精子相关抗原9联合PSAD、fPSA/tPSA比值诊断PSA灰区前列腺癌的临床研究

目的:研究尿液中精子相关抗原9(SPAG9)含量联合血清中前列腺特异性抗原密度(PSAD)、游离前列腺特异性抗原(fPSA)/总PSA(tPSA)比值诊断PSA灰区前列腺癌的价值。方法:选择2018年1月—2022年12月期间在南通市第二人民医院门诊或住院收治的血清PSA水平处于灰区(4~10 ng/mL)的309例患者作为研究对象,根据前列腺穿刺术的病理结果分为前列腺癌组58例和前列腺良性组251例(对照组)。所有患者均在术前留取尿液并检测SPAG9含量,测定血清PSAD、fPSA、tPSA,计算fPSA/tPSA比值,比较两组间临床资料的差异,采用Logistic回归分析确定前列腺癌的相关因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线、计算曲线下面积(AUC)并分析各指标对前列腺癌的诊断价值。结果:前列腺癌组和对照组间患者的体质量、tPSA、白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、总胆红素、白蛋白、肌酐、尿酸、前列腺体积的差异均无统计学意义(P>0.05);前列腺癌组患者的年龄、尿液SPAG9含量、血清fPSA/tPSA比值、PSAD均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,尿液SPAG9含量、血清fPSA/tPSA比值、PSAD是前列腺癌的影响因素;ROC曲线分析显示,尿液SPAG9含量、血清fPSA/tPSA比值、PSAD单独及联合均能诊断前列腺癌,3项指标联合的诊断效能理想,灵敏度和特异度分别为80.00%和80.88%。结论:尿液SPAG9可作为诊断PSA灰区前列腺癌的标志物,尿液SPAG9与血清fPSA/tPSA比值、PSAD联合检测对PSA灰区前列腺癌具有较好的诊断效能。

外阴病变组织中精子相关抗原-9的表达及意义

目的:研究外阴鳞状上皮内瘤变(VIN)和外阴鳞状细胞癌组织中精子相关抗原-9(SPAG9)的表达及其潜在的临床意义。方法:应用免疫组织化学技术检测16例VIN、41例侵袭性外阴鳞状细胞癌和10例正常外阴皮肤组织中SPAG9蛋白的表达。结果:SPAG9蛋白在VIN及侵袭性外阴鳞状细胞癌中的表达率均为100%,在正常外阴皮肤中表达率为0;根据H-score分值比较:SPAG9蛋白在外阴鳞状细胞癌组织中的表达高于VIN组织,G2～G3肿瘤组织中SPAG9蛋白表达高于G1者,有淋巴结转移者肿瘤组织内SPAG9蛋白的表达高于无淋巴结转移者,差异均有统计学意义(P<0.05);外阴鳞状细胞癌Ⅱ～Ⅲ期患者肿瘤组织中SPAG9蛋白的表达高于Ⅰ期,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:SPAG9蛋白可能在外阴癌的发生和发展发挥重要作用,有望成为外阴癌早期诊断和预后评估的生物学标记物。

血清微小RNA-424联合血清人胎球蛋白A抗体、精子相关抗原9抗体诊断乳腺癌的价值

目的探讨血清微小RNA-424(miRNA-424)联合血清人胎球蛋白A(AHSG)抗体、精子相关抗原9(SPAG9)抗体诊断乳腺癌的价值。方法将58例乳腺癌患者作为乳腺癌组,55例乳腺纤维腺瘤患者为良性疾病组,51例健康女性为健康对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miRNA-424相对表达水平,采用酶联免疫吸附试验检测各组血清AHSG抗体、SPAG9抗体水平。比较三组受试者血清miRNA-424相对表达水平、AHSG抗体、SPAG9抗体水平,分析三者与乳腺癌临床分期的关系,以及三者单独及联合检测诊断乳腺癌的效能。结果(1)健康对照组、良性疾病组、乳腺癌组的血清miRNA-424相对表达水平依次降低,血清AHSG抗体、SPAG9抗体水平依次升高(均P<0.05)。(2)乳腺癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者的血清miRNA-424相对表达水平依次降低,血清AHSG抗体、SPAG9抗体水平依次升高(均P<0.05)。(3)血清miRNA-424、AHSG抗体、SPAG9抗体水平三者联合检测诊断乳腺癌的受试者工作特征曲线下面积为0.927,高于血清miRNA-424水平单独检测(P<0.05),且三者联合诊断的准确度高于AHSG抗体单独检测(P<0.05)。结论乳腺癌患者血清miRNA-424相对表达水平下降、AHSG抗体和SPAG9抗体水平升高,且临床分期越高者miRNA-424相对表达水平越低、AHSG抗体和SPAG9抗体水平越高,三者联合检测诊断乳腺癌的效能较高,或可用于乳腺癌的早期诊断。

过表达精子相关抗原9对前列腺癌细胞PC3生物学行为的影响

目的研究精子相关抗原9(sperm-associated antigen 9,SPAG9)对前列腺癌细胞增殖、细胞周期、侵袭转移等生物学行为的影响,探讨可能的分子机制。方法前列腺细胞PC3中转染SPAG9后,qRT-PCR和Western blot检测转染后细胞SPAG9的表达变化;CCK-8检测SPAG9对PC3细胞增殖的影响;流式细胞术检测SPAG9对PC3细胞周期的作用;Transwell实验检测转染SPAG9对PC3细胞体外迁移能力的影响。结果 qRT-PCR检测结果表明SPAG9组的SPAG9的相对表达量(20.776 3±3.080 9)明显高于对照组(1.010 2±0.178 4)(P<0.01)。Western blot结果显示在前列腺癌细胞PC3中过表达SPAG9后成功。CCK-8实验表明SPAG9促进细胞增殖;流式细胞术检测结果表明过表达SPAG9使PC3细胞周期加快;在Transwell迁移实验中,SPAG9转染细胞后,SPAG9组穿膜细胞数为(88.078±4.509)/视野,对照组穿膜细胞数为(54.333±4.582)/视野,SPAG9组细胞迁移能力明显高于对照组(P<0.05)。结论 SPAG9促进前列腺癌细胞PC3的增殖、细胞周期及侵袭转移等生物学行为,并可能通过ERK和JNK信号通路发挥这些作用。

宫颈上皮内瘤变中精子相关抗原9的表达及意义

目的：探讨精子相关抗原9（SPAG9）在各级别子宫颈上皮内瘤变（CIN）中的表达情况及其诊断价值。方法：收集广东省妇幼保健院病理科2011年12月～2013年6月病理诊断为CIN的宫颈上皮活检或手术标本，应用免疫组织化学两步法检测正常宫颈（20例）、CINI（30例）、CINII（34例）、CINⅢ（26例）宫颈上皮组织标本中SPAG9蛋白的表达。结果：@SPAG9蛋白在CINI～Ⅲ各组中的阳性表达率（91．18％～93．33％）均高于正常宫颈组（P均〈0．01），CINI、CINII及CINII组间蛋白阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05）。②SPAG9免疫反应评分，CINII组织中SPAG9蛋白的表达评分高于CINⅡ组织（P〈0．05），后者的表达评分又高于CINI组织（P〈0．05）。结论：SPAG9蛋白在CIN各级组织中均呈高表达，且表达强度与CIN的组织学分级相关，SPAG9蛋白可以作为宫颈上皮内瘤变的诊断标记物。

精子相关抗原9在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨精子相关抗原9(sperm-associated antigen9,SPAG9)在膀胱移行细胞癌(bladdertransitional cell carcinoma,BTCC)中的表达并分析其临床意义。方法:选取经临床病理诊断的BTCC标本98例,正常膀胱组织30例,应用免疫组化染色方法检测SPAG9在BTCC中的表达和分布情况,分析其与肿瘤的临床分期、病理分级及2年复发率的关系。结果:SPAG9在正常膀胱组织中为阴性表达,而在BTCC组中的阳性表达率为75.5%(74/98),并且随着肿瘤分期和分级的升高SPAG9蛋白的表达增加,SPAG9阳性表达率在病理分级G1、G2与G3级之间的差异有统计学意义(P<0.05);在临床分期Ta与T1组间的差异有统计学意义(<0.05);SPAG9蛋白表达阳性的非肌层浸润性膀胱癌患者,其2年复发率显著高于阴性表达者(P<0.05)。结论:SPAG9蛋白在BTCC中呈高表达状态,可成为BTCC有意义的肿瘤标志物,并有可能作为判断BTCC侵袭力、监测复发的重要指标。阻断SPAG9表达有望成为膀胱癌靶向治疗的新靶点。

米非司酮对体外培养绒毛组织SPAG9表达的影响

孕早期的绒毛组织体外分为两组培养:米非司酮干预组和对照组。应用免疫组化、Western blot和RT-PCR检测两组绒毛SPAG9的表达。结果显示,米非司酮干预组SPAG9的表达与对照组相比显著减弱(P<0.05)。提示米非司酮可抑制早孕绒毛组织SPAG9的表达,其可能通过此机制发挥抗肿瘤的作用。

精子相关抗原9B细胞及T细胞表位富集区预测

目的:预测人精子相关抗原9(SPAG-9)的表位富集区。方法:以SPAG-9的全长序列为基础,利用生物信息学软件,采用Hopp&Woods的亲水性方案、Zimmerman极性参数和Jameson-Wolf抗原指数方案和Emini表面可及性方案,并结合SPAG-9的二级结构与其柔性区域及跨膜区域对SPAG-9的优势B表位进行综合分析,进一步运用抗原指数分析预测SPAG-9的B细胞表位。同时,分别应用SYFPEITHI、NetCTL以及IEDB预测HLA-A2、HLA-A24限制的CTL表位。最后,综合B细胞表位和CTL表位,预测SPAG-9的表位富集区。结果:经综合分析,SPAG-9的B细胞优势表位可能存在于N端的197-201,236-243,249-253,291-299,306-312,324-327,332-337,348-352,488-494,539-542,546-550,565-573,699-702,802-807,869-873,875-880,882-887,1 173-1 178,1 195-1 200区段。其HLA-A2限制的CTL表位肽为19-27,49-57,50-58,56-64,343-351,381-389,413-421,447-455,521-529,551-559,665-673,733-741,837-845,926-934,950-958,964-972,998-1 006,1 016-1 024,1 094-1 102,1 140-1 148,1 150-1 158区段,HLA-A24限制的CTL表位肽为31-39,137-145,517-525,943-951。综合B表位与CTL表位,SPAG-9的332-352与551-573区段,即SAENEEKSEVQAIIESTPELD、SIWQFFSRLFSSSSNTTKKPEPP肽段是SPAG-9的表位富集区。结论:利用生物信息学预测发现SPAG-9抗原的332-352与551-573为SPAG-9的表位富集区。

血清SPAG9抗体诊断乳腺良恶性病变患者的价值分析

目的:探讨血清精子相关抗原9(SPAG9)抗体诊断乳腺良恶性病变的价值。方法:回顾性分析乳腺病变患者76例的临床资料。将乳腺癌患者44例作为研究组,将乳腺良性疾病患者32例作为对照组。比较两组血清SPAG9抗体表达情况。结果:研究组血清SPAG9抗体阳性率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清SPAG9抗体诊断乳腺癌的敏感度61.36%,特异度81.25%,准确度69.74%,阳性预测值81.82%,阴性预测值60.47%。随乳腺癌病理分级、TNM分期升高,血清SPAG9抗体水平呈上升趋势(P<0.05)。结论:血清SPAG9抗体在乳腺良恶性病变诊断过程中有较高的准确度、灵敏度、特异度,且可反映乳腺癌严重程度。

荷载SPAG9基因shRNA的溶瘤腺病毒对前列腺癌细胞增殖及侵袭作用的影响

目的研究荷载精子相关抗原9（sperm associated antigen 9，SPAG9）基因shRNA的溶瘤腺病毒对人前列腺癌细胞株PC-3和DU145增殖及侵袭作用的影响，并初步探讨其作用机制。方法采用同源重组法构建溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9，采用PCR法进行鉴定。荧光显微镜观察病毒转染情况。CCK-8法检测溶瘤腺病毒对细胞增殖的作用。结晶紫法观察溶瘤腺病毒的细胞毒性。Transwell检测溶瘤腺病毒对细胞侵袭作用的影响。Western blot检测溶瘤腺病毒处理后PC-3和DU145细胞中SPAG9、E-cadherin、Vimentin和MMP-2蛋白的表达。结果溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9包装成功，在PC-3和DU145细胞转染情况良好。ZD55-SPAG9对前列腺癌细胞增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。随着病毒滴度的增加，ZD55-SPAG9对PC-3和DU145细胞的毒性逐渐增加。与PBS组和ZD55-EGFP组比较，ZD55-SPAG9组侵袭的PC-3和DU145细胞数目明显减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。与PBS组和ZD55-EGFP组比较，ZD55-SPAG9组PC-3和DUl45细胞中SPAG9、MMP-2、Vimentin蛋白表达量显著降低，E-cadherin蛋白表达升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论ZD55-SPAG9能够显著抑制人前列腺癌PC-3和DU145细胞的增殖和侵袭能力，其机制可能与上皮细胞间质化有关。

荷载精子相关抗原9基因短发卡RNA的溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9联合放疗对前列腺癌LNCaP细胞的治疗作用

目的观察荷载精子相关抗原9(SPAG9)基因短发卡RNA(shRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-SPAG9联合放疗对前列腺癌LNCaP细胞的治疗作用并初步探讨其机制。方法将前列腺癌LNCaP细胞分为4组,分别为磷酸盐对照组(PBS组)、放疗组(10 GY)、病毒组[ZD55-SPAG9,10感染复数(MOI)]、联合组(ZD55-SPAG9+放疗,5 MOI+5 GY);细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组LNCaP细胞增殖能力的变化;Hoechst-33258染色法检测各组细胞的凋亡;Transwell迁移及侵袭实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞SPAG9蛋白、凋亡相关蛋白及侵袭相关蛋白的表达。两组间差异的比较采用独立样本t检验,多组间差异比较采用One-way ANOVA分析。结果CCK-8结果显示,联合组LNCaP细胞的存活率为(46.02±2.20)%、病毒组为(56.83±2.40)%(t=12.855,P<0.01)、放疗组为(64.12±2.23)%(t=22.389,P<0.01)、PBS组为(99.63±2.72)%(t=59.407,P<0.01),各治疗组的细胞存活率均低于PBS组,差异有统计学意义(F=1407.384,P<0.01),联合组与单一治疗组比较,LNCaP细胞的存活率更低。Hoechst-33258染色实验结果显示,联合组LNCaP细胞的凋亡率为(55.80±1.49)%、病毒组为(36.42±1.78)%(t=-32.295,P<0.01)、放疗组为(30.01±1.80)%(t=-42.814,P<0.01)、PBS组为(9.30±1.53)%(t=-84.343,P<0.01),各治疗组的细胞凋亡率均高于PBS组,差异有统计学意义(F=2010.396,P<0.01),联合组与单一治疗组比较,LNCaP细胞的凋亡更加明显。Transwell迁移和侵袭实验结果显示,(1)迁移实验:联合组迁移细胞数为(102.60±16.03)个、病毒组为(163.67±11.00)个(t=12.166,P<0.01)、放疗组为(206.47±17.05)个(t=17.192,P<0.01)、PBS组为(304.73±17.16)个(t=33.345,P<0.01),各治疗组迁移细胞数均少于PBS组,差异有统计学意义(F=450.498,P<0.01),联合组迁移细胞数明显少于单一治疗组;(2)侵袭实验:联合组侵袭细胞数为(90.93±13.91)个、病毒组为(145.33±15.31)个(t=10.184,P<0.01)、放疗组为(191.33±13.32)个(t=20.187,P<0.01)、PBS组为(295.47±19.00)个(t=33.645,P<0.01),各治疗组侵袭细胞数均少于PBS组,差异有统计学意义(F=467.586,P<0.01),联合组侵袭细胞数明显少于单一治疗组。Western blot实验结果显示,联合组、病毒组、放疗组、PBS组内,SPAG9蛋白相对表达量分别为0.41±0.07、0.81±0.13、1.41±0.17、1.98±0.10,各治疗组SPAG9的相对表达量均低于PBS组,差异有统计学意义(F=98.785,P<0.01),联合组内SPAG9表达明显低于单一治疗组,差异有统计学意义(t=4.868、9.603,P<0.01);凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-8在联合组、病毒组、放疗组、PBS组内相对表达量分别为1.51±0.11、1.26±0.05、1.11±0.07、0.64±0.10,各治疗组内Caspase-8的表达高于PBS组,差异有统计学意义(F=56.728,P<0.01),与单一治疗组比较,联合组内Caspase-8的上调更加显著,差异有统计学意义(t=-3.713、-5.499,P<0.05);侵袭相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)在联合组、病毒组、放疗组、PBS组内相对表达量分别为(1.44±0.05、0.26±0.06)、(1.23±0.05、0.56±0.01)、(0.91±0.06、0.79±0.07)、(0.25±0.04、1.21±0.07),各治疗组内E-cadherin表达高于PBS组,Vimentin表达低于PBS组,差异有统计学意义(F=287.276、138.020,P<0.01),与单一治疗组比较,联合组内E-cadherin的上调和Vimentin的下调更加显著,差异有统计学意义(t=-5.017、8.386,P<0.01;t=-10.982、10.034,P<0.01)。结论ZD55-SPAG9联合放疗可以显著抑制LNCaP细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进其凋亡,效果优于单一治疗;机制可能是上调Caspase-8诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的上皮-间充质转化进程有关。

沉默精子相关抗原9基因对裸鼠前列腺癌PC-3细胞移植瘤的抑制作用

目的观察沉默精子相关抗原9基因（SPAG9）对裸鼠前列腺癌PC-3细胞移植瘤的抑制作用。方法利用Lipofectamine^TM2000将pGPU61绿色荧光蛋白（GFP）／Neo—SPAG9、pGPU6／GFP／Neo转染至人前列腺癌PC-3细胞。取浓度为2×10^10／L分别转染pGPU6／GFP／Neo—SPAG9和pGPU6／GFP／Neo的PC-3和PC-3细胞悬液0．2ml分别注射至各组裸鼠左腋皮下，建立前列腺癌DU-145荷瘤鼠模型，共3组，每组6只。每隔4d测量皮下移植瘤体积，绘制瘤体生长曲线。苏木素-伊红（HE）染色观察肿瘤生长。原位缺口末端标记法（TUNEL）检测移植瘤凋亡。免疫组织化学法检测各组瘤体E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、基质金属蛋白酶（MMP）-2和血管内皮生长因子（VEGF）表达。结果第27天时处死裸鼠后，转染pGPU6／GFWNeo-SPAG9组移植瘤体积为（397．9±53．1）mm^3，显著小于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）；HE染色表明：pGPU6／GFP／Neo-SPAG9组的PC-3细胞生长抑制。TUNEL结果显示，转染pGPU6／GFP／Neo-SPAG9组平均凋亡率为（67．6±6．2）％，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；免疫组织化学法显示，Yimentin、MMP-2、E-cadherin在转染pGPU6／GFP／Neo-SPAG9组的平均值分别为75．87±6．89、74．97±8．12、306．13±21．87，与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。pGPU6／GFP／Neo—SPAG9组VEGF表达量为91．49±5．29，与pGPU6／GFP／Neo组及对照组比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论沉默SPAG9可抑制前列腺癌的生长，促进其凋亡，同时减少血管的生成并降低侵袭相关蛋白的异常表达。

特异沉默精子相关抗原9基因对前列腺癌PC-3细胞的影响

目的 通过RNA干扰技术，特异沉默精子相关抗原9（SPAG9）基因的表达，观察其对前列腺癌PC-3细胞的影响，并探讨其机制。方法 构建SPAG9基因特异性短发卡RNA（shRNA）表达载体pGPU6-绿色荧光蛋白（GFP）-SPAG9，用Lipofectamine 2000将pGPU6-GFP-SPAG9转染人前列腺癌PC-3细胞，以空质粒pGPU6-GFP及未转染的细胞作对照。转染后48 h，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测SPAG9 mRNA表达，Western blot检测SPAG9蛋白表达；细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞的增殖；流式细胞术检测细胞凋亡；Transwell实验检测细胞侵袭能力；Western blot检测特异沉默SPAG9后PC-3细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、血管内皮生长因子（VEGF）、波形蛋白（Vimentin）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达，进一步分析特异沉默SPAG9基因对前列腺癌PC-3影响的可能机制。结果 酶切及测序结果表明质粒pGPU6-GFP-SPAG9构建成功。转染pGPU6-GFP-SPAG9 48 h后，PC-3细胞SPAG9 mRNA、蛋白表达水平分别为1.96±0.16和0.39±0.05，显著低于空载体组（3.23±0.18和1.13±0.04）及空白对照组（3.08±0.12和1.25±0.05），与空白对照组、空载体转染组比较，差异有统计学意义（P＝0.000）；CCK-8结果表明：转染48 h后，pGPU6-GFP-SPAG9组细胞吸光度（A）值为31.9±2.6，与空白对照组（48.1±2.8，P＝0.016）、空质粒组（47.8±2.8，P＝0.023）比较，差异有统计学意义；凋亡结果示：pGPU6-GFP-SPAG9组PC-3细胞凋亡率为（12.12±0.69）%，而空质粒组、空白对照组凋亡率分别为（6.43±0.31）%（P＝0.020）、（5.19±0.33）%（P＝0.014），与对照组比较，差异有统计学意义；Transwell侵袭实验结果显示，pGPU6-GFP-SPAG组侵袭细胞数为（91.01±5.5）个，而空白对照组与空质粒组侵袭细胞数分别为（165.3±6.6）个（P＝0.007）、（161.3±6.1）个（P＝0.009），与对照组比较，差异均有统计学意义。Western blot结果显示，与两对照组比较，pGPU6-GFP-SPAG9组PC-3细胞MMP-2、VEGF、Vimentin的表达下降，而E-cadherin表达上调，差异有统计学意义（P＝0.000）。 结论 通过RNA干扰技术，特异沉默SPAG9基因可抑制前列腺癌PC-3细胞增殖和侵袭并促进凋亡，其机制可能是通过下调MMP-2、VEGF、Vimentin的表达，上调E-cadherin表达。

前列腺癌中精子相关抗原9与上皮-间充质转化、细胞外基质异常相关分析

目的探讨精子相关抗原9（SPAG9）与上皮-间充质转化（EMT）、细胞外基质（ECM）相关蛋白在前列腺癌中的表达及相关性。方法应用免疫组织化学技术检测60例前列腺癌和30例前列腺增生组织中SPAG9、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达，并分析SPAG9与E-cadherin、Vimentin及MMP-2之间的相关性。结果在转移性前列腺癌、非转移性前列腺癌和前列腺增生组织中，SPAG9蛋白表达的平均吸光度（A）值为466.34±13.52、284.98±25.69和106.01±13.58，而E-cadherin蛋白在3组中表达的平均A值为148.62±28.31、286.73±18.73和417.73±12.90，组间比较差异均有统计学意义（P=0.000），Vimentin为285.79±15.85、184.20±21.31和79.56±7.96，组间比较差异均有统计学意义（P=0.000），MMP-2为269.97±15.74、175.82±21.81和87.86±17.61，组间比较差异均有统计学意义（P=0.000）；SPAG9、E-cadherin、Vimentin和MMP-2经Spearman等级相关分析，其相关系数为－0.431、0.443和0.610，P值分别为0.017、0.014和0.001，差异有统计学意义，说明SPAG9、E-cadherin、Vimentin和MMP-2在前列腺癌组织中的表达明显相关，且与E-cadherin呈负相关，而与Vimentin、MMP-2呈正相关。结论SPAG9可能通过调控EMT、ECM相关蛋白E-cadherin、Vimentin和MMP-2促进前列腺癌的发生、转移。

卵巢上皮性癌组织中SP17、SPAG9、OY-TES-1基因的去甲基化表达及其与临床病理的关系

目的检测在卵巢上皮性癌与非卵巢癌中,精子蛋白17（SP17）、精子相关抗原9（SPAG9）、OY-TES-1这三种癌-睾丸抗原基因启动子区域去甲基化表达的差异,探讨其与卵巢上皮性癌临床病理分期的关系。方法收集2015年1月至2016年4月25例新鲜的卵巢上皮性癌组织标本,及25例新鲜的非卵巢癌组织标本,采用DNA酸性亚硫酸盐转化、PCR扩增及甲基化敏感性内切酶方法检测SP17、SPAG9、OY-TES-1在卵巢上皮性癌与非卵巢癌中Cp G岛的去甲基化表达。结果与非卵巢癌组织比较,卵巢上皮性癌组织中SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区存在高去甲基化表达（P均〈0.01）。三种癌-睾丸抗原基因启动子区域去甲基化表达阳性率在卵巢上皮性癌不同年龄、组织学类型和分化程度中比较,差异无统计学意义（P均〉0.05）;SP17、SPAG9启动子区域去甲基化表达阳性率在有淋巴结转移者中高于无淋巴结转移者（P〈0.01,P〈0.05）,在Ⅲ-Ⅳ期患者中高于Ⅰ-Ⅱ期患者（P均〈0.05）;而OY-TES-1启动子区域去甲基化表达阳性率仅在有淋巴结转移者中高于无淋巴结转移者（P〈0.05）。结论 SP17、SPAG9、OY-TES-1基因启动子区域在卵巢上皮性癌中存在高去甲基化表达,且其去甲基化表达均与患者发病年龄、组织学类型、分化程度无关;部分与淋巴结转移、肿瘤分期相关。SP17、SPAG9、OY-TES-1或可成为卵巢上皮性癌免疫治疗的靶位点。

精子相关抗原9在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变中的表达及意义

目的检测精子相关抗原9(SPAG9)在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达及意义。方法通过免疫组织化学、Western blotting、RT-PCR方法检测正常宫颈组织(对照组,n=20)、CIN组织(CIN组,n=35)及宫颈癌组织(宫颈癌组,n=40)中SPAG9的表达。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定健康女性、子宫肌瘤患者、CIN患者及宫颈癌患者血清标本中SPAG9浓度。结果①SPAG9的表达:宫颈癌组>CIN组>对照组,各组间差异有统计学意义(P均<0.05);②SPAG9 mRNA和蛋白在宫颈癌组中高表达,在对照组中无表达(P<0.05);③宫颈癌患者的SPAG9血清浓度高于CIN患者、子宫肌瘤患者及健康女性的SPAG9血清浓度(P<0.05),且患者术后的SPAG9血清浓度下降。结论 SPAG9在宫颈癌和CIN组织以及患者血清中表达量均增高,其作为一个新的辅助生物学指标,可为宫颈癌及CIN的早期诊断、术后检测及随诊治疗提供指导意义。

血清甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19和三叶因子3及精子相关抗原9水平对宫颈癌患者术后2年复发的预测价值

目的观察宫颈癌患者血清甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19(mannose-binding lectin associated protein 19,MAP19)、三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)、精子相关抗原9(sperm-associated antigen 9,SPAG9)表达情况,探讨其对宫颈癌患者术后2年复发的预测价值。方法120例行手术治疗的宫颈癌患者为宫颈癌组,120例低级别宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者为CIN组,120例子宫肌瘤或子宫腺肌症患者为对照组。采用ELISA法检测3组血清MAP19、TFF3、SPAG9水平并进行比较。宫颈癌患者术后随访2年,根据复发情况分为复发组40例和未复发组80例,比较2组淋巴结转移、FIGO分期等临床资料及血清MAP19、TFF3、SPAG9水平;采用多因素logistic回归分析宫颈癌患者术后2年复发的影响因素;绘制ROC曲线,评估血清MAP19、TFF3、SPAG9预测宫颈癌患者术后2年复发的效能。结果宫颈癌组血清MAP19[(266.07±80.27)μg/L]、TFF3[(407.27±91.45)μg/L]、SPAG9[(124.09±20.41)μg/L]水平均高于CIN组[(200.27±81.28)、(314.66±70.41)、(106.83±13.29)μg/L]、对照组[(130.25±48.27)、(218.61±50.83)、(3.21±1.07)μg/L](P<0.05),CIN组均高于对照组(P<0.05)。复发组有淋巴结转移(87.50%)、FIGO分期ⅡA期(47.50%)、肿瘤最大直径≥4cm(62.50%)比率及血清MAP19[(199.12±75.48)μg/L]、TFF3[(398.04±90.27)μg/L]、SPAG9[(131.73±19.93)μg/L]水平均高于未复发组[17.50%、15.00%、30.00%、(129.48±50.71)μg/L、(196.65±50.16)μg/L、(10.28±2.31)μg/L](P<0.05)。淋巴结转移(OR=3.054,95%CI:1.367~6.511,P<0.001)、FIGO分期(OR=2.136,95%CI:1.082~4.695,P<0.001)、肿瘤最大直径(OR=1.509,95%CI:1.204~3.165,P=0.020)及血清MAP19(OR=5.841,95%CI:4.749~10.231,P<0.001)、TFF3(OR=4.202,95%CI:2.540~6.394,P<0.001)、SPAG9(OR=4.183,95%CI:3.705~6.247,P<0.001)水平是宫颈癌患者术后2年复发的影响因素。血清MAP19、TFF3、SPAG9分别以189.05、311.25、107.40μg/L为最佳截断值,单独及联合预测宫颈癌患者术后2年复发的AUC分别为0.850(95%CI:0.713~0.935,P<0.001)、0.817(95%CI:0.750~0.916,P<0.001)、0.795(95%CI:0.694~0.910,P<0.001)、0.931(95%CI:0.840~0.958,P<0.001),灵敏度分别为95.1%、93.2%、89.3%、95.6%,特异度分别为74.0%、77.1%、76.8%、80.4%。结论有淋巴结转移、FIGO分期ⅡA期、肿瘤最大直径≥4cm及血清MAP19、TFF3、SPAG9水平升高的宫颈癌患者术后2年易复发,血清MAP19、TFF3、SPAG9联合预测宫颈癌患者术后2年复发有较高价值。

精子相关抗原9在前列腺癌中的表达及临床意义

目的探讨精子相关抗原9（SPAG9）在人前列腺癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学技术检测60例前列腺癌和30例前列腺增生症组织中SPAG9的表达，并分析与特异性核基质结合区结合蛋白1（SATB1）基因、临床分期、Gleason评分、前列腺特异抗原（PSA）水平及年龄之间的相关性。结果SPAG9在前列腺癌组织中的阳性率为81．67％（49／60），而在前列腺增生组织中的阳性率为6．67％（2／30），差异有统计学意义（P〈0．01）；SPAG9在前列腺癌组织中的表达强度与SATBl表达水平、临床分期和Gleason评分呈正相关（P〈0．05），且与转移的前列腺癌组织中呈正相关（P〈0．01），而与PSA水平和年龄无明显相关（P〉0．05）。结论SPAG9可能参与人前列腺癌的发生、转移。

精子相关抗原9在前列腺癌细胞迁移和侵袭中的作用

目的 观察精子相关抗原9（SPAG9）对前列腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）从mRNA水平评估SPAG9在20例前列腺癌与相应的癌旁组织及在人正常前列腺上皮细胞和前列腺癌细胞株中的表达.应用RNA干扰技术下调SPAG9在前列腺癌细胞株PC-3中的表达,采用RT-qPCR和Western blot方法评估SPAG9基因沉默效果.采用细胞划痕实验和Transwell侵袭实验比较SPAG9基因沉默前后细胞迁移和侵袭能力的改变.结果 80％（16/20）的前列腺癌中SPAG9的表达显著高于相应癌旁组织,且SAPG9的表达与Gleason评分（P＜0.05）和TNM分期（P＜0.05）密切相关.SPAG9基因在3种细胞株中从低到高依次为：人正常前列腺上皮细胞RWPE-1、低侵袭性前列腺癌细胞株LNCaP、高侵袭性前列腺癌细胞株PC-3,前两者与后者比较差异均有统计学意义（P＜0.01）.特异性SPAG9基因的小干扰RNA（siRNA）能够有效沉默PC-3细胞中SPAG9 mRNA和蛋白的表达,同时在降低PC-3细胞中SPAG9表达后,发现细胞的迁移[（41.19 ±7.50） μm比（10.39±1.75） μm,P＜0.05]和侵袭[（192.50±26.00）个比（98.65±13.90）个,P＜0.05]能力均显著降低.结论 SPAG9基因表达在前列腺癌细胞迁移和侵袭中发挥重要作用.

精子相关抗原9在卵巢浆液性上皮肿瘤中的表达

目的检测精子相关抗原9(SPAG9)在卵巢浆液性上皮肿瘤中的表达,初步探讨其在卵巢浆液性上皮肿瘤术前诊断中的意义。方法应用免疫组织化学SP法,检测良性组24例、交界性组27例、恶性组32例中SPAG9的表达,采用酶标记免疫吸附测定法(ELISA)检测卵巢浆液性上皮肿瘤患者血清中SPAG9的表达水平,与对应的血清CA125表达水平进行相关性分析,并用受试者工作特征(ROC)曲线评价两指标的诊断价值。结果①SPAG9在卵巢上皮性恶性肿瘤组织中的表达高于交界性组及良性组,并与恶性肿瘤的细胞分化程度相关(P<0.05);②卵巢浆液性上皮性肿瘤患者血清中SPAG9有表达,恶性组高于良性组,其血清学水平与CA125呈正相关(P<0.01),ROC曲线分析提示SPAG9对卵巢上皮性恶性肿瘤有较高的诊断意义,但并不优于CA125。结论SPAG9的表达与卵巢上皮性肿瘤的恶性程度相关,在卵巢上皮性恶性肿瘤中表达较高,可作为卵巢上皮性肿瘤术前诊断和术后治疗监测新的生物学指标。