东方百合‘Sorbonne’原生质体培养初步研究

百合原生质体培养对百合远源杂交育种具有重要意义。本研究以东方百合‘Sorbonne’花托为外植体，诱导胚性愈伤组织，并对其原生质体提取和培养进行初步研究。结果表明：MS＋Picloram 3mg／L为胚性愈伤组织诱导最佳培养基；胚性愈伤组织在酶解液为2％纤维素酶R-10＋0．5％离析酶R-10＋0．05％果胶酶Y23＋147mg／L二水合氯化钙＋976mg／L2-吗啉乙磺酸＋0．6mol／L甘露醇，酶解12h，制备的原生质体产量最高达4×10^5个／mL，活性达52％；在胚性愈伤组织诱导培养基中进行原生质体的悬滴培养、液体培养、固体培养、固液结合培养和看护培养。结果表明，看护培养是最佳培养方法，并在改良MS＋Picloram 2mgm的培养基中培养2～3d观察到长细胞壁的原生质体，培养4～6d，可见原生质体的第一次分裂，培养40-45d，观察到原生质体分化成的细胞团。

东方百合‘Sorbonne’鳞片离体培养研究

以东方百合品种‘Sorbonne’鳞片为外植体,研究不同因子对‘Sorbonne’消毒、诱导、增殖、生根等的影响。结果表明：‘Sorbonne’外层鳞片消毒最为困难,而中层和内层差异不大；最佳消毒方法是外层鳞片用75%酒精处理30 s再用0.1%升汞浸泡18～20 min；中层和内层鳞片用75%酒精处理30 s,再用0.1%升汞浸泡14～16 min,其中不同部位鳞片诱导率从高到低分别为外层跃中层跃内层,其中外层的诱导率为76.7%；百合鳞片最佳增殖培养基为MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,增殖系数为6.8；最佳生根培养基为1/2MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.2 mg/L,平均生根数为20条。