沙门菌Ⅲ型分泌蛋白融合HBx抗原介导的T细胞免疫效果观察

目的检测沙门菌减毒株作为载体,Ⅲ型分泌系统(typeⅢsecretion system,TTSS)效应蛋白-肿瘤抗原融合蛋白激发机体产生T细胞免疫反应的能力。方法重组原核表达质粒,表达Ⅲ型分泌蛋白SspH2和肿瘤抗原HBx融合分子,转化鼠伤寒沙门菌减毒株SL3261,口饲免疫小鼠。通过检测免疫小鼠脾细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放确定疫苗激发CTL作用;利用ELISPOT方法检测免疫小鼠脾淋巴细胞释放IFN-γ能力;腋下接种稳定表达HBx的B16细胞,观察免疫小鼠肿瘤的体积及重量,检测该疫苗的免疫保护效果。结果通过LDH释放试验发现,经细菌体内表达及投递SspH2-HBx融合蛋白诱发后,小鼠脾淋巴细胞具有特异的CTL反应活性;ELISPOT结果显示细菌表达、投递SspH2- HBx蛋白具有特异诱发淋巴细胞分泌IFN-γ活性;肿瘤接种试验进一步证实这种基于TIKS的肿瘤疫苗可以特异抑制肿瘤的生长。结论以沙门菌减毒株作为载体、Ⅲ型分泌蛋白SspH2作为底物融合肿瘤抗原HBx能够激发显著的T细胞免疫反应、产生一定的免疫保护作用;这种基于沙门菌TTSS的疫苗具有一定的开发、应用前景。