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Risk factors and clinical significance of posterior slip of the proximal vertebral body after lower lumbar fusion
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作者 Jia-Jun Zhu Yi Wang +5 位作者 Jun Zheng Sheng-Yang Du Lei Cao Yu-Ming Yang Qing-Xi Zhang Ding-Ding Xie 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2024年第26期5885-5892,共8页
BACKGROUND Adjacent segment disease(ASD)after fusion surgery is frequently manifests as a cranial segment instability,disc herniation,spinal canal stenosis,spondylolisthesis or retrolisthesis.The risk factors and mech... BACKGROUND Adjacent segment disease(ASD)after fusion surgery is frequently manifests as a cranial segment instability,disc herniation,spinal canal stenosis,spondylolisthesis or retrolisthesis.The risk factors and mechanisms of ASD have been widely discussed but never clearly defined.AIM To investigate the risk factors and clinical significance of retrograde movement of the proximal vertebral body after lower lumbar fusion.METHODS This was a retrospective analysis of the clinical data of patients who underwent transforaminal lumbar interbody fusion surgery between September 2015 and July 2021 and who were followed up for more than 2 years.Ninety-one patients with degenerative lumbar diseases were included(22 males and 69 females),with an average age of 52.3 years(40-73 years).According to whether there was retrograde movement of the adjacent vertebral body on postoperative X-rays,the patients were divided into retrograde and nonretrograde groups.The sagittal parameters of the spine and pelvis were evaluated before surgery,after surgery,and at the final follow-up.At the same time,the Oswestry Disability Index(ODI)and Visual Analogue Scale(VAS)were used to evaluate the patients’quality of life.RESULTS Nineteen patients(20.9%)who experienced retrograde movement of proximal adjacent segments were included in this study.The pelvic incidence(PI)of the patients in the retrograde group were significantly higher than those of the patients in the nonretrograde group before surgery,after surgery and at the final follow-up(P<0.05).There was no significant difference in lumbar lordosis(LL)between the two groups before the operation,but LL in the retrograde group was significantly greater than that in the nonretrograde group postoperatively and at the final follow-up.No significant differences were detected in terms of the|PI–LL|,and there was no significant difference in the preoperative lordosis distribution index(LDI)between the two groups.The LDIs of the retrograde group were 68.1%±11.5%and 67.2%±11.9%,respectively,which were significantly lower than those of the nonretrograde group(75.7%±10.4%and 74.3%±9.4%,respectively)(P<0.05).Moreover,the patients in the retrograde group had a greater incidence of a LDI<50%than those in the nonretrograde group(P<0.05).There were no significant differences in the ODI or VAS scores between the two groups before the operation,but the ODI and VAS scores in the retrograde group were significantly worse than those in the nonretrograde group after the operation and at the last follow-up,(P<0.05).CONCLUSION The incidence of posterior slippage after lower lumbar fusion was approximately 20.9%.The risk factors are related to a higher PI and distribution of lumbar lordosis.When a patient has a high PI and insufficient reconstruction of the lower lumbar spine,adjacent segment compensation via posterior vertebral body slippage is one of the factors that significantly affects surgical outcomes. 展开更多
关键词 Adjacent segment disease Posterior vertebral slip Sagittal alignment of spine-pelvis Lower lumbar fusion Quality of life
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Asymmetric reduction of conjugated C=C bonds by immobilized fusion of old yellow enzyme and glucose dehydrogenase
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作者 Yongxing Li Pengqian Luan +5 位作者 Lele Dong Jianqiao Liu Luying Jiang Jing Bai Fufeng Liu Yanjun Jiang 《Green Synthesis and Catalysis》 2024年第2期80-87,共8页
Asymmetric reduction of the conjugated C=C bonds by the old yellow enzymes(OYEs)presents a promising field in the synthesis of chiral chemicals.Nevertheless,few natural OYEs have been applied in large-scale applicatio... Asymmetric reduction of the conjugated C=C bonds by the old yellow enzymes(OYEs)presents a promising field in the synthesis of chiral chemicals.Nevertheless,few natural OYEs have been applied in large-scale applications due to the requirement of costly NADPH and low operational stability.Herein,a stable and efficient fusion of YqjM from Bacillus subtilis and glucose dehydrogenase(GDH)from Bacillus megaterium was constructed to stereoselectively reduce the conjugated C=C bonds in a self-sufficient continuous process.The effects of the enzyme order and different linkers on the fusions were investigated by structural analysis and all-atom molecular dynamics simulation.The best fusion YqjM_G_GDH gave 98% conversion of 100 mmol/L 2-methylcyclopentenone with an excellent ee value(>99%)in 3 h,while the mixture of individual enzymes only obtained 68% conversion after more than 8 h.The improved substrate conversion of YqjM_G_GDH fusion was probably attributed to the increased flexibility of each fused enzyme and the shortening of the diffusion distance of NADPH regenerated.A one-pot process was designed to purify and immobilize the fusion on the Ni2t-nitrilotriacetic acid functionalized magnetic mesoporous silica nanoflowers.The resulting immobilized biocatalyst not only catalyzed the asymmetric reduction of various α,β-unsaturated ketones(20 mmol/L)continuously with only 50μmol/L NADPt to initiate the whole process,but also retained more than 82%of the initial activity after seven cycles,serving as a good candidate for the industrial applications. 展开更多
关键词 Enzyme fusion Old yellowenzymes Asymmetricreduction C=C bond Cofactor regeneration immobilization
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融合标签技术及其应用 被引量:20
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作者 李永进 陈媛媛 毕利军 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期523-527,共5页
融合标签最初是作为一种有效的工具用于纯化重组蛋白质,近几年的研究表明,融合标签的作用并不局限于此。本文综述了融合标签技术的发展及在生命科学研究中的各种应用,包括重组蛋白质的纯化;目的蛋白质的检测、定向固定;体内生物事件的... 融合标签最初是作为一种有效的工具用于纯化重组蛋白质,近几年的研究表明,融合标签的作用并不局限于此。本文综述了融合标签技术的发展及在生命科学研究中的各种应用,包括重组蛋白质的纯化;目的蛋白质的检测、定向固定;体内生物事件的可视化;提高重组蛋白质的产量;增强重组蛋白质的可溶性及稳定性。 展开更多
关键词 融合标签 重组蛋白质 定向固定 可视化 可溶性
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工程菌及其固定化细胞对有机磷农药的降解 被引量:7
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作者 张丽青 姜红霞 +2 位作者 闫艳春 张庆乐 唐心强 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期45-48,共4页
将抗性库蚊解毒酶酯酶B1基因片段引入融合表达载体pThioHisA中,转化入大肠杆菌DH5α,在IPTG诱导下,经过8h,酯酶B1在大肠杆菌中获得融合高效表达。重组质粒pThioHisA-B1表达的酯酶融合蛋白具有较高的酯酶B1活性,能高效降解酯酶的特异性... 将抗性库蚊解毒酶酯酶B1基因片段引入融合表达载体pThioHisA中,转化入大肠杆菌DH5α,在IPTG诱导下,经过8h,酯酶B1在大肠杆菌中获得融合高效表达。重组质粒pThioHisA-B1表达的酯酶融合蛋白具有较高的酯酶B1活性,能高效降解酯酶的特异性底物α-乙酸萘酯(α-NA)和β-乙酸萘酯(β-NA),将工程菌固定化后,固定化细胞在3h内对1000mg/L的甲基对硫磷降解率>65%。 展开更多
关键词 酯酶基因 融合表达 工程菌 固定化细胞
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重组Hepcidin融合蛋白的金属螯合亲和层析纯化 被引量:5
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作者 张怀 袁其朋 +1 位作者 朱亚平 马润宇 《北京化工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期15-19,共5页
在大肠杆菌中表达的重组Hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在,其N端带有6个组氨酸。以Ni2+-IDA-Sepharose Fast Flow为层析介质,在变性条件下以不同的咪唑和pH值洗脱方式对Hepcidin融合蛋白的纯化效果进行了比较,确定了该融合蛋白的金属... 在大肠杆菌中表达的重组Hepcidin融合蛋白以包涵体形式存在,其N端带有6个组氨酸。以Ni2+-IDA-Sepharose Fast Flow为层析介质,在变性条件下以不同的咪唑和pH值洗脱方式对Hepcidin融合蛋白的纯化效果进行了比较,确定了该融合蛋白的金属螯合层析纯化条件。以60 mmol/L咪唑洗脱杂蛋白,然后将pH值降至4.0洗脱融合蛋白,纯化后的融合蛋白纯度大于95%,而且不含咪唑,有利于下一步Hepcidin的制备。金属螯合层析中融合蛋白收率不低于90%。Ni2+-IDA-Sepharose Fast Flow对该融合蛋白的吸附量为30.4 mg/mL。 展开更多
关键词 HEPCIDIN 融合蛋白 6个组氨酸 包涵体 金属螯合亲和层析
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用原生质体融合构建高产酒精酵母株 被引量:2
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作者 何秀良 鞠京丽 +2 位作者 蔡崇光 李继安 王增博 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第S1期168-172,共5页
用单孢子分离、单倍体诱变、原生质体融合等手段,获得了酵母菌株———科生9064。用该菌的固定化细胞进行发酵玉米糖化醪生产酒精的扩大试验。经8个月的吨级生物反应器运转试验结果证明,该酵母凝胶粒子活性稳定,在玉米糖化醪液... 用单孢子分离、单倍体诱变、原生质体融合等手段,获得了酵母菌株———科生9064。用该菌的固定化细胞进行发酵玉米糖化醪生产酒精的扩大试验。经8个月的吨级生物反应器运转试验结果证明,该酵母凝胶粒子活性稳定,在玉米糖化醪液初糖浓度为18%~20%,pH值40~50,温度为38~40℃的条件下,发酵时间约为20h,终酒精含量达9%~11%(V/V),残糖含量为10%以下,理论转化率达90%以上。并对新菌株的培养形态及生理生化特征等进行了研究。 展开更多
关键词 酿酒酵母 原生质体融合 固定化 玉米糖化醪 酒精 耐高温
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蛇毒类凝血酶基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化 被引量:5
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作者 李民 杨青 +3 位作者 包永明 雷旭宇 许建强 安利佳 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CSCD 北大核心 2003年第2期22-25,共4页
将大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin)基因克隆到载体pET32-a(+)上,在T7lac启动子下以N端融合硫氧还蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,诱导条件为:30℃诱导6 h,IPTG浓度为1 mmol/L.利用固定化金属离子(Ni2+)亲和层析分别对胞... 将大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin)基因克隆到载体pET32-a(+)上,在T7lac启动子下以N端融合硫氧还蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,诱导条件为:30℃诱导6 h,IPTG浓度为1 mmol/L.利用固定化金属离子(Ni2+)亲和层析分别对胞内可溶物和变性条件下的包涵体进行纯化.通过SDS-PAGE检测融合蛋白的纯度,采用点杂交和纤维蛋白凝结活性检测分析,显示纯化产物具有较高生物活性. 展开更多
关键词 类凝血酶 固定化金属亲和层折 融合表达 大肠杆菌
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典型POPs的生物降解修复技术研究与发展 被引量:6
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作者 吴海珍 韦朝海 周盛 《生态环境学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期166-171,共6页
生物吸附与降解是解决持久性有机污染物(POPs)最有潜力的方法之一,有必要介绍利用微生物把目标污染物转化为易降解的物质甚至矿化的POPs修复原理及其技术。对此,概述了近年来国内外基于微生物通过膜融合、胞质融合和核融合形成能够降解P... 生物吸附与降解是解决持久性有机污染物(POPs)最有潜力的方法之一,有必要介绍利用微生物把目标污染物转化为易降解的物质甚至矿化的POPs修复原理及其技术。对此,概述了近年来国内外基于微生物通过膜融合、胞质融合和核融合形成能够降解POPs的杂种细胞的细胞融合技术;基于降解性质粒的相容性,把能够降解不同污染物的质粒组合到一个菌种中,形成多质粒的新菌种,使微生物由于代谢途径的改变能够矿化POPs的基因工程菌构建技术;基于通过某些载体把酶固定于其中实现活性稳定、可以回收及可重复利用的酶固定化技术,以及基于降解菌活性酶分子亚基置换、降解菌活性酶的定点突变、降解酶的体外定向进化这几方面的酶构建技术;进一步分析基于分子生物学提高POPs生物修复能力的原理,指出经生物技术改造的工程菌和固定化酶未能进入实际应用的障碍所在。以多溴联苯醚(PBDEs)的微生物细胞吸收和降解机理作为典型POPs生物修复的案例,强调生物降解的过程强化需要建立多尺度上功能方面的适合;提出了分子生物学与基因工程学的结合在解决POPs环境污染方面未来的基础科学问题与研究思路。综合上述,典型POPs的生物修复技术的构建需要考虑宏观污染物协同降解的工艺理论,在基因水平、分子水平、反应器水平及工程水平上追求更高功能方面的适合。 展开更多
关键词 生物修复 持久性污染物 多溴联苯醚 细胞融合技术 酶固定化技术 基因工程 体外定向进化
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改良Galveston术式在脊柱-骨盆固定融合术中的应用 被引量:1
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作者 张凯宁 任延军 +3 位作者 邹德波 吴莹光 杨允 张虎 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2012年第4期39-42,共4页
目的探讨通过改良的Galveston技术向髂骨内植入髂骨螺钉在脊柱骨盆固定融合术中的疗效。方法 2005年10月-2010年9月在腰骶部肿瘤、结核、陈旧骶骨骨折手术中应用改良Galveston术式进行脊柱-骨盆固定融合术(腰骶髂融合术)10例。男7例,... 目的探讨通过改良的Galveston技术向髂骨内植入髂骨螺钉在脊柱骨盆固定融合术中的疗效。方法 2005年10月-2010年9月在腰骶部肿瘤、结核、陈旧骶骨骨折手术中应用改良Galveston术式进行脊柱-骨盆固定融合术(腰骶髂融合术)10例。男7例,女3例;年龄46-62岁,平均58岁。随访时间10-25个月,平均16个月。通过术前、术后影像学及随访症状缓解标准评价手术效果。结果手术时间190-250分钟,平均210分钟。术中未出现神经血管损伤等并发症。平均出血量1200ml。术后未出现感染、内固定物失败病例。按中华医学会骨科学分会脊柱学组腰背痛手术评定标准评价,优3例,良5例,可1例,优良率达90%。结论通过改良的Galveston技术向髂骨内植入髂骨螺钉在脊柱骨盆固定融合术中可获得满意的临床疗效。 展开更多
关键词 Galveston技术 髂骨螺钉 脊柱骨盆固定融合术 腰骶髂融合术
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金结合多肽及其在生物传感领域的应用 被引量:1
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作者 余涛 郭磊 +2 位作者 应天翼 宋云扬 吴方晖 《生物技术通讯》 CAS 2014年第4期591-596,共6页
金结合多肽是近年来通过生物展示技术或人工设计所获得的一类可以特异性与金结合的多肽,因其良好的生物相容性及易修饰性,针对此类生物大分子的研究和应用成为包括生物传感在内的众多领域的研究热点。金结合多肽多用于生物传感器的敏感... 金结合多肽是近年来通过生物展示技术或人工设计所获得的一类可以特异性与金结合的多肽,因其良好的生物相容性及易修饰性,针对此类生物大分子的研究和应用成为包括生物传感在内的众多领域的研究热点。金结合多肽多用于生物传感器的敏感膜制备,具有识别分子有序定位、反应步骤少、条件温和、高灵敏度的优点。我们在简要总结金结合多肽的代表性序列及其与金的结合机理的前提下,评述了金结合多肽在生物传感领域的应用,着重论述了利用基因工程技术表达含有金结合多肽的融合蛋白这一敏感膜关键器件的方法途径。 展开更多
关键词 金结合多肽 生物传感器 融合蛋白 表面固定 自组装
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CT模拟在适形调强放射治疗中的应用研究 被引量:4
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作者 黄生鹏 杨振 +2 位作者 雷明军 徐宏 王学伟 《中国医学工程》 2005年第3期284-286,289,共4页
目的将CT模拟应用适形调强放射治疗,在临床应用中探索与之相关的一系列更简便和更好的方法,为以后的调强放射治疗提供指南。方法64例肿瘤患者,其中头颈部肿瘤患者42人,胸部肿瘤患者15人,腹部和盆腔肿瘤患者7人。针对不同的患者采取不同... 目的将CT模拟应用适形调强放射治疗,在临床应用中探索与之相关的一系列更简便和更好的方法,为以后的调强放射治疗提供指南。方法64例肿瘤患者,其中头颈部肿瘤患者42人,胸部肿瘤患者15人,腹部和盆腔肿瘤患者7人。针对不同的患者采取不同的体位固定技术,做CT\MRI扫描,采用两种标记法标记坐标系并比较了两种方法特点,然后做三维重建、图像融合、射野布置,并对靶中心做了验证。结果CT模拟可以大大提高治疗位置的精确度,更好地避开和保护重要器官,使其受到较低的剂量,而靶区受到高适形剂量。内标记方法的位置精读和CT扫描的层厚无关,而外标记法的位置精读与扫描层厚相关。头颈部肿瘤靶点偏差小于3mm,胸部肿瘤、腹部和盆腔肿瘤,靶点偏差均小于5mm。结论CT模拟定位是适形调强放射治疗必不可少的工具,但还需更好的解决体位的固定和器官运动等问题;内外标记同时采用的方法,是一种安全、准确的方法,图像融合智能化还需要加强;三维适形的布野原则对调强放疗的布野有指导意义;采用X光模拟机验证靶中心也是一种方便可靠的方法。 展开更多
关键词 CT模拟 适形放疗 调强放疗 体位固定 图像融合 靶中心验证
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生物技术在持久性污染物生物修复中的研究进展 被引量:2
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作者 廖超登 杨汝德 周盛 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期175-179,共5页
生物技术是21世纪的主导技术,其在环境工程中的应用日趋重要。生物修复是解决持久性污染物(POPs)最具潜力的手段。文章概述了近几年研究者通过生物技术构建POPs降解工程菌及固定化降解酶在持久性污染物生物修复的应用研究;总结了经生物... 生物技术是21世纪的主导技术,其在环境工程中的应用日趋重要。生物修复是解决持久性污染物(POPs)最具潜力的手段。文章概述了近几年研究者通过生物技术构建POPs降解工程菌及固定化降解酶在持久性污染物生物修复的应用研究;总结了经生物技术改造的工程菌和固定化酶未能进入实际应用的障碍所在;针对持久性污染物生物修复,提出了一些进一步完善工程菌和固定化酶的见解。 展开更多
关键词 生物修复 持久性污染物 细胞融合技术 固定化技术 基因工程 酶工程技术
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Mine tailings as a raw material in alkali activation: A review 被引量:8
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作者 Jenni Kiventerä Priyadharshini Perumal +1 位作者 Juho Yliniemi Mirja Illikainen 《International Journal of Minerals,Metallurgy and Materials》 SCIE EI CAS CSCD 2020年第8期1009-1020,共12页
The mining industry produces billions of tons of mine tailings annually.However,because of their lack of economic value,most of the tailings are discarded near the mining sites,typically under water.The primary enviro... The mining industry produces billions of tons of mine tailings annually.However,because of their lack of economic value,most of the tailings are discarded near the mining sites,typically under water.The primary environmental concerns of mine tailings are related to their heavy metal and sulfidic mineral content.Oxidation of sulfidic minerals can produce acid mine drainage that leaches heavy metals into the surrounding water.The management of tailing dams requires expensive construction and careful control,and there is the need for stable,sustainable,and economically viable management technologies.Alkali activation as a solidification/stabilization technology offers an attractive way to deal with mine tailings.Alkali activated materials are hardened,concrete-like structures that can be formed from raw materials that are rich in aluminum and silicon,which fortunately,are the main elements in mining residues.Furthermore,alkali activation can immobilize harmful heavy metals within the structure.This review describes the research on alkali activated mine tailings.The reactivity and chemistry of different minerals are discussed.Since many mine tailings are poorly reactive under alkaline conditions,different pretreatment methods and their effects on the mineralogy are reviewed.Possible applications for these materials are also discussed. 展开更多
关键词 Mine tailings alkali activation thermal treatment mechanical activation alkaline fusion heavy metal immobilization
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融合蛋白CR2-GDH固定化及不对称还原制备(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯
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作者 王爽 穆晓清 +2 位作者 聂尧 张荣珍 徐岩 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第11期4047-4053,共7页
比较介孔分子筛材料SBA-15、MCM-41、海藻酸钙、改性二氧化硅4种载体固定化融合蛋白CR2-GDH其酶固载量和酶活回收率,选择SBA-15为固定化载体。研究固定化条件对固定化融合酶量的影响以及固定化酶的稳定性,固定化酶在双相体系催化不对称... 比较介孔分子筛材料SBA-15、MCM-41、海藻酸钙、改性二氧化硅4种载体固定化融合蛋白CR2-GDH其酶固载量和酶活回收率,选择SBA-15为固定化载体。研究固定化条件对固定化融合酶量的影响以及固定化酶的稳定性,固定化酶在双相体系催化不对称还原反应。结果表明,在p H值为5.5、酶浓度为1.4mg/m L、反应1h条件下,固定化酶量为27.7mg/g。加入25mmol/L的Ca2+,固定化酶的酶活回收率由58.6%提高到78.1%。与游离酶相比,固定化酶的热稳定性显著提高,40℃条件下酶活回收率提高19.1%。固定化酶水相中反复使用7批次后,剩余活性仍超过30%,具有较好的操作稳定性。与游离酶相比,固定化酶更耐受烷烃类有机溶剂。在水/有机溶剂双相反应体系中,Ca2+/SBA-15固定化酶和游离酶催化相比,产物得率提高23.8%。 展开更多
关键词 融合蛋白 SBA-15 固定化 双相体系 不对称还原
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多节段脊柱骨折诊疗方法的分析 被引量:3
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作者 袁中山 李胜华 邓英虎 《脊柱外科杂志》 2005年第4期212-214,共3页
目的分析多节段脊柱骨折的诊疗方法、伤情特点.方法回顾性分析1996年4月~2005年1月54例脊柱多节段骨折患者,探讨致伤原因、损伤节段分布及治疗效果.结果患者平均年龄43.2岁,50岁以下占59.3%.Ⅰ型骨折33例,Ⅱ型骨折21例,其中胸、腰段及... 目的分析多节段脊柱骨折的诊疗方法、伤情特点.方法回顾性分析1996年4月~2005年1月54例脊柱多节段骨折患者,探讨致伤原因、损伤节段分布及治疗效果.结果患者平均年龄43.2岁,50岁以下占59.3%.Ⅰ型骨折33例,Ⅱ型骨折21例,其中胸、腰段及腰椎多节段骨折33例,占61.1%,合并神经损伤37例,占68.5%.致伤原因为高处坠落伤、交通事故伤和重物砸伤占83.3%.手术治疗27例,非手术治疗27例.30例患者获得随访,平均随访14.6个月,随访病例中22例伤时有神经损伤,其中90.9%的病例治疗后神经功能恢复1~2级.结论多节段脊柱骨折患者以男性中青年多见,多数伴有神经损伤.最常见的致伤原因是高处坠落伤、交通事故伤和重物压砸伤.全面、仔细地检查伤情,早期正确诊断与治疗,可获得良好效果. 展开更多
关键词 脊柱骨折 多处创伤 固定 脊柱融合术
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一种高效制备重组抗菌肽S-thanatin的方法 被引量:1
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作者 邓学鹏 武朋朋 +1 位作者 沈子龙 徐寒梅 《药物生物技术》 CAS CSCD 2012年第6期498-502,共5页
S-thanatin是一个含有21个氨基酸的抗菌肽,以融合形式在大肠杆菌体内表达,载体构建时人工设计了一个凝血酶位点。为降低重组抗菌肽S-thanatin的生产成本以利于工业化生产,探索了一个处理速度快且成本较低的分离纯化策略。通过大肠杆菌pE... S-thanatin是一个含有21个氨基酸的抗菌肽,以融合形式在大肠杆菌体内表达,载体构建时人工设计了一个凝血酶位点。为降低重组抗菌肽S-thanatin的生产成本以利于工业化生产,探索了一个处理速度快且成本较低的分离纯化策略。通过大肠杆菌pET-32a/BL21(DE3)系统高效可溶表达融合蛋白后,首先分析了融合蛋白的表达部位,然后利用融合蛋白热稳定性高的性质通过加热去除不耐热的大分子质量蛋白,同时降低蛋白酶对融合蛋白的影响。离心后溶液通过中空纤维超滤来浓缩融合蛋白,之后进行固定化凝血酶酶切。酶切后的TrxA片段和目的多肽利用其分子质量的差异,使用超滤膜包进行分离,最后使用制备反相高效液相对S-thanatin进行精制,并检测其对大肠杆菌ATCC 25922的抗菌活性。结果表明,通过这一简单的纯化工艺,可制备出纯度95%以上的S-thanatin,并具有很好的抗菌活性。 展开更多
关键词 抗菌肽 S-thanatin 分离纯化 融合表达 凝血酶 固定化
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酵母融合子R36固定化细胞制备方法研究 被引量:1
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作者 叶世超 薛婷 +4 位作者 何文锦 叶冰莹 许旭萍 包伟霞 陈由强 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期59-64,共6页
目的:探索适合固定化酵母酒精发酵的工艺条件。方法:通过研究复合载体,从而进行优化固定化条件的实验。结果:海藻酸钠浓度为4%,PVA浓度为2%,酵母菌体添加量为4%,氯化钙浓度为4%,硼酸2%;固定化时间12h是SA—PVA固定化小球制备的最适条件... 目的:探索适合固定化酵母酒精发酵的工艺条件。方法:通过研究复合载体,从而进行优化固定化条件的实验。结果:海藻酸钠浓度为4%,PVA浓度为2%,酵母菌体添加量为4%,氯化钙浓度为4%,硼酸2%;固定化时间12h是SA—PVA固定化小球制备的最适条件;固定化酵母小球保存在2%蔗糖溶液中是其适宜的保藏条件。结论:提高固定化酵母细胞的稳定性和酒精发酵性能。 展开更多
关键词 酵母融合子 固定化酵母 条件优化 酒精发酵工艺
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pH值和盐浓度对金属螯合亲和层析分离人胰高血糖素样肽-1融合蛋白的影响 被引量:2
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作者 蒋加庆 蔡海波 +1 位作者 胡爽 谭文松 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第9期999-1004,共6页
目的探讨pH值和盐浓度对金属螯合亲和层析(Immobilized metal ion affinity chromatography,IMAC)分离含His-Tag标签的人胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)融合蛋白的影响,并确定最佳洗脱条件。方法在0.50mol/L盐浓度条... 目的探讨pH值和盐浓度对金属螯合亲和层析(Immobilized metal ion affinity chromatography,IMAC)分离含His-Tag标签的人胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)融合蛋白的影响,并确定最佳洗脱条件。方法在0.50mol/L盐浓度条件下,分别取pH6.0、7.0、7.8和9.04种缓冲液进行咪唑梯度洗脱;在合适的pH值条件下,分别取氯化钠浓度0.25、0.50和0.75mol/L3种缓冲液进行咪唑梯度洗脱。分析在不同pH值及盐浓度条件下洗脱融合蛋白所需要的咪唑浓度及回收率。结果在所考察的pH值范围内,洗脱融合蛋白所需的咪唑浓度随洗脱液pH值的升高而逐渐降低,当洗脱液pH值为7.8时,融合蛋白的分离效果最佳,大部分杂蛋白被0~40mmol/L咪唑洗脱液去除且不含融合蛋白,而绝大部分融合蛋白在咪唑浓度达80~200mmol/L时被洗出,总回收率达(83.7±1.0)%,且比例较高;在此pH值条件下,氯化钠浓度达0.75mol/L,才会影响融合蛋白的回收率,氯化钠浓度为0.25或0.50mol/L的洗脱液洗出融合蛋白的效果相近;在pH7.8,含0.25mol/L氯化钠的洗脱体系下,用50mmol/L咪唑溶液洗脱杂蛋白,200mmol/L咪唑溶液洗脱融合蛋白,融合蛋白的回收率和比例分别可达(85.2±2.0)%和(80.5±1.0)%。结论在所考察的pH值和盐浓度范围内,提高洗脱液pH值和盐浓度均可降低洗脱融合蛋白需要的咪唑量,但也会降低融合蛋白的回收率。 展开更多
关键词 人胰高血糖素样肽-1 融合蛋白质类 金属螯合亲和层析 氢离子浓度 盐浓度
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吸附融合菌的固定化及对铬吸附特性研究
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作者 李森 尹华 +2 位作者 何宝燕 叶锦韶 易靖然 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1785-1789,共5页
研究了融合菌的固定化方法及吸附特性,结果表明:1.5%海藻酸钠为包埋剂包埋50 g/L融合菌可制成物理和吸附性能较好的固定化吸附剂;40 g/L(约含5 g/L融合菌)的固定化吸附剂对30 mg/L含Cr废水的去除率可达94.54%;当投加量为50 g/L(约含6 g/... 研究了融合菌的固定化方法及吸附特性,结果表明:1.5%海藻酸钠为包埋剂包埋50 g/L融合菌可制成物理和吸附性能较好的固定化吸附剂;40 g/L(约含5 g/L融合菌)的固定化吸附剂对30 mg/L含Cr废水的去除率可达94.54%;当投加量为50 g/L(约含6 g/L融合菌)时,固定化吸附剂可完全去除实际电镀废水(pH:2.67,Cu:1.70 mg/L,Cr:20.62 mg/L,N i:29.97 mg/L,Zn:1.11 mg/L)中的Cu和Cr,且对N i和Zn的去除率也分别达到了48.05%和61.09%;吸附过程符合准二级吸附动力学模型;填充柱工艺适用于固定化吸附剂连续处理含铬废水,当流速为150 mL/h和250 mL/h时填充柱一次稳定处理水量分别为7.2 L和11.5 L,且延长水力停留时间可提高出水水质。 展开更多
关键词 固定化 海藻酸钠 电镀废水 融合菌
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壳聚糖固定β-淀粉酶-海藻糖合酶双功能融合酶产海藻糖的研究 被引量:1
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作者 郑海杰 徐波 +2 位作者 苏静 王瑞明 马春玲 《食品科技》 CAS 北大核心 2017年第7期244-248,共5页
β-淀粉酶-海藻糖合酶双功能融合酶以戊二醛为交联剂,壳聚糖为载体,采用交联-吸附法固定。通过单因素试验和正交设计方案得到最优条件:壳聚糖浓度为2.5 g/L,戊二醛浓度3 g/L,交联时间80 min,融合酶浓度为8 mg/m L,固定时间为12 h,酶活... β-淀粉酶-海藻糖合酶双功能融合酶以戊二醛为交联剂,壳聚糖为载体,采用交联-吸附法固定。通过单因素试验和正交设计方案得到最优条件:壳聚糖浓度为2.5 g/L,戊二醛浓度3 g/L,交联时间80 min,融合酶浓度为8 mg/m L,固定时间为12 h,酶活力回收率为71%。酶学特性:最适pH向碱性偏移0.5,最适温度不变,具有良好的储存稳定性和操作稳定性,其酸碱稳定性和热稳定性均优于游离态。4℃储存31 d后酶活力损失33%,循环使用6次酶活力降低27%,通过固定化海藻糖转化效率与游离态和单酶混合体系相比分别低29%、6%。 展开更多
关键词 β-淀粉酶-海藻糖合酶双功能融合酶 壳聚糖 戊二醛 固定化酶
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