松郁安神方通过海马NLRP3炎性小体通路改善慢性睡眠剥夺大鼠学习记忆能力的研究

目的探讨松郁安神方(甘松、郁金、丹参、酸枣仁等)通过海马NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体通路改善慢性睡眠剥夺大鼠学习记忆能力的作用及机制。方法将SD大鼠随机分成正常组(8只)、大平台组(8只)、睡眠剥夺组(32只),采用改良多平台水环境法复制慢性睡眠剥夺大鼠模型,连续剥夺21 d。模型复制成功后,将睡眠剥夺组大鼠随机分为模型组及松郁安神方高、中、低剂量组(34、17、8.5 g·kg^(-1)),每组8只;灌胃给药,每天1次,连续7 d。造模及给药期间观察记录大鼠一般状态及体质量变化;造模第21天和给药后第7天均采用Morris水迷宫法(进行定位航行和空间搜索试验)测定大鼠学习记忆能力;末次水迷宫测试结束后,采用ELISA法检测海马组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18含量;Western Blot法检测海马组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达水平。结果(1)正常组和大平台组比较,所有检测指标均无明显变化(P>0.05)。(2)与大平台组比较,造模期间睡眠剥夺组大鼠体质量增加缓慢(P<0.01);21 d睡眠剥夺后,睡眠剥夺组大鼠的逃避潜伏期显著延长(P<0.01),到达平台的总距离显著增加(P<0.01),穿越平台的次数及目标象限停留时间显著减少(P<0.05,P<0.01);模型组大鼠海马组织中IL-1β、IL-18含量明显升高(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达均明显上调(P<0.05)。(3)与模型组比较,松郁安神方高、中剂量组大鼠的体质量增加量均显著升高(P<0.01);逃避潜伏期及到达平台的总距离明显缩短(P<0.05),穿越平台的次数及目标象限停留时间显著增加(P<0.05,P<0.01);海马组织中IL-1β、IL-18含量均显著下降(P<0.05,P<0.01),NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达均显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论松郁安神方可能通过抑制NLRP3炎性小体通路调控促炎性细胞因子IL-1β、IL-18的分泌,从而改善睡眠剥夺大鼠的学习记忆能力。

松郁安神方联合阿普唑仑对失眠大鼠基底核多巴胺受体和γ-氨基丁酸受体的影响

目的:观察松郁安神方联合阿普唑仑对失眠大鼠睡眠状态及基底核多巴胺受体和γ-氨基丁酸(GABA)受体的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠分为对照组(8只)和造模组40只,造模组采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、阿普唑仑低剂量组(0.04 mg/kg)、阿普唑仑高剂量组(0.08 mg/kg)、松郁安神方组(17 g/kg)及松郁安神方联合阿普唑仑低剂量组,每组8只,灌胃相应药物,对照组和模型组灌胃等容积生理盐水,1次/d,连续7 d。期间观察各组大鼠一般生理状态。实验结束后,通过Western blotting检测大鼠基底核多巴胺受体和GABA受体蛋白的表达情况。结果:松郁安神方联合阿普唑仑低剂量组大鼠饮食、睡眠等生理活动接近对照组,毛色有光泽,体质量较阿普唑仑高剂量组显著增加(P<0.01),且基底核GABA_(A)受体蛋白表达量显著高于阿普唑仑低、高剂量组(P<0.01),多巴胺D_(2)受体(D_(2)DR)蛋白表达量显著低于阿普唑仑低、高剂量组(P<0.01)。结论:松郁安神方能够通过降低阿普唑仑对失眠大鼠的使用剂量,增强阿普唑仑的镇静催眠作用,并降低其不良反应。松郁安神方能够增强阿普唑仑对失眠大鼠基底核GABA_(A)受体蛋白的上调作用和对D_(2)DR蛋白表达的抑制作用,其机制可能与调控失眠大鼠基底核多巴胺受体和GABA受体信号通路相关。

针刺合松郁安神方治疗肝郁化火型不寐40例疗效观察

目的观察针刺申脉、照海合松郁安神方治疗肝郁化火型不寐的疗效。方法选择肝郁化火型不寐患者120例,随机分为针刺组、中药组、针药结合组各40例,采用自身对照方法观察治疗前后阿森斯睡眠量表(Athens)的变化。结果治疗4周后,Athens睡眠量表评分和不寐疗效判定提示针药组疗效优于中药组和针刺组。结论针刺申脉、照海穴合松郁安神方治疗肝郁化火型不寐疗效确切。

针刺申脉、照海联合松郁安神方治疗单纯性失眠随机平行对照研究

[目的]观察针刺申脉、照海联合松郁安神方治疗单纯性失眠疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将90例门诊患者按就诊顺序编号随机分为三组。中药组30例松郁安神方(甘松10g,郁金15g,玫瑰花10g,生龙骨先煎、珍珠母先煎、夜交藤各30g,丹参、酸枣仁各15g,龙胆草、琥珀冲服、薄荷各6g),1剂/d,水煎分2次服。针灸组30例针刺申脉、照海(患者坐位/仰卧位针灸针沿皮直刺穴位至10mm),出现酸麻胀重得气感后每10min行针一次,留针30min。针药组30例针刺申脉、照海+松郁安神方。连续治疗28d为1疗程。观测临床症状、多导睡眠监测睡眠进程、睡眠结构、阿森斯失眠量表评分;不良反应。连续治疗1疗程,判定疗效。[结果]睡眠进程和睡眠结构各项数据均有改善(P<0.05),三组治疗组与正常组无显著差异(P>0.05),睡眠进程及睡眠结构各项数据经过多重比较,提示在改善入睡时间、觉醒次数、觉醒时间,缩短浅睡眠,提升深睡眠方面,针药组优于中药组及针刺组(P<0.05)。[结论]针刺申脉、照海联合松郁安神方治疗单纯性失眠疗效满意,值得推广。

松郁安神方对异相睡眠剥夺大鼠海马CREB表达的影响

目的观察松郁安神方对异相睡眠剥夺(PSD)大鼠海马环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)的影响。方法采用改良多平台睡眠剥夺法建立PSD大鼠模型,连续7 d用松郁安神方进行灌胃。RT-PCR和蛋白印迹法检测对照组、PSD模型组、中药高、低剂量组大鼠海马CREB m RNA和蛋白表达的情况。结果与对照组比较,PSD模型组大鼠海马CREB m RNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01),不同剂量松郁安神方干预后,中药高剂量组CREB m RNA及蛋白表达明显升高(P<0.01),中药低剂量组CREB m RNA表达升高(P<0.05),蛋白表达也明显升高(P<0.01)。结论松郁安神方改善PSD大鼠学习记忆能力的机制可能与调节海马CREB的表达有关。

松郁安神方对对氯苯丙氨酸致失眠大鼠血浆中前列腺素D2的影响

目的:观察松郁安神方对对氯苯丙氨酸(Para-chlorophenylalanine,PCPA)致失眠模型大鼠血浆中内源性睡眠促进物质前列腺素D2(Prostaglandin D2,PGD2)的影响.方法:采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立失眠大鼠模型,用高、中、低剂量松郁安神方进行治疗,通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血浆中前列腺素D2(PGD2)的含量.结果:中、高剂量松郁安神方可提高PCPA失眠模型大鼠血浆中PGD2含量(P<0.05或P<0.01).结论:松郁安神方改善睡眠的机制之一可能是通过调节内源性睡眠促进物质PGD2发挥作用.

松郁安神方通过cAMP/CREB信号通路改善失眠大鼠睡眠的研究

目的 探讨松郁安神方(甘松、郁金、玫瑰花等)通过环磷酸腺苷(cAMP)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路改善失眠大鼠睡眠的作用机制。方法 将大鼠随机分为对照组、模型组及松郁安神方低、高剂量组。除对照组外,其余3组采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)复制失眠模型。模型复制成功后,松郁安神方低、高剂量组分别给予8.5、17 g·kg^(-1)松郁安神方灌胃,每天1次,连续7 d。观察大鼠一般状态,动物睡眠生物解析系统记录大鼠脑电(EEG)和肌电(EMG),采用ELISA法检测下丘脑cAMP含量,实时荧光定量PCR和Western Blot法分别检测下丘脑CREB mRNA和p-CREB蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠白天时段非快速眼动(NREM)和快速眼动(REM)睡眠量均明显减少(P<0.01),觉醒量明显增加(P<0.01),下丘脑cAMP含量、CREB mRNA和p-CREB蛋白表达均明显降低(P<0.01)。松郁安神方治疗后,与模型组比较,松郁安神方低、高剂量组非快速眼动睡眠量均明显增加(P<0.05,P<0.01),觉醒量均明显减少(P<0.05,P<0.01),下丘脑c AMP含量、CREB mRNA和p-CREB蛋白表达均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论 松郁安神方可能通过下丘脑c AMP/CREB信号通路改善失眠大鼠睡眠。

松郁安神方对失眠大鼠基底核多巴胺和腺苷含量的影响

目的:观察松郁安神方对失眠大鼠基底核组织中神经递质多巴胺和腺苷的调节作用。方法:利用失眠大鼠模型,造模成功后分别给予阿普唑仑、松郁安神方(SYF)低剂量和高剂量用药1w。实验过程中观察大鼠的一般情况变化,治疗结束后通过酶联免疫吸附测定(Elisa)方法检测大鼠基底核组织中多巴胺(Dopamine,DA)和腺苷的含量。结果:SYF能够明显改善实验大鼠由失眠引起的症状,作用优于阿普唑仑。同对照组比较,模型组大鼠基底核组织中DA含量显著升高(P<0.01),腺苷含量显著降低(P<0.01)。同模型组比较,阿普唑仑组、SYF高剂量组和SYF低剂量组大鼠基底核组织中DA含量均显著下降(P<0.01),同时腺苷含量显著升高(P<0.01)。结论:SYF能够显著改善实验大鼠由失眠引起的症状,其机制可能与SYF抑制失眠大鼠基底核组织中DA的释放,增加腺苷的释放相关。

松郁安神方对PCPA致失眠大鼠睡眠时相的影响

目的:观察松郁安神方对失眠大鼠睡眠时相的影响。方法:采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(Para-chlorophenylalanine,PCPA)建立失眠大鼠模型,用松郁安神方进行干预,通过动物睡眠生物解析系统,记录脑电(Electroencephalogram,EEG)和肌电(Electromyogram,EMG),分析睡眠觉醒时间、非快速眼动睡眠(Non-rapid Eyemovement Sleep,NREM)时间和快速眼动睡眠(Rapid Eyemovement Sleep,REM)时间,观察大鼠睡眠时相变化。结果:PCPA可明显减少大鼠白天NREM、REM睡眠时间,增加觉醒时间,给予松郁安神方后,失眠大鼠白天时段NREM、REM睡眠时间增加,觉醒时间减少,与PCPA模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:松郁安神方能改善PCPA致失眠大鼠的睡眠,其主要通过增加白天的NREM和REM睡眠时间改善睡眠。

松郁安神方对失眠大鼠海马cAMP/PKA信号通路的影响

目的探讨松郁安神方对失眠大鼠海马5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)介导的环磷酸腺苷(cAMP)信号通路的影响,明确其作用靶点。方法50只SD大鼠,随机分为对照组、模型组、松郁安神方低剂量组、松郁安神方高剂量组和丁螺环酮组,每组10只。除对照组外,其余4组采用慢性夹尾刺激和腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)建立肝郁失眠大鼠模型。造模成功后,除正常组和模型组外,松郁安神方低剂量组(8.5 g/kg)、松郁安神方高剂量组(17 g/kg)和丁螺环酮组(2.0 mg/kg)按相应剂量灌胃,1次/d,连续14 d。模型组和对照组以等量生理盐水灌胃,频次、时间同前。给药期间,观察大鼠一般状态;给药结束后,观察大鼠体质量、敞箱实验变化,检测各组5-HT1AR及cAMP、蛋白激酶A(PKA)基因和蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠敞箱实验中央格停留时间、修饰次数、大便颗粒数上升(P<0.05),海马5-HT1AR、cAMP、PKA mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05)。不同剂量松郁安神方干预后,和模型组相比,松郁安神方高剂量组敞箱实验中央格停留时间、修饰次数、粪便颗粒数均减少,5-HT1AR、cAMP、PKA mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05);松郁安神方低剂量组敞箱实验中央格停留时间、修饰次数、粪便颗粒数减少,5-HT1AR、PKA和cAMP mRNA及蛋白表达上调(P<0.05);高剂量组各项指标与丁螺环酮组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论松郁安神方改善肝郁失眠大鼠睡眠的机制可能是通过海马5-HT1AR介导的cAMP信号通路发挥作用。

松郁安神方对不同中医证型失眠患者血浆中5-羟色胺及多巴胺水平的影响

目的观察松郁安神方对肝郁化火及阴虚火旺证单纯性失眠患者血浆中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)的影响,探讨其治疗失眠的可能作用机制。方法 60例单纯性失眠患者中肝郁化火和阴虚火旺患者各30例,均予松郁安神方治疗8周。两组患者治疗前后进行阿森斯失眠量表(Athens)评定及测定血浆5-HT和DA含量。结果两组患者治疗后Athens评分与本组治疗前比较,均有统计学差异(P<0.05)。两组患者治疗后5-HT水平较治疗前明显升高(P<0.05或P<0.01),DA水平较治疗前明显降低(P<0.05)。结论松郁安神方对肝郁化火证和阴虚火旺证失眠患者疗效确切,可能是升高5-HT含量及降低DA含量而起到改善睡眠的作用。

松郁安神方镇静催眠作用及对失眠模型大鼠前列腺素D2的影响

目的:运用疏肝安神法构建组方松郁安神方,观察松郁安神方镇静催眠作用及其对对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠模型大鼠下丘脑内源性睡眠促进物质前列腺素D2(PGD2)的影响。方法:采用腹腔注射PCPA,建立失眠大鼠模型,用高、中、低剂量松郁安神方进行治疗,观察大鼠的一般状态及戊巴比妥钠诱导的入睡潜伏期、睡眠时间,采用酶联免疫吸附法测定大鼠下丘脑PGD2的含量。结果:与PCPA失眠组比较,中、高剂量松郁安神方可改善失眠大鼠一般状态,缩短大鼠入睡潜伏期(P<0.05)、延长睡眠时间(P<0.01),并提高失眠模型大鼠下丘脑PGD2含量(P<0.05)。结论:松郁安神方具有镇静催眠作用,能改善失眠模型大鼠的睡眠,缩短入睡潜伏期、延长睡眠时间,其机制可能与调节下丘脑内源性睡眠促进物质PGD2含量有关。

疏肝解郁安神法治疗神经症经验

神经症是一种临床常见的功能性疾病,在临床中可以表现为各个系统的功能异常,同时患者常伴精神心理障碍,因此症状具有复杂矛盾,变化不定的特点,给辨证论治带来一定难度。临床实践发现神经症虽然表现不一,但病机不离"肝郁气滞,心神不宁"。故治疗时应遵循治病求本的原则,在根据患者的病证进行辨证论治的同时,着重运用"疏肝解郁安神"的治法。采用松郁安神方加减,以达到疏肝理气,养心安神的效果,可明显改善患者症状,提高治愈率。