5p水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circPVT1、miR-486-5p水平对放疗疗效的诊断价值。结果与对照组相比,NSCLC组放疗前血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);经Targetscan在线分析显示,circPVT1与miR-486-5p有靶向关系;鳞癌与腺癌NSCLC患者放疗前血清circPVT1、miR-486-5p表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);与TNM分期Ⅲ期患者相比,Ⅳ期患者血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗后患者血清circPVT1表达水平降低,miR-486-5p表达水平升高(P<0.05)。与放疗有效组相比,无效组放疗前和放疗后血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗有效组和无效组在放疗后均显示血清circPVT1水平降低,而miR-486-5p水平升高(P<0.01)。血清circPVT1、miR-486-5p联合诊断放疗无效的AUC为0.918(95%CI:0.859~0.958),敏感度为80.65%,特异度为88.00%,联合诊断效能优于单独诊断。结论血清circPVT1、miR-486-5p水平对晚期NSCLC放疗疗效有一定评估价值。

软组织及骨的小细胞型间变性大细胞淋巴瘤1例报道

目的 :阐述罕见的小细胞型间变性大细胞淋巴瘤 (ALCL)的病理形态学特点。方法 :对 1例发生于双侧肩胛区、累及骨和周围软组织的小细胞型ALCL进行了光镜、免疫组织化学观察和PCR基因分析。结果 :病变以小到中体积的恶性淋巴细胞为主 ,局部可见大的间变性细胞 ,部分肿瘤细胞围绕小血管呈花环状排列 ,肿瘤间有较多的中性粒细胞和组织细胞。肿瘤细胞表达CD30和EMA ,并具有T细胞表型和TCR β基因重排。 结论 :此型ALCL具有特殊的组织学表现和侵袭性的生物学行为 ,应注意与炎症和嗜酸性肉芽肿等疾病进行鉴别。

小细胞恶性黑色素瘤10例临床病理分析

目的分析小细胞恶性黑色素瘤(SCMM)的临床病理特点、形态变化、免疫组化表达及鉴别诊断.方法应用HE染色、免疫组化SP法标记,对10例SCMM的形态学和临床资料进行分析.结果 10例患者中男性6例,女性4例,年龄32～78岁,平均48.5岁.好发部位为足、手及躯干部皮肤.SCMM瘤细胞体积小,胞质极少,巢状、弥散片状或梁状分布,多数瘤组织中含有黑色素,少数无色素,瘤细胞核深染、核异型及有不明显核仁.10例SCMM均显示HMB 45、S-100及vimentin强(+).结论 SCMM易被误诊为小细胞癌、Merkel细胞癌、非霍奇金恶性淋巴瘤、PNET、骨外尤文瘤或其他小细胞恶性肿瘤,无色素者更易被误诊.HMB 45、S-100、vimentin标记阳性有助诊断.

肾小细胞型嗜酸细胞瘤3例临床病理特征

目的探讨肾小细胞型嗜酸细胞瘤（RO）的临床病理学特征、免疫表型及鉴别诊断。方法报道3例罕见的小细胞型RO,结合文献分析其临床、形态学及免疫表型特点。结果 3例患者均为女性,年龄38～53岁,均体检发现。巨检：肿瘤境界清楚,直径3～9 cm;切面1例囊实性,2例实性,灰白、灰黄色,其中1例中央可见纤维瘢痕。镜检：3例瘤组织均主要由巢团状或实性片状排列、形态一致的小圆形瘤细胞组成,瘤细胞淡嗜酸,核深染、核仁不明显,核分裂象罕见或无;部分区域可见密集的小腺泡、假菊形团及散在的管囊状结构。2例局部可见典型嗜酸细胞瘤区域,1例仅见很少量散在的嗜酸性瘤细胞。瘤组织间质稀少,2例局部有疏松水肿的结缔组织。免疫组化：3例肿瘤小细胞免疫表型与典型嗜酸细胞基本一致,AE1/AE3、EMA、E-cad、CD117、MOC31和mitochondria均强（＋）,CK7、pax-8、ksp-cad和p504s灶状或弱（＋）;vimentin、CD10、CAⅨ、RCC、S-100A1、CD56、Cg A、Syn、TFEB、HMB45、melan A、CD99、WT-1、CD34和SMA均（-）;Ki-67阳性指数均≤5%。患者随访12～30个月,均未见肿瘤复发和转移。结论肾小细胞型RO是一种非常罕见的RO亚型,组织学形态以一致的小细胞呈片、团状排列并伴有多量假菊形团结构为特征,免疫表型与典型RO基本一致;免疫组化染色有助于与肾原发性或转移性小细胞肿瘤鉴别。

人白细胞抗原G基因多态性与非小细胞肺癌易感性的相关性研究

目的:探讨人白细胞抗原G(HLA-G)基因变异体和血清可溶性HLA-G(s HLA-G)水平与非小细胞肺癌(NSCLC)易感性的关系。方法:2012年1月至2015年1月间,180例NSCLC患者和180例健康受试者参与本项研究。通过免疫法检测血清s HLA-G水平,使用直接DNA测序技术检测HLA-G等位基因。结果:HLA-G 010101和HLA-G 010401杂合子基因型与NSCLC(χ~2=3.268,P=0.025和χ~2=2.563,P=0.036)发病和NSCLC晚期(χ~2=3.672,P=0.015和χ~2=3.257,P=0.028)风险的增加显著相关。HLA-G 0105N和HLA-G 0106杂合子基因型与NSCLC发病(χ~2=2.565,P=0.041和χ~2=3.569,P=0.017)和NSCLCⅣ期(χ~2=3.503,P=0.018和χ~2=2.586,P=0.036)风险的降低显著相关。NSCLC和晚期患者血清s HLA-G水平均高于健康人群。血清s HLA-G浓度高于32 U/ml的患者的生存期较短。结论:HLA-G基因变异体是NSCLC的独立风险因素,且NSCLC患者血清s HLA-G水平可能成为NSCLC诊断和预后的生物标志物。

白血病阶段的小细胞亚型间变性大细胞淋巴瘤1例并文献复习

目的探讨间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）白血病阶段的临床特点、诊断、治疗及相关进展。方法对一例白血病阶段的ALK阳性的ALCL患者的诊治经过进行回顾性分析及相关文献复习。结果4岁男童因淋巴结肿大24d入院，院外按淋巴结炎抗感染治疗无效。入院时患儿高热，精神差，肝、脾、淋巴结肿大，白细胞81．99×10^9／L。根据病理、FISH、骨髓流式细胞术、细胞因子检查确诊为小细胞型ALCL的白血病阶段，合并高细胞因子血症。给予血浆置换使患者一般状态得到改善后立即给予化疗，期间合并骨髓抑制及感染，家长放弃治疗。结论小细胞病理亚型的ALCL侵袭性强，可以合并白血病，易和感染性疾病及其他小细胞肿瘤相混淆，需引起临床医生的注意。患者可合并高细胞因子血症，致病情危重，治疗风险大。

低温对不同抗性金黄色葡萄球菌细胞膜完整性及相关基因表达的影响

为研究不同金黄色葡萄球菌对低温(4℃)的耐受性差异,及其与细胞膜完整性及相关基因表达调节之间的关系,首先通过涂布平板计数法对4株金黄色葡萄球菌食品分离菌株的低温抗性进行比较,发现经过4周的低温胁迫后,与其他菌株相比,BB-1菌株可形成小菌落变种(small colony variants,SCVs),且低温耐受能力最强,存活率达75.50%。而低温耐受能力最弱,且不能形成小菌落变种的BH-25菌株存活率仅为45.68%。随后通过测定胞内容物泄露量、菌悬液电导率和结晶紫染色分析,研究低温对不同金黄色葡萄球菌细胞膜通透性的影响,发现BB-1细胞膜的完整性在低温胁迫下强于BH-25。采用实时荧光定量PCR分析金黄色葡萄球菌胁迫耐受的主要基因(rsbV、rsbW和sigB)和细胞膜脂肪酸合成的主要编码基因(fabD、fabF、fabG、fabH和fabI)表达量的变化,发现BB-1的抗性调控基因和细胞膜脂肪酸调控基因表达水平显著高于BH-25(P<0.05)。可形成SCVs细胞的BB-1菌株在低温下存活能力更强,并且细胞膜更完整,细胞内容物泄露量最少,而且在低温环境下rsbV-rsbW/sigB调节系统基因和调控细胞膜脂肪酸fab家族基因的转录表达水平均显著高于不能形成SCVs细胞的其他菌株(P<0.05)。该研究对深入分析金黄色葡萄球菌的低温抗性机制,以及确立冷链食品安全控制技术具有一定的理论指导意义。

金黄色葡萄球菌小菌落突变株体外感染乳腺上皮细胞的研究

为研究金黄色葡萄球菌小菌落突变株(S.aureus small colony variants,SASCVs)与正常株对原代培养的乳腺上皮细胞的侵袭情况,并观察对比其对细胞结构的损坏程度和对乳腺上皮细胞的影响,本试验对由云南农业大学动物医学实验教学中心实验室分离的一株SASCV进行体外感染小鼠乳腺上皮细胞试验,将分离出的一株SASCV及质控菌株ATCC 25923分别注入实验室体外培养的小鼠乳腺上皮细胞内,采用普通光镜和扫描电子显微镜观察质控菌株ATCC 25923及SASCVs诱导乳腺上皮细胞凋亡的细胞形态学变化;用流式细胞仪(Annexin VFITC/PI双染法)定量检测质控菌株ATCC 25923及SASCVs感染乳腺上皮细胞凋亡的诱导作用,观察细胞的变化。结果显示,质控菌株ATCC 25923及SASCVs感染小鼠乳腺上皮细胞3h后,可诱导乳腺上皮细胞发生凋亡,显示为细胞核皱缩,染色质边缘化和细胞浆内空泡增多等典型的凋亡特征。Annexin V-FITC/PI双染法检测后发现,与对照组相比,感染组细胞凋亡率明显升高,并且阳性对照组的细胞凋亡率明显高于试验组。结果表明,SASCVs在侵染细胞的过程中达到一定数量不再上升;SASCVs的凋亡率明显的较正常金黄色葡萄球菌低。因此,SASCVs也可诱导乳腺上皮细胞凋亡,具有细胞凋亡的典型形态特征。本试验结果为以后预防和控制SASCVs感染奶牛慢性乳房炎提供试验依据。

长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1在结直肠癌组织和细胞中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(PVT1)在结直肠癌(CRC)组织和细胞中的表达及临床意义。方法选取2006年4月至2011年3月在新乡医学院第一附属医院接受手术切除治疗的CRC患者的癌组织和配对癌旁组织标本112例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测CRC组织和癌旁组织中PVT1 mRNA的表达;并分析PVT1 mRNA表达与结直肠癌患者临床病理特征的关系。培养CRC细胞系LoVo和RKO细胞,待细胞融合度达70%以上时随机分为siPVT1组(转染PVT1干扰序列)和siRNA-对照序列组(转染阴性对照序列),转染后继续培养48 h。采用实时荧光定量PCR法检测LoVo和RKO细胞中PVT1mRNA表达,流式细胞术检测LoVo和RKO细胞增殖和凋亡情况;Transwell分析法检测LoVo和RKO细胞的侵袭和迁移能力。结果CRC组织和癌旁组织中PVT1 mRNA高表达率分别为61.61%(69/112)、44.64%(50/112),CRC组织中PVT1 mRNA高表达率显著高于癌旁组织(χ^2=6.472,P<0.05)。CRC组织中PVT1表达与患者的年龄及性别无关(P>0.05),与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结转移及远处转移有关(P<0.05)。siPVT1组LoVo、RKO细胞中PVT1 mRNA相对表达量均显著低于siRNA-对照序列组(P<0.05)。培养0、24 h时,siPVT1组与siRNA-对照序列组LoVo细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);培养48、72、96 h时,siPVT1组LoVo细胞增殖能力显著低于siRNA-对照序列组(P<0.05)。培养0 h时,siPVT1组与siRNA-对照序列组RKO细胞增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05);培养24、48、72、96 h时,siPVT1组RKO细胞增殖能力显著低于siRNA-对照序列组(P<0.05)。siPVT1组LoVo和RKO细胞凋亡率均显著高于siRNA-对照序列组(P<0.05)。siPVT1组LoVo、RKO细胞迁移和侵袭数均显著低于siRNA-对照序列组(P<0.01)。结论PVT1在CRC组织中呈高表达,且与肿瘤的恶性程度有关,沉默LoVo、RKO细胞中PVT1可有效抑制细胞增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。

补体激活通路基因遗传变异与非小细胞肺癌患者生存的相关性及其分子机制探讨

目的:分析补体激活通路基因遗传变异与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者生存的相关性及其潜在的分子机制。方法:对连续招募的1531例NSCLC患者进行随机分组,分为发现集和验证集;收集所有患者的随访信息和临床资料,并进行全基因组关联芯片扫描;通过全基因组基因型填补,系统分析补体激活通路基因集的遗传变异与NSCLC患者总生存期(overall survival,OS)之间的相关性。采用多因素Cox回归和多重检验在发现集中评估74个基因上的3661个单核苷酸多态性位点(single-nucleotide polymorphisms,SNPs)与NSCLC患者生存的关联,通过多重检验的显著性SNPs在验证集中进行进一步验证,并对显著性关联位点和易感基因进行生物学功能预测。结果:识别出C6基因上9个具有连锁不平衡关联(r^(2)>0.6)的SNPs与NSCLC患者生存显著相关,其中P值最小的位点rs10512781可能对C6基因表达水平具有调控功能,C6基因表达在正常肺组织中较肺癌组织显著上调,且与更优的NSCLC患者预后和更高的免疫细胞浸润水平相关;进一步利用Lasso回归筛选得到8个影响患者生存的独立因素,构建的Cox预测模型对患者生存率具有良好的预测价值。结论:补体激活通路基因集中遗传变异rs10512781可能通过调控C6基因表达,从而影响NSCLC患者的生存,该研究为寻找预测肺癌生存的潜在生物标志物和易感基因提供了一定的依据。

LncRNA PVT1在非小细胞肺癌中的表达及与铂类化疗敏感性的关系

目的研究长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)表达及与铂类化疗敏感性的关系。方法选择2012年1月-2015年6月焦作市人民医院收治的84例NSCLC患者病理活检或手术中肺癌及癌旁组织,采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测NSCLC及癌旁组织中lncRNA PVT1表达水平,KaplanMeier法分析其与患者5年生存率的关系,Cox分析影响患者不良预后的危险因素。结果 NSCLC组织中lncRNA PVT1表达水平显著高于癌旁组织[(7.35±1.26)vs.(1.02±0.14),P<0.05]。lncRNA PVT1表达水平与吸烟史、TNM分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。lncRNA PVT1高表达组患者顺铂治疗有效率(28.00%vs. 55.88%)及5年总生存率(28.00%vs. 58.82%)显著低于低表达组(P均<0.05)。铂类耐药、淋巴结转移、lncRNA PVT1高表达是影响NSCLC患者不良预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论 lncRNA PVT1在NSCLC组织中高表达,与患者铂类耐药、TNM分期、淋巴结转移及5年生存率有关,是影响NSCLC患者不良预后的危险因素。

晚期非小细胞肺癌EML4-ALK融合变异体与克唑替尼治疗的临床分析

目的探讨克唑替尼对间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性的晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和安全性,及与ALK变异体的相关性;分析克唑替尼的临床疗效和不良反应。方法收集皖南医学院弋矶山医院及南京军区南京总医院自2013年9月至2017年5月收治的68例ALK阳性晚期NSCLC患者,口服克唑替尼胶囊250 mg,2次/d。利用二代测序技术检测初治标本基因情况,探索ALK变异体与克唑替尼治疗的疗效。结果 68例患者的客观缓解率和疾病控制率分别为61.8%和85.3%,中位PFS和中位OS分别为10.5个月和33.9个月。根据二代测序结果,35例患者中变异体1最常见(42.9%),其次是变异体2(20.0%)。变异体1和非变异体1两组的中位PFS(10.7个月vs.9.8个月,P=0.647)和中位OS(27.33个月vs.22.40个月,P=0.831)没有统计学差异。患者的不良反应最常见是视觉影响和消化道反应,多数为Ⅰ~Ⅱ度。结论 ALK阳性的晚期NSCLC患者接受克唑替尼治疗具有较好的疗效且不良反应多可耐受。ALK阳性不同变异体之间与克唑替尼的疗效没有明显的生存差异。