多肽铬螯合物对糖尿病小鼠肝脏蛋白质表达影响的研究

目的:研究多肽铬螯合物对糖尿病小鼠肝脏蛋白质表达的影响,探讨其治疗糖尿病的机理。方法:通过腹腔注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型。将小鼠分为正常组模型组和胶铬组,胶铬组以灌胃方式加入多肽铬螯合物;以光镜及HE染色观察三组小鼠肝脏形态及组织学的变化,采用SDS-PAGE实验和非SDS-PAGE检测三组小鼠肝脏蛋白质表达。结果:光镜及组织学观察结果显示多肽铬螯合物可以有效地减轻四氧嘧啶对肝细胞造成的损伤。模型组肝脏25kDa-35kDa之间的某种蛋白表达升高而多肽铬螯合物可以降低此种蛋白的表达,初步推断这种蛋白质为SOD。结论:多肽铬螯合物能够通过降低四氧嘧啶造成的肝脏中抗氧化有关的蛋白质代偿性升高而起到保护肝脏的作用,是一种新型的治疗糖尿病所致的肝损伤的活性物质。

小鼠阴道涂片技术及其染色方法的研究

目的比较研究棉签法、生理盐水冲洗法进行阴道涂片,HE染色法、瑞氏染色法、巴氏染色法染色对C57BL/6小鼠阴道涂片细胞组织染色的效果,为小鼠动情周期的确定寻找便捷、有效的检验方法。方法对10只C57BL/6雌性小鼠分两笼饲养,每日10∶00用棉签法、生理盐水法进行阴道涂片,连续15 d,并使用HE染色法、瑞氏染色法、巴氏染色法,观察记录。结果连续实验生理盐水法优于棉签法,HE染色染料易于获得;瑞氏染色分型清楚,染色佳;巴氏染色形态清晰,分色明显,透明度好。结论大样本量旨在判断动情周期的发生与改变实验应采用瑞氏染色法,可辅以巴氏染色以增强实验动物数据资料的可靠性。

冷冻切片免疫组化染色最佳固定条件探讨

目的分析不同固定液及固定时间对冷冻切片免疫组化染色的影响,寻找冷冻切片免疫组化染色最佳固定条件。方法收集新鲜送检的乳腺、肺、甲状腺手术切除标本共15例,冷冻切片后分别置于4种不同固定液(冷丙酮、95%乙醇、4%中性甲醛液、AAF液)中固定5 min和2 h,并对经4%中性甲醛液和AAF液固定的各2张切片进行热修复,根据组织含有的特定抗原进行相应抗体的免疫组化染色。结果采用4种不同固定液固定冷冻切片,均可满足快速病理诊断的需要,但染色细节存在差异;从5个方面综合分析,AAF液的染色效果优于其他3种固定液,其次为95%乙醇、4%中性甲醛、冷丙酮;就阳性强度而言,冷丙酮最强,其次为AAF液、4%中性甲醛、95%乙醇;冷冻切片固定5 min和2 h,除固定2 h阳性强度略强于固定5 min外,其他方面均无明显差异;4%中性甲醛液固定的切片经热修复后与未修复相比组织脱片破损严重,组织结构不清晰,但细胞恢复正常大小;AAF液固定的切片经热修复后与未修复相比有轻微脱片,其他方面无明显差异。结论冷冻切片进行免疫组化染色,AAF液的固定效果优于其他3种固定液;采用AAF液对冷冻切片固定5 min且不修复,整体操作时间短、染色效果好,是冷冻切片免疫组化染色非常理想的固定条件。

介入化疗对胰腺癌nm23-h1表达的影响

目的 :探讨介入化疗后胰腺癌nm2 3 -h1 (non -metastasis 2 3 -h1 )表达的变化 ,并分析其临床意义。方法 :通过对直接进行手术根治的病人 (对照组 )和先作介入化疗的病人 (介入组 )各 2 3例手术切除标本的免疫组化染色 ,了解两组间nm2 3 -h1阳性率的差别。结果 :nm2 3 -h1在有转移者的阳性表达率为 68.2 % ,高于无转移者的 33 .3 % ,而介入化疗可抑制其表达 ;介入组阳性表达率为 34 .8% ,对照组为 65 .2 %。结论 :nm2 3 -h1表达促进胰腺癌的转移 ,介入化疗后其表达下降 。

滇池微囊藻毒素对小鼠肾脏的毒性研究

为了探索滇池微囊藻毒素对小鼠肾脏的损伤作用,以滇池水华水样提取微囊藻毒素对小鼠进行连续灌胃,然后取其肾组织石蜡包埋、HE染色后对小鼠肾脏组织进行显微结构观察.结果显示,小鼠肾脏形态未见明显异常,但肾小管因细胞脱落而结构不完整,细胞间隙有炎症细胞浸润.表明肾脏可能是微囊藻毒素的靶器官,微囊藻毒素通过破坏肾单位的结构,影响其生理功能.

赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)内切型纤维素酶组分鉴定及纯化

从赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)匀浆液中提取出粗酶液,利用DNS法分析粗酶液中内切型纤维素酶(也称Cx酶)的活力.用刚果红染色法确定了赤子爱胜蚓含有3种内切型纤维素酶,将其分别称作Cx酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ和Cx酶Ⅲ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析分离内切型纤维素酶,得到0.15～0.20mol/L NaCl洗脱峰含有活性组分.以制备电泳得到了Cx酶Ⅰ和Cx酶Ⅱ,并用SDS-PAGE测定它们的分子质量分别为33 400u和28 800u.用DNS法测得在粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为40℃,最适反应pH值为7.0.

FHIT蛋白和P63蛋白在宫颈癌及CIN中的表达及临床意义

目的:探讨子宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织(CIN)中脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白和抑癌基因P63蛋白的表达及其与临床病理因素的关系,并分析其相关性。方法:应用免疫组织化学SP法检测宫颈病变组织及CIN中FHIT蛋白和P63蛋白的表达。采用SPSS统计软件分析数据。结果:慢性宫颈炎、CIN、宫颈癌中FHIT低表达与P63高表达(P<0.05)。FHIT和P63蛋白在宫颈鳞癌的表达与患者淋巴结是否转移有关。P63蛋白在宫颈鳞癌的表达与组织分化和临床分期有关。FHIT低表达与P63高表达在宫颈鳞癌及CIN中呈正相关性。结论:FHIT可作为临床监测CIN转归的分子生物学指标,也可以是宫颈鳞癌患者预后判断的参考依据。P63可以成为一个低分化鳞癌的标记因子。FHIT蛋白在CIN中与宫颈鳞癌中的低表达和P63蛋白在CIN中与宫颈鳞癌中的高表达均呈正相关性,因此两个基因在宫颈鳞癌的发生和进展过程中起了很重要的作用。

稀有鮈鲫的组织学切片制作和苏木精-伊红染色

目的目前鲜有专门针对稀有鮈鲫这种新型实验动物进行组织切片制作方法的研究,故我们对此进行了实践、摸索以建立一完整的组织学切片制作流程供参考交流。方法对正常生活状态下的健康稀有鮈鲫采用Bouin`s固定液固定,并用脱钙液软化骨骼后进行修块,组织块经梯度酒精脱水、松油醇透明之后,按照标准流程制成石蜡切片,HE染色后封片用显微镜观察。结果切片主要采取横断面和矢状面作为观察方位,并使用显微拍摄装备摄取了结构分明的各系统组织脏器的组织学照片。结论本文所述的方法经过多次探索和实践,制得的组织切片镜检结果清晰,质量稳定,可作为以稀有鮈鲫等小型硬骨鱼为实验动物的切片制作提供一些可行的建议。

CXCR4、VEGF在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

目的探讨趋化因子受体CXCR4及血管内皮生长因子VEGF在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况及其与食管鳞癌各临床病理资料的关系。方法免疫组化S-P染色法检测85例食管癌标本中CXCR4、VEGF的表达,并对其与临床病理参数的关系进行分析。结果CXCR4、VEGF在食管鳞癌中的阳性表达率分别为45.9%、50.5%,其中有淋巴结转移组CXCR4、VEGF的表达水平均高于无淋巴结转移组。而且,CXCR4阳性表达与VEGF阳性表达呈显著正相关(P<0.05)。结论CXCR4和VEGF的表达与食管癌淋巴结转移密切相关,两者在食管癌的发生和转移过程中可能起着协调作用。

头颈部淋巴管研究方法及进展

鳞状上皮癌是头颈部最常见的恶性肿瘤。在原发灶已经控制的情况下，是否出现颈部淋巴转移是影响头颈癌预后的重要因素。因此，深入认识头颈部淋巴管的结构和肿瘤经淋巴管转移的机制对于头颈部鳞癌的治疗至关重要，本文综述了文献中有关淋巴管的研究方法，以期能对淋巴管的进一步研究有所启发。

人参次苷H滴丸对慢性温和不可预见性应激大鼠的抗抑郁作用

目的探讨人参次苷H滴丸对慢性温和不可预见性应激结合孤养方法建立抑郁模型大鼠的抗抑郁作用及其作用机制。方法 96只大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组和人参次苷H滴丸28、56、112 mg/kg组,每组16只。除对照组外各组分别孤养并接受5周慢性温和不可预见性应激刺激造模。同时氟西汀(10 mg/kg)组、人参次苷H滴丸28、56、112mg/kg组ig给药,对照组、模型组ig相应体积(10 mL/kg)纯水。对大鼠体质量变化、糖水消耗比、敞箱实验行为学评分进行比较,对血浆皮质酮(CORT)、皮层、海马区神经营养因子(BDNF)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)水平变化进行检测。尼氏染色后观察海马CA1、CA3区神经元数目和形态。结果与模型组比较,人参次苷H滴丸56、112 mg/kg组体质量显著升高(P<0.05),人参次苷H滴丸28、56、112 mg/kg组糖水消耗比显著升高(P<0.01);敞箱实验中人参次苷H滴丸56 mg/kg组大鼠水平运动得分显著提高(P<0.05),56、112 mg/kg组垂直运动得分显著提高(P<0.05、0.01);人参次苷H滴丸28、56、112 mg/kg组大鼠血浆CORT水平均有所降低,但差异并无统计学意义;人参次苷H滴丸56 mg/kg组皮层、海马BDNF水平显著升高(P<0.05),人参次苷H滴丸56、112 mg/kg组大鼠皮层、海马5-HT水平显著升高(P<0.05、0.01);人参次苷H滴丸28、56 mg/kg组大鼠皮层、海马DA水平显著升高(P<0.05、0.01);人参次苷H滴丸28、56、112 mg/kg组大鼠皮层、海马NE水平升高十分显著(P<0.01)。人参次苷H滴丸28、56、112 mg/kg组海马CA1、CA3区锥体细胞形态较为规则,排列较为松散,锥体细胞数量相对增多。结论人参次苷H滴丸具有抗抑郁作用,其作用机制可能是通过改善抑郁大鼠肾上腺轴功能亢进症状,提高模型大鼠皮层与海马5-HT、DA、NE水平,上调BDNF表达,以及抑制海马CA1、CA3区神经元锥体细胞的凋亡。