知母中一个新皂甙的分离和结构鉴定

知母(Anemarrhena asphodeloides Bge)具有清热除烦,泻肺滋阴等功能。已从中分离出多种皂甙,主要有知母皂甙(timosapognin)A1,A2,A3和B1,B2,其中以知母皂甙A3含量为最多。我们从陕西产知母用常规方法分离到两个化合物晶Ⅰ和晶Ⅱ(见图1)。晶Ⅰ为白色针晶,mp 174～6℃,[α]_D^(12)-3.9℃,高分辨质谱得出分子式为C_(27)H_(44)O_3。

ERK/CREB信号通路在异菝葜皂苷元促进Aβ损伤SH-SY5Y细胞BDNF表达中的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶/c AMP反应元件结合蛋白(ERK/CREB)信号通路在异菝葜皂苷元(SMI)促进β-淀粉样肽(Aβ)损伤SH-SY5Y细胞脑源性神经营养因子(BDNF)表达中的作用及其机制。方法建立Aβ损伤SH-SY5Y细胞模型,采用RT-PCR法检测BDNF m RNA的表达,用Western blotting的方法检测p CREB和p ERK的变化,最后通过阻断实验确认ERK/CREB信号通路在SMI促进BDNF m RNA表达中的作用。结果 SMI能促进Aβ损伤SH-SY5Y细胞BDNF m RNA的表达(P=0.000),并能上调信号分子CREB和ERK1/2的磷酸化水平(P=0.001,P=0.000)。用RNA干扰的方法阻断CREB的表达后,SMI促进BDNF m RNA表达的作用完全消失;用U0126阻断ERK1/2磷酸化后,SMI促进p CREB水平升高的作用完全消失。结论 SMI通过ERK/CREB通路促进Aβ损伤SH-SY5Y细胞BDNF m RNA的表达。

异菝葜皂苷元对H_2O_2氧化损伤SH-SY5Y细胞的保护作用及其分子机制

目的观察异菝葜皂苷元(SMI)对氧化应激损伤人神经母细胞瘤株(SH-SY5Y)细胞的保护作用,并初步探讨其分子机制。方法将SH-SY5Y细胞用不同浓度(0.01、0.1、1μmol/L)SMI或等体积DMSO预处理24 h,然后加入600μmol/L过氧化氢(H2O2)处理。显微镜下观察SH-SY5Y细胞形态学变化,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,流式细胞仪检测胞内活性氧(ROS)水平,Western blotting检测p-Akt/Akt和HSP70的表达,并检测PI3K抑制剂LY294002对HSP70表达的影响。结果 SMI预处理浓度依赖地改善H2O2损伤SH-SY5Y细胞的形态,提高损伤细胞存活率,其中0.1、1μmol/L SMI预处理细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.001)。1μmol/L SMI显著抑制H2O2诱导的ROS升高(P<0.05)。H2O2诱导p-Akt/Akt和HSP70表达,但SMI预处理进一步提高p-Akt/Akt和HSP70表达水平(P<0.01,P<0.05),且PI3K抑制剂能阻断HSP70表达的升高(P<0.001)。结论 SMI对H2O2诱导的氧化应激损伤SH-SY5Y细胞具有明显的保护作用,其作用机制可能与降低胞内ROS水平及高度激活PI3K/Akt/HSP70信号通路有关。

抗老年痴呆药物拨葜配基化合物研究进展

对抗老年痴呆药物拨葜配基化合物的提取与分离及半合成研究进行了归纳介绍,并简要评价各工艺的特点。

异菝葜皂苷元对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响

目的:探讨菝葜皂苷元对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响及机制。方法:采用MPP+处理人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞构建体外PD细胞模型。取对数生长期的SH-SY5Y细胞分为四组:Control组(正常对照组),MPP+组(模型组),异菝葜皂苷元组(10μM),MPP++异菝葜皂苷元组(3 m M,10μM)。首先采用细胞增殖实验(CCK-8)检测异菝葜皂苷元作用的最佳浓度及对SH-SY5Y细胞活力的影响。采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测异菝葜皂苷元对SH-SY5Y细胞凋亡率的影响,采用蛋白免疫印迹实验检测凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的蛋白表达。结果:细胞活力实验确定10μM/m L的异菝葜皂苷元作为后续试验的添加浓度。与对照组相比,MPP+组细胞活力显著降低(P<0.001),细胞凋亡率显著升高(P<0.001),凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2表达显著升高(P<0.01)。相较于MPP+组,MPP++异菝葜皂苷元组细胞活力显著升高(P<0.001),细胞凋亡率显著降低(P<0.01),凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2表达显著升高降低(P<0.01)。结论:异菝葜皂苷元可以抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,可能与其调节抗凋亡相关蛋白Bax,Bcl-2的蛋白表达有关。