The factors of biological indicator resistance

Biological indicator(BI)is the gold standard in verifying the effectiveness of the sterilization processes.The resistance of biological indicators generally means the population of viable organism and D value.The population and the D value are all not intrinsic,which will vary according to the lot,the manufacturer.Spores,carrier,recovery medium and the packaging compose the self-contained biological indicators.And all of the component will affect BI resistance.Different kinds of carrier spore inoculated on exhibit different manners to attach different D-values.Another factor that affects the resistance of BI is spore production methods.The sporulation conditions including temperature,p H,humidity,nutrient and ions content,largely influence the spore resistance to heat.Furthermore,resistometer performance and the different test method are also the major source of the D value variation.All the factors affect the resistance of biological in an comprehensive manner,and when a resistance variation occur,all the factors above should be taken into consideration.

温度、光照对秋葵褐腐病病原菌菌丝生长、孢子萌发的影响及其田间药剂防治效果评价

了解病原菌在不同环境下生活的状态,是控制病害流行的基础。为了解褐腐病菌在黑龙江地区的发生条件,并找到有效的防治药剂,采用室内试验对影响菌丝和孢子萌发的温度、光照条件进行研究,并对6种药剂防治秋葵褐腐病的田间防治效果进行评价。室内试验结果表明:秋葵褐腐病病原菌菌丝在15~40 ℃条件下均可生长,而产孢温度为20~30 ℃;30 ℃条件下菌丝生长速度最快,产孢量最高,均分别显著高于其他条件下的菌落直径和产孢量。光照不利于菌丝生长,但有利于产孢;在0 h光照下菌丝生长最快,菌落直径最长,第3天达7.85 cm,但产孢量最低,为1.04×10^(7)个/mL,均分别与其他处理有显著性差异;24 h光照处理第3天菌落直径(7.15 cm)显著小于其他2个处理,而病原菌产孢量最大(4.64×10^(7)个/mL),显著高于其他2个处理。孢子萌发的最适温度是30 ℃,在此温度下2 h就可以完成孢子萌发,在25 ℃条件下5 h时孢子才开始萌发,在20 ℃条件下24 h后孢子仍无萌发迹象。通过田间试验,筛选出50%烯酰吗啉水分散粒剂、20%腐霉利悬浮剂和72%霜脲·锰锌可湿性粉剂这3种药剂对秋葵褐腐病的防治效果较好,其中,50%烯酰吗啉水分散粒剂600倍液、1 200倍液分别较对照药剂10%多抗霉素可湿性粉剂600倍液显著提高15.2百分点、14.2百分点,分别较对照药剂1 200倍液显著提高13.8百分点、12.8百分点;20%腐霉利悬浮剂600倍液、1 200倍液防治效果分别较对照药剂600倍液显著提高9.3百分点、11.8百分点,分别较对照药剂1 200倍液显著提高8.3百分点、10.8百分点;72%霜脲·锰锌可湿性粉剂防治效果也显著高于对照药剂。综上,秋葵褐腐病发生的适宜温度为25~30 ℃,黑龙江地区主要发病时期在6月末—7月初,生产中可选用50%烯酰吗啉水分散粒剂、20%腐霉利悬浮剂、72%霜脲·锰锌可湿性粉剂在病害发生初期交替进行防治,每7 d喷雾1次,连续施药3次,可有效控制病害的发生。

高地芽孢杆菌ST15发酵条件的优化

水稻细菌性条斑病是由稻黄单胞菌稻生致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xoc)侵染引起的一种重要植物病害,迫切需要开发绿色、高效、低毒的生物农药用于防治。高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis)ST15对水稻黄单胞菌具有显著抑制作用,具有开发成生物农药的潜力。但ST15在摇瓶发酵中活菌和芽孢数量偏低,限制了其开发应用。为此,本文在5 L发酵罐中研究了温度、搅拌转速、通气量等因素对ST15发酵水平的影响,明确了影响活菌和芽孢数量的因素,获得了最佳发酵工艺条件:温度30℃、搅拌转速500 r/min、通气量4 L/min、种龄12 h、接种量8%、发酵周期36 h。在此条件下,ST15活菌数量、芽孢数量和芽孢率分别达到74.54×10^(8) CFU/m L、64.75×10^(8) CFU/m L和86.87%,比摇瓶条件下分别提高了16.11%、42.00%和27.75%,本研究可为ST15发酵的后续中试及大规模生产提供技术支持。

一株除草活性菌株HY-041的除草潜力及其生物学特性研究

【目的】探讨HY-041菌株的除草潜力及生物学特性,为其用于工业化生产提供理论依据。【方法】通过离体接种法,测定了菌株HY-041对野燕麦(Avena fatua L.)、藜(Chenopodium album L.)、密花香薷(Elsholtzia densa Benth.)、猪秧秧(Galium aparine L.)、冬葵(Malva verticillata L.var.crispa)、酸模叶蓼(Polygonum lapathifolium L.)和反枝苋(Amaranthus retroflexus L.)7种杂草叶片的致病力。采用生长速率法和孢子计数法,考察不同培养基、光照、温度、碳源、氮源、pH及致死温度等因子对菌丝生长和产孢量的影响。【结果】HY-041菌株接种离体叶片7 d致病性表现为:酸模叶蓼>冬葵>野燕麦>藜>猪秧秧>反枝苋>密花香薷。HY-041菌株在PSA培养基中生长发育最快,且菌丝稠密,菌株最适生长温度为20℃,最适产孢温度为25℃,在持续黑暗环境下,更有利于菌丝生长和孢子的产生,最适碳源为肌醇,最适氮源为硝酸钾和硝酸钠,菌株适宜生长pH值为9,最适产孢pH为8,致死温度为55℃下水溶10 min。【结论】本试验明确了HY-041菌株在离体条件下对7种杂草的致病性及该菌的生物学特性,通过优化提高了菌株的产孢量,为生防制剂的研究奠定理论基础。

甘蓝根肿病菌生理小种鉴定及生物学特性研究

甘蓝根肿病是一种由芸薹根肿菌(Plasmodiophora brassicae Woron.)侵染引发的土传病害,发生面积广,为害严重,严重威胁甘蓝产业可持续发展.为初步了解重庆市甘蓝根肿病菌生理小种的类型及其生物学特性,本研究采集重庆市部分地区甘蓝根肿病样品,采用PCR扩增法进行生理小种初步鉴定,结果显示所采集的根肿病菌菌种均以4号生理小种为主要小种.同时对该菌种的生物学特性进行了研究,结果表明,休眠孢子萌发的最适pH值为6.5,致死温度为48℃;根肿病休眠孢子的萌发率随着植株腐烂处理时间的增加而增加.在甘蓝不同生育时期接种病原菌悬液,随接种浓度的升高,根肿病发病率和病情指数整体呈上升趋势,随接种时期的推后,发病率和病情指数整体呈下降趋势,接种菌液浓度达106个/mL时病害将严重发生.病菌侵染时间越早,对甘蓝长势影响越大,而且环境中病菌浓度越高,影响越严重,接种菌液浓度达105个/mL就能对甘蓝长势造成严重影响.该研究结果为重庆市甘蓝根肿病防治提供了理论依据.

桫椤濒危原因的探讨

本文观察了西双版纳生境下桫椤(Alsophila spinulosa (Hook.) Tryon)生物学特性。桫椤濒危的可能原因是:1.桫椤孢子寿命短,难萌发。2.孢子—原叶体—孢子体的生活周期长,并且在丝状体、原叶体和幼孢子体阶段,无特殊结构去抵抗和忍耐一切不利环境因子的影响。3.孢子萌发、形成配子和胚胎建成等过程对生境条件的要求严格,因此桫椤的分布受到很大的限制。在现代气候条件下,桫椤只能在温暖、湿润的热带、亚热带林地生存下来。一旦桫椤生栖的森林遭到破坏,桫椤随之死亡。4.桫椤是木本植物,生殖周期很长,不利于生存发展。5.桫椤根很不发达,树干内部的输导系统也较原始,只能适应空气和土壤湿润的生境。6.桫椤被人为的掠夺式的砍伐。针对以上情况,提出了保护这一种质资源的措施。

油菜根肿病菌的形态和休眠孢子的生物学特性

【目的】比较油菜根肿病菌与十字花科蔬菜根肿病菌的形态是否存在差异。研究油菜根肿病菌休眠孢子的生物学特性,为防治油菜根肿病提供依据。【方法】应用扫描电镜观察油菜根肿病菌的形态特征和休眠孢子至管腔的形态演变过程。采用地衣红染色,观测不同根分泌物和条件对休眠孢子萌发的影响。【结果】休眠孢子近球形,有乳突,直径为1.9～4.3μm(平均3.5μm),大于甘蓝根肿菌休眠孢子(2.5μm);透射电镜下游动孢子近球形、肾形或椭圆形,直径为1.6～3.5μm(平均2.8μm),同侧生不等长尾鞭式双鞭毛。休眠孢子萌发形成游动孢子、休止孢、休止孢再生出侵入结构管腔。休眠孢子萌发的最适温度是24℃,最适pH值是6.3,腐烂处理促进休眠孢子萌发,光抑制休眠孢子萌发,休眠孢子在过滤灭菌的根分泌物中萌发率最高为62.50%。致死温度为48℃。【结论】油菜根肿病菌与十字花科甘蓝根肿病菌休眠孢子大小有明显差异,观察到休眠孢子至管腔的过程。油菜根肿菌休眠孢子的萌发条件与该病发生条件相一致。

3种牧草根际平脐蠕孢形态和生物学特性

自甘肃环县沟壑草地牧草根部常规组织分离获得特异平脐蠕孢、高粱平脐蠕孢和麦根腐平脐蠕孢,并对其生物学特性进行了研究。结果表明,3种平脐蠕孢在生物学特性上有明显差异,特异平脐蠕孢孢子萌发的温限为5 45℃,最适萌发温度为35℃,在45℃时萌发率仍高达85.1%;高粱平脐蠕孢孢子的萌发温限为540℃,最适萌发温度为15～30℃;麦根腐平脐蠕孢孢子的萌发温限为545℃,最适温度15～25℃,在45℃时萌发率仅为2.3%;不同pH值时特异平脐蠕孢孢子萌发率均较后2种高,且前者孢子萌发的最适pH值为5.59～6.47,后两者pH值均为6.47;土壤液等4种营养液对特异平脐蠕孢孢子萌发率在4h后有促进作用,对高粱平脐蠕孢在最初2h有促进作用,而对麦根腐平脐蠕孢则有抑制作用;3种菌萌发均需要液态水,但对光不敏感。

蕉斑镰刀菌3-26菌株产孢条件研究

通过液体摇瓶及固体浅盘产孢试验,比较了蕉斑镰刀菌32-6菌株在不同液体培养基中的产孢量,同时以绿豆汤和廉价固体基质（麦麸与米糠）分别作为液体和固体发酵基质,确定了发酵所需的参数。结果表明,绿豆汤培养基液体摇瓶产孢条件为28℃、初始pH8.0、初始接种量体积分数为1%（每mL母液1×106个孢子）、培养5d时,产孢量最大;固体浅盘产孢条件为28℃、初始pH8.0、初始接种量质量体积比为50∶1（g·mL-1）（每mL母液1×106个孢子）、麦麸与米糠的质量比为5.41∶1、基质含水量在63%-65%、培养9d时,产孢量达最大值。

薇菜的生物学特性及人工繁殖

辨析了薇菜名称，详细介绍了薇菜的生物学特性、适于生长的环境条件、营养价值和经济价值，从整株移栽和分株移栽等无性繁殖、孢子有性繁殖方面介绍了薇菜的人工繁殖方法，论述了薇菜的采收和加工方法．

蕨类植物孢子萌发影响因素的研究进展

蕨类植物经孢子萌发 ,产生配子体和形成孢子体 ,从而完成其世代交替的生活史 ;其中孢子萌发在整个生活周期中起着关键性的作用。简要介绍了近年来关于孢子萌发的研究进展。

油菜根肿病菌拮抗微生物的筛选及其防治效果测定

以寻找对油菜根肿病菌具有生物防治作用的拮抗微生物为主要目的,采集茶树、红豆树、银杏树、白菜和油菜的根际土壤及根、茎、叶、枝条等样品进行分离,通过测定根肿病菌休眠孢子接种这些微生物后的萌发率来筛选拮抗菌株,并在室内盆栽及大田试验中评价了10株拮抗微生物的防治效果。实验共分离出细菌421株、真菌155株、放线菌368株,使休眠孢子萌发率低于45%的菌株仅分别占5.46%、0.65%、4.35%。其中放线菌A316、A10和真菌T1对根肿病的生防潜力最大,对休眠孢子萌发的抑制率分别高达77.11%、72.54%、69.01%,室内盆栽防效分别为73.60%、70.94%、67.10%,大田防效依次达65.84%、59.59%、61.24%。

培养基营养成分对香蕉枯萎病尖孢镰刀菌生长的影响

通过对香蕉枯萎病发病株病组织的分离、纯化,得到香蕉枯萎病病原菌——尖镰孢菌古巴专化型[Fusarium oxysporum f.sp. cubense(E.F.Smith)Snyder et Hansen]。该病原菌在不同pH值培养基上培养4d后,发现尖孢镰刀菌菌落在pH值4.0～9.0范围内均可生长,pH值为6.0～7.0时最适,菌落直径平均在3.7～3.9cm之间。尖孢镰刀菌在不同营养成分的培养基上培养,结果表明,N源对尖孢镰刀菌菌丝的生长影响大于C源。生长到第6天时,全糖型培养基产孢量最大,且小型分生孢子的产孢量也最大,可使香蕉苗发病率达到100%。而大型分生孢子的产生最佳培养基为低氮型培养基。

枯草芽胞杆菌B201产芽孢培养基优化

采用单因素试验及正交试验设计对枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis B201产孢培养基进行了碳源、氮源、无机盐筛选及优化,最终确定B201发酵培养基配方为玉米粉3 g/L,糖蜜10 g/L,豆粕粉10 g/L,鱼粉10 g/L,K_2HPO_4 2 g/L,Na_2HPO_4 2 g/L,MgSO_4 0.5 g/L,MnSO_4 0.5 g/L。优化后的培养基在500 L通气式机械搅拌发酵罐中进行了小试,结果表明B201生长快速,发酵16 h开始形成芽孢,26 h放罐后发酵液活菌量达到1.06×10^(10) CFU/m L,芽孢量8.8×10~9 CFU/m L,芽孢形成率为83.0%,活菌含量和芽孢形成率较高,为B201工业化生产奠定了基础。

油菜根肿病菌形态及生物学特性研究

油菜根肿病近年在四川省发生日趋严重。本文报道了油菜根肿病菌休眠孢子的显微形态结构，其在扫描电镜下休眠孢子近球形，孢壁不光滑，有乳状突起，直径为1．9-4．3μm（平均3．5μm）；透射电镜下游动孢子近球形、肾形或椭圆形，直径为1．6-3．5μm（平均2．8μm），同侧着生不等长尾鞭式双鞭毛。观察了休眠孢子萌发形成游动孢子、休止孢、休止孢再萌发形成芽管的过程。病菌休眠孢子萌发的最适温度是24℃，最适pH值是6．3，腐烂处理促进休眠孢子萌发，光抑制休眠孢子萌发，休眠孢子在过滤灭菌的根分泌物中萌发率最高为62．50％。

花生网斑病病原菌分离及生物学特性研究

花生网斑病是目前花生叶部病害中危害较为严重的一种病害,为了系统研究该病害,对河南省发生的花生网斑病病菌进行了分离鉴定,并对其生物学特性进行了初步研究,以期为花生网斑病的发生规律探索及综合防治提供依据。通过分离、鉴定,明确花生网斑病是由花生茎点霉（Phoma arachidicola Marasas Pauer＆Boerema）侵染所致。生物学特性研究表明,病菌菌丝在供试培养基上均能生长,但以PDA培养基最为适合;菌丝生长最适温度为25℃,低于5℃或高于35℃菌丝停止生长,50℃作用10min可将病原菌致死;在pH值4~10条件下均能生长,最适pH值为7;光暗交替能促进菌丝生长。病菌在燕麦培养基上产孢量最多,在水琼脂培养基上不能产孢,产孢最适温度为25℃,最适pH值为6,光暗交替有利于病菌产孢。总之,菌丝生长和产孢的最适培养基分别为PDA培养基、燕麦培养基,最适温度均为25℃,最适pH值分别为7和6,光暗交替既能促进菌丝生长,又有利于病原菌产孢。

生防木霉菌T41菌株生物学特性研究

木霉菌T41菌株是一株分离于土壤中的具有生防潜力的木霉菌株,为进一步研究菌株的发酵培养及田间应用技术提供理论依据,进行了菌株生物学特性研究。采用室内菌丝生长、产孢测定方法研究了T41菌株生物学特性,结果表明:T41菌株在PDA、PSA、PMA、NA、查彼培养基和基本培养基上均能生长,但在PDA培养基上菌丝生长和产孢最佳,菌落直径达到81mm,产孢量达到2.6×1010个;温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,在10～40℃范围能够生长产孢,以30℃时菌丝生长最快,培养2d后菌落直径达到93mm,并且产孢量也高于其他培养温度;光照处理对菌丝生长影响不明显,但光照可明显促进孢子产生。葡萄糖、木糖、果糖和麦芽糖能够较好促进菌丝生长,葡萄糖和果糖是T41菌株产孢的最佳碳源;蛋白胨、天冬酰胺是有利于菌丝生长和孢子产生的有机氮源;微量元素中Ca、Cu对菌丝生长及产孢都有一定的促进作用,而Mn、Zn则不利于T41菌丝生长和产孢;菌株在pH值2～11的范围均可以生长产孢,但偏酸性条件是T41菌株生长产孢的适宜环境,pH值5为最佳。

昆虫病原真菌蜡蚧轮枝菌生物学特性初步研究

通过在不同温湿度和营养条件下对蜡蚧轮枝菌进行研究 ,结果表明 :山西太谷地区蜡蚧轮枝菌菌丝生长和产生孢子的温度范围为 1 2～ 35℃ ,适宜温度范围为 2 0～ 32℃。该菌在SMA培养基上菌落生长最快且产孢量最多。分生孢子在 1 0～ 35℃下均能萌发 ,萌发的适宜温度为 2 5～ 32℃ ,在此温度下 ,2 0h孢子萌发率可达 96 6 1 %以上。另外相对湿度对分生孢子萌发影响很大 ,当相对湿度低于 75 %时 ,该菌的分生孢子不能萌发。

菠萝黑腐病菌生物学特性研究

本文主要探讨菠萝黑腐病菌的生物学特性。病菌的无性孢子有成熟型与幼嫩型两种,并各有大、小两种形态。用苯胺蓝液可清晰地区别成熟型与幼嫩型无性孢子。病菌的萌发除需要适宜的水、温度、PH等一般条件外,尚需有存在于马铃薯煎出液中的某种物质。葡萄糖在PDA培养基中有促进孢子萌发的作用。高温会加速小分生孢子后熟,低温则抑制其后熟。大分生孢子后熟前后在形态上无明显变化,小分生孢子后熟前为长方形,后熟后变为椭圆至卵形或长棒形。病菌生长的温度范围12°～38℃、适温25°～30℃,适生PH为3～8。

不同破壁方法对灵芝孢子粗多糖抗氧化活性的影响

采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除法、羟自由基清除法、2,2’-联氮基双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基（2,2’-azinobis(3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnicacid)diammonium salt，ABTS＋·）清除法和铁氰化钾法以及酵母细胞氧化损伤保护模型，分别对未破壁灵芝孢子（unbroken Ganoderma lucidum spore，UGS）、机械法破壁灵芝孢子（mechanically broken Ganoderma lucidum spore，MGS）、生物法与机械法复合破壁的灵芝孢子（biologically and mechanically broken Ganoderma lucidum spore，BGS）提取粗多糖进行体外抗氧化活性评价。结果表明，3种处理方法的灵芝孢子粗多糖表现出不同的抗氧化活性，且抗氧化活性与多糖质量浓度呈一定效量关系，多糖质量浓度越高，抗氧化活性越强。BGS所得粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、ABTS＋.的清除能力以及还原力在3种处理方法中均为最强。多糖质量浓度为5.0mg/mL时，对3种自由基的清除率分别为84.6%、91.0%、99.9%，还原力为1.09；BGS所得粗多糖对紫外损伤酵母细胞保护能力也相对较强。表明BGS粗多糖具有较高的抗氧化活性。